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一種增強sers信號的定量分析方法及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種增強SERS信號的定量分析方法，包括以下步驟：(1)在基片上鉆圓錐孔或圓柱-圓錐孔；圓柱-圓錐孔是在圓錐孔的上方連接圓柱孔，且圓錐孔一端與圓柱孔一端相接；(2)在鉆有步驟(1)所述孔的基片表面沉積納米顆粒，得到增強基底；(3)利用增強基底結(jié)合內(nèi)標法獲取校正樣本的SERS光譜數(shù)據(jù)；(4)在校正樣本的SERS光譜數(shù)據(jù)與樣本中待測物質(zhì)濃度矢量c之間建立校正模型；(5)利用增強基底結(jié)合內(nèi)標法獲取待測樣本的SERS光譜xtest；采用校正模型計算出待測樣本中待測物質(zhì)的濃度。本發(fā)明的增強SERS信號的定量分析方法相比于平面增強基底，增強效果要強5～10倍，可以應(yīng)用在痕量物質(zhì)定量分析中。
【專利說明】-種増強化RS信號的定量分析方法及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種增強SERS信號的定量分析方法，及其在痕量物質(zhì)定量分析中的 應(yīng)用，屬于分析測試領(lǐng)域。

【背景技術(shù)】
[000引 表面增強拉曼散射（SERS，Su;rface Enhancement of Raman Scattering)效應(yīng) 是指在特殊制備的一些金屬良導(dǎo)體表面或溶膠中，在激發(fā)區(qū)域內(nèi)，由于樣品表面或近表面 的電磁場的增強導(dǎo)致吸附分子的拉曼散射信號比普通拉曼散射信號大大增強的現(xiàn)象。目 前在學(xué)術(shù)界普遍認同的SERS機理分為兩類；電磁效應(yīng)和化學(xué)效應(yīng)。電磁效應(yīng)是由于金屬 表面與激發(fā)光的相互作用使分析物電場強度增大的結(jié)果。表面等離子體共振引起的局部 電磁場增強被認為是最主要的貢獻，表面等離子體是金屬中的自由電子在光電場下發(fā)生集 體性的振蕩效應(yīng)。化學(xué)效應(yīng)是由于分析物與金屬波函數(shù)重疊而發(fā)生。當分子化學(xué)吸附于 基底表面時，表面、表面吸附原子和其它共吸附物種等都可能與分子有一定的化學(xué)作用， 該些因素對分子的電子密度分布有直接的影響，即對體系極化率的變化影響其拉曼強度 [Journal of Chemical Physics Letters,1974, 26(2):163-166 ;Advanced Functional Materials, 2013, 23(35) :4332-433引。不論考慮哪種增強機制，為了得到大的增強，金 屬表面必須具有合適的粗趟程度。目前表面增強拉曼光譜在體外的檢測分析主要有兩 種方法：干法和濕法。干法 SERS 檢:[Anal5rtical Chemistry, 1995, 67(4) :735-743 ; Langmuir,2002, 18 (18) :6839-6844 ;Analyst,2013, 138 (4) :1020-102日；RSC Advances, 2014, 4(25) : 12995-13000]是將待測樣本溶液滴加在沉積了金或銀納米顆粒 的SERS基底上，蒸發(fā)掉溶劑后，直接將激光光束聚焦到有目標分析物的區(qū)域，從而獲得 其表面增強拉曼光譜。該方法的SERS增強基底一般具有良好的重現(xiàn)性，并且使用比較 方便，適合于大批量樣本的分析檢測。然而，在檢測過程中，激光光束會產(chǎn)生局部加熱問 題，干法中激光光束是直接照射在目標分析物上的，如果激光功率過高，樣品很有可能會 被燒毀或變性，因而干法SERS檢測一般使用相對較低的激光功率，該勢必就會降低對 待測物質(zhì)的檢測靈敏度。濕法SERS檢測[Langmuir, 2013, 29化）：1908-1919 ;Chemical Communications, 2013, 49(1):30-32 ;Qiemical Communications, 2014, 50(9):1058-1060 ; Journal of Materials Chemistry C, 2014, 2 (35): 7326-7335]是先將待測溶液和銀或金 納米溶膠顆粒相混合，然后將混合液滴加到一個小反應(yīng)杯中或用點樣毛細管直接吸取混合 液，激發(fā)光將透過小反應(yīng)杯壁或毛細管壁聚焦到溶液中，從而獲得待測物質(zhì)的表面增強拉 曼光譜。在濕法SERS檢測中，大部分激光光束所產(chǎn)生的熱量被溶劑所吸收，從而避免了待 測物質(zhì)因局部過熱而受損。因而可W使用相對較高的激光功率，提高對待測物質(zhì)的檢測靈 敏度。但濕法SERS檢測受金或銀溶膠的粒徑大小、形狀W及聚集度等影響比較大，所W重 復(fù)性相對較差；另外，當需對大批量的樣本進行分析時，濕法SERS檢測不及干法SERS檢測 方便。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明為解決傳統(tǒng)干法和濕法SERS檢測的缺點，提供一種增強SERS信號的定量 分析方法，W及該方法在痕量物質(zhì)定量分析中的應(yīng)用。
[0004] 本發(fā)明的技術(shù)方案是，提供所述增強SERS信號的定量分析方法，包括W下步驟：
[0005] (1)在基片上鉆圓錐孔或圓柱-圓錐孔；所述圓柱-圓錐孔是在圓錐孔的上方連 接圓柱孔，且圓錐孔一端與圓柱孔一端相接；
[0006] (2)在鉆有步驟（1)所述孔的基片表面沉積納米顆粒，得到增強基底；
[0007] (3)利用所述增強基底結(jié)合內(nèi)標法獲取校正樣本的SERS光譜數(shù)據(jù)；
[000引 （4)在校正樣本的SERS光譜數(shù)據(jù)與樣本中待測物質(zhì)濃度矢量C之間建立校正模 型；
[0009] (5)利用所述增強基底結(jié)合內(nèi)標法獲取待測樣本的SERS光譜Xtwt;采用所述校正 模型計算出待測樣本中待測物質(zhì)的濃度。
[0010] 進一步地，所述圓錐孔的孔徑和高度能使垂直基片入射的激發(fā)光在圓錐孔內(nèi)發(fā)生 全反射。
[0011] 進一步地，所述基片為玻璃片或娃片。
[0012] 進一步地，所述納米顆粒為金納米溶膠顆粒（AuN巧或銀納米溶膠顆粒（AgNP)。
[0013] 進一步地，利用乘子效應(yīng)模型在校正樣本的SERS光譜信號與樣本中待測物質(zhì)濃 度矢量C之間建立校正模型；所述乘子效應(yīng)模型為；Xk= b kX (Cis，k 'ris+Ctarget.k 'rtarget)+dk， 其中，化=1，2,…，K)，Xk代表第k個樣本的SERS光譜；c is，k和c 分別代表第k個樣 本中內(nèi)標物質(zhì)和待測物質(zhì)的濃度；ris和r 分別代表內(nèi)標物質(zhì)和待測物質(zhì)的分子散射特 性；非乘子參數(shù)dk代表由于背景干擾和增強基底物理性質(zhì)變化對第k個校正樣本SERS光 譜信號產(chǎn)生的非乘子效應(yīng)；乘子參數(shù)bk代表由于SERS基底物理性質(zhì)W及激光光源的功率 和聚焦位置的變化對第k個校正樣本SERS光譜信號強度產(chǎn)生的乘子效應(yīng)。
[0014] 上述乘子效應(yīng)模型的基本原理是利用陳增萍及其合作者發(fā)明的如下表面增強拉 曼光譜定量分析乘子效應(yīng)模型一MEMsees("-種具有普適性的表面增強拉曼光譜定量分析技 術(shù)"，中國專利號；ZL201210243634. 0)在校正樣本的SERS光譜信號與樣本中待測物質(zhì)濃度 矢量C之間建立校正模型。本發(fā)明的上述發(fā)明專利中乘子效應(yīng)模型其進行了簡化處理，使 其可W更方便的應(yīng)用。
[0015] 進一步地，采用所述校正模型計算出待測樣本中待測物質(zhì)的濃度包括W下步驟：
[0016] (1)從校正樣本的SERS光譜數(shù)據(jù)中計算出校正樣本的乘子參數(shù)bk，化= 1，2,…，K);
[0017] 似在Xk和b之間建立校正模型b k=曰i+XkP 1;在X k和b kXCtarget，之間建立校 正模型bkXCtarget,k= a 2+而02,用多元線性回歸方法計算校正模型中的參數(shù)〇1、01、〇2和 0 2;所述多元線性回歸方法可W是偏最小二乘回歸法。
[001引做計算樣本中待測物質(zhì)濃度，即Ctest= ( 口 2+Xtest 0 2)八曰1+Xtest 0 1)。
[0019] 本發(fā)明進一步提供所述的定量分析方法在痕量物質(zhì)定量分析中的應(yīng)用。
[0020] 本發(fā)明中設(shè)計并制備了圓錐孔（圖1)和圓柱-圓錐孔（圖2)玻璃板增強基底 (簡稱'玻璃板基底'），其中，圓柱-圓錐孔是圓柱孔和圓錐孔的組合孔，是在圓錐孔的上方 連接圓柱孔，且圓錐孔一端與圓柱孔一端相接。本發(fā)明并將其應(yīng)用到復(fù)雜體系的表面增強 拉曼光譜定量分析。在該基底上進行干法或濕法SERS檢測，獲得的SERS信號要明顯強于 在平面玻璃板基底和點樣毛細管中所獲得的SERS信號，同時避免了傳統(tǒng)干法和濕法SERS 檢測的缺點。在本發(fā)明中，我們測試了 4-琉基化晚在不同孔徑和高度的圓錐孔和圓柱-圓 錐孔玻璃板基底上的SERS光譜信號，并在此基礎(chǔ)上確定了具有最佳SERS增強效果的圓錐 孔玻璃板的孔徑參數(shù)，最后成功將最佳孔徑的圓錐孔玻璃板基底與表面增強拉曼光譜定量 分析乘子效應(yīng)模型（MEMsees)相結(jié)合實現(xiàn)了血漿樣中的免疫抑制藥物一一6-琉基嚷嶺的準 確SERS定量分析。
[0021] 本發(fā)明從圓錐孔和圓柱-圓錐孔玻璃板SERS基底（S邸巧出發(fā)，考察了它們相對 于平面玻璃板和毛細管的SERS增強效果，并將其與實驗室發(fā)展的MEMseks模型相結(jié)合，用于 提高復(fù)雜體系中待測物質(zhì)的SERS檢測的靈敏度和定量分析結(jié)果的精確度。
[0022] 本發(fā)明設(shè)計的圓錐孔和圓柱-圓錐孔玻璃板基底的SERS增強效果明顯優(yōu)于平面 玻璃板基底和點樣毛細管；使用圓錐孔或圓柱-圓錐孔基底所檢測的樣本SERS光譜具有良 好的重現(xiàn)性。經(jīng)過對孔徑和高度的優(yōu)化，我們獲得了具最佳增強效果的圓錐孔玻璃板基底； 將其與MEMsees模型相結(jié)合，能有效提高對待測物質(zhì)定量分析的檢測靈敏度和定量結(jié)果的準 確度。
[0023] 本發(fā)明采用MEMseks模型在待測物質(zhì)的校正樣本SERS光譜與其濃度之間建立校正 模型；乘子效應(yīng)模型將SERS增強基底的物理性質(zhì)變化對樣本SERS光譜信號產(chǎn)生的乘子效 應(yīng)與由于背景干擾和增強基底的物理性質(zhì)變化對樣本SERS光譜信號產(chǎn)生的非乘子效應(yīng)進 行了分離，并采用OPLECm來估計校正樣本SERS光譜中乘子效應(yīng)參數(shù)值。
[0024] 本發(fā)明采用'雙校正模型'策略來消除SERS基底的物理性質(zhì)W及激光光源功率和 聚焦位置的變化對待測樣本SERS光譜產(chǎn)生的乘子效應(yīng)。
[0025] 本發(fā)明除了需要校正樣本SERS光譜和校正樣本中待測物質(zhì)濃度的信息外，沒有 其他苛刻的要求。
[0026] 本發(fā)明設(shè)計了 16種不同孔徑和高度的圓錐孔和圓柱-圓錐孔玻璃板基底（圖1、 圖2和表1)。比較相同濃度的4-琉基化晚的己醇溶液在不同孔徑和高度的圓錐孔和圓 柱-圓錐孔玻璃板SERS基底上的SERS光譜信號強度（表2)可得出；孔徑為3. 4mm和高度 為2mm的圓錐孔玻璃板基底的SERS增強效果最佳。將其與MEMseks模型相結(jié)合對血漿樣本 中6-琉基嚷嶺的含量進行了定量分析，獲得了令人滿意的結(jié)果（表3)。因此，本發(fā)明提出 的基于圓錐孔玻璃板SERS增強基底與MEMseks模型相結(jié)合的分析方法在藥物檢測、環(huán)境分析 和醫(yī)藥分析等領(lǐng)域中的目標分析物的快速檢測方面具有廣泛的應(yīng)用前景。
[0027] 由W上描述可知，本發(fā)明為一種基于圓錐孔玻璃板增強基底的SERS光譜分析方 法，適用于干法和濕法SERS檢測，并克服了現(xiàn)有干法和濕法檢測的缺點。相比于平面增強 基底，圓錐孔增強基底的增強效果要強5?10倍。將最優(yōu)孔徑和高度的圓錐孔玻璃基底與 MEMseks模型相結(jié)合能有效提高SERS定量分析精確度和靈敏度。
[002引與現(xiàn)有同類技術(shù)相比，本發(fā)明所具有如下技術(shù)效果；本發(fā)明設(shè)計的圓錐孔玻璃板 基底的SERS增強效果明顯的優(yōu)于平面玻璃板基底和點樣毛細管；本發(fā)明的圓錐孔玻璃板 基底既適用于干法SERS檢測，也適用于濕法SERS檢測；本發(fā)明的圓錐孔玻璃板基底使用一 次后，經(jīng)過簡單的清洗后可重復(fù)使用；本發(fā)明與MEMsccs模型相結(jié)合能實現(xiàn)復(fù)雜體系中待測 物質(zhì)的靈敏、準確的SERS定量分析。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0029] 圖1為本發(fā)明設(shè)計的內(nèi)嵌圓錐孔的玻璃板的示意圖。
[0030] 圖2為本發(fā)明設(shè)計的內(nèi)嵌圓柱-圓錐孔玻璃板的示意圖。
[0031] 圖3為分別采用最優(yōu)孔徑和高度的圓錐孔玻璃板基底和點樣毛細管測得的 1. 6 y M 6-琉基嚷嶺樣本的SERS光譜Olole-l、化le-2、化le-3為在圓錐孔玻璃板基底上 重復(fù)測定3次所得的SERS光譜；Capilla巧-UCapilla巧-2、Capillary-3為用點樣毛細管 取樣重復(fù)測定3次所得的SERS光譜）。
[0032] 圖4為利用圓錐孔玻璃板基底進行SERS檢測的示意圖。
[0033] 圖5為利用平面玻璃板基底進行SERS檢測的示意圖。
[0034] 圖6為利用點樣毛細管進行SERS檢測的示意圖。
[0035] 圖7為在S個相同孔徑和高度的圓錐孔玻璃板基底上所測得1 4-琉基化晚的 己醇溶液的SERS光譜。

【具體實施方式】
[0036] 實施例；圓錐孔玻璃板SERS增強基底與表面增強拉曼光譜定量分析乘子效應(yīng)模 型（MEMseks)相結(jié)合對血漿樣中6-琉基嚷嶺的定量分析。
[0037] 在本實施例中，我們首先采用4-琉基化晚的己醇溶液來確定玻璃板基底上圓錐 孔的孔徑和高度的最佳值，然后將最佳孔徑和高度得圓錐孔玻璃板基底與MEMsees模型相結(jié) 合對血漿樣中6-琉基嚷嶺進行SERS光譜準確定量分析。
[003引本實施例中所用試劑及來源如下；4-琉基化晚（96% )、4-琉基苯甲酸（90% )、一 水合6-琉基嚷嶺巧9. 5% )、3-氨基丙基S己氧基娃燒（APTMS，98% )和硝酸銀巧9. 9% ) 購自阿拉了試劑有限公司；二水合巧樣酸=鋼（分析純）購于中國上海西格瑪-阿拉了化 學(xué)試劑有限公司；濃鹽酸、濃硝酸和濃硫酸購于中國株洲化工研究所；30%的過氧化氨購 于中國上海國藥集團化學(xué)試劑有限公司。己醇（分析純）購于上海泰坦科技股份有限公 司；血漿樣品由長沙市血液中屯、提供；實驗所用超純水（18. 2MQ cm4)由中國重慶艾科浦的 超純水儀生產(chǎn)的。
[0039] 本實施例的主要實驗步驟如下；
[0040] (1)銀納米溶膠的制備；實驗中所使用的玻璃器皿均首先用新配制的王水浸泡8 小時W上，然后用超純水洗凈，烘干待用。銀納米溶膠是按巧樣酸=鋼還原硝酸銀的方法制 備的。其簡要過程如下；準確稱取18. OOmg硝酸銀并將其溶于lOOmL超純水中后，倒入S口 燒瓶中快速攬拌并加熱至沸騰，接著迅速加入2mL 1% (m/V)巧樣酸=鋼溶液，當溶液變?yōu)?±黃色后，保持微沸狀態(tài)持續(xù)反應(yīng)30min，然后移去熱源，繼續(xù)攬拌冷卻至室溫，即得到銀納 米溶膠。將銀納米溶膠放入棟色試劑瓶中，保存在4°C冰箱中備用；
[0041] (2)圓錐孔玻璃板基底的衍生化：先將圓錐孔玻璃板基底放入濃硫酸和雙氧水混 合液化S04:H202= 4:l，v/v)中水浴60°C活化lOmin，然后用超純水超聲清洗3次和無水己 醇超聲清洗1次，每次5min，最后烘干。將潔凈的圓錐孔玻璃板基底放入2% APTMS己醇溶 液中反應(yīng)24小時，然后取出用超純水和無水己醇間換清洗2次，除去殘留的APTMS，在37°C 下烘干，再放入到銀溶膠中浸泡反應(yīng)12小時W上，沉積好銀納米顆粒的圓錐孔玻璃板板基 用超純水清洗備用；
[0042] 做用無水己醇配制13mM的4-琉基化晚儲備液，保存于4°C冰箱中。用超純水將 4-琉基化晚儲備液稀釋到luM后，將其滴加到沉積了銀納米顆粒的16塊鉆有不同孔徑和 高度的圓錐孔和圓柱-圓錐孔玻璃板基底上（表1)，反應(yīng)比后用超純水沖洗干凈，37°C烘 干。英國雷巧紹化enishaw)公司的Invia-Reflex激光共聚焦倒置顯微拉曼光譜儀（激光 光源出e-Ne激光器，激光波長；633nm激光功率；17mW，檢測器：空氣冷卻型1024X256像素 的CCD，顯微鏡：妹卡（Leica)顯微鏡，配有50倍長焦物鏡）測量玻璃板基底上吸附的4-琉 基化晚的SERS光譜。SERS光譜測量的曝光時間為Is,累計掃描次數(shù)為3次，掃描中屯、波數(shù) 設(shè)置為llSOcnTi。同一塊玻璃板基底上鉆有多個相同孔徑和高度的圓錐孔或圓柱-圓錐孔。 隨機選取了其中3個圓錐孔或圓柱-圓錐孔測量SERS光譜；
[00創(chuàng) （4)用無水己醇配制2mM 6-琉基嚷嶺儲備液和2mM 4-琉基苯甲酸儲備液，并 保存在4°C冰箱中備用。用超純水稀釋不同體積的6-琉基嚷嶺儲備液得到13個濃度在 0. 020 yM到2.000 yM之間的6-琉基嚷嶺校正樣本。在離屯、管中加入1血血漿樣本和 500 y L 2mM的6-琉基嚷嶺儲備液，用甲醇定容到10血，超聲30min，然后在10000轉(zhuǎn)/分鐘 的轉(zhuǎn)速下離屯、15min，取1血上清液用超純水稀釋至10血，即6-琉基嚷嶺的血漿工作液。用 超純水稀釋不同體積的6-琉基嚷嶺的血漿工作液得到6-琉基嚷嶺濃度分別為0. 30、0. 50、 0. 90、1. 30、1. 50、1. 70和1. 90 y M的血漿測試樣本。用超純水稀釋2mM 4-琉基苯甲酸儲備 液得到1. 2 y M的4-琉基苯甲酸工作液。將10 y L待測樣本（6-琉基嚷嶺校正樣本或血漿 測試樣本）與10 y L 1. 2 y M 4-琉基苯甲酸工作液、20 y L的銀溶膠和2. 5 y L 2M的氯化 鐘充分混合后，將該混合溶液滴加到玻璃板基底的圓錐孔內(nèi)，用美國必達泰克公司的便攜 式i-Raman78甜光譜儀（激光波長；785皿，激光功率；300mW，檢測器系統(tǒng)；BAC151A的拉曼 成像顯微采樣系統(tǒng)和20倍長焦物鏡）進行SERS光譜測量。SERS光譜測量的曝光時間是 5000ms，掃描范圍是400cm-i?1700cm-1。每個樣本重復(fù)測量S次；
[0044] (5)根據(jù)6-琉基嚷嶺和4-琉基苯甲酸（內(nèi)標物）的SERS光譜峰的位置，選擇拉 曼位移在400?1700cm-i范圍內(nèi)的SERS光譜數(shù)據(jù)進行定量分析；
[0045] 做采用MEMseks模型進行定量分析；首先使用OPLECm方法估算出校正樣本SERS光 譜的乘子效應(yīng)參數(shù)，然后采用'雙校正模型'策略預(yù)測血漿測試樣本中6-琉基嚷嶺的含量；
[0046] (7)采用預(yù)測均方根誤差

【權(quán)利要求】
1. 一種增強SERS信號的定量分析方法，包括以下步驟： (1) 在基片上鉆圓錐孔或圓柱-圓錐孔；所述圓柱-圓錐孔是在圓錐孔的上方連接圓 柱孔，且圓錐孔一端與圓柱孔一端相接； (2) 在鉆有步驟（1)所述孔的基片表面沉積納米顆粒，得到增強基底； (3) 利用所述增強基底結(jié)合內(nèi)標法獲取校正樣本的SERS光譜數(shù)據(jù)； (4) 在校正樣本的SERS光譜數(shù)據(jù)與樣本中待測物質(zhì)濃度矢量c之間建立校正模型； (5) 利用所述增強基底結(jié)合內(nèi)標法獲取待測樣本的SERS光譜xtest;采用所述校正模型 計算出待測樣本中待測物質(zhì)的濃度。
2. 如權(quán)利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述圓錐孔的孔徑和高度能使垂 直基片入射的激發(fā)光在圓錐孔內(nèi)發(fā)生全反射。
3. 如權(quán)利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述基片為玻璃片或硅片。
4. 如權(quán)利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述納米顆粒為金納米溶膠顆粒 (AuNP)或銀納米溶膠顆粒（AgNP)。
5. 如權(quán)利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，利用乘子效應(yīng)模型在校正樣本的 SERS光譜信號與樣本中待測物質(zhì)濃度矢量c之間建立校正模型； 所述乘子效應(yīng)模型為： xk - b kX (cIS；k ? rIS+ct arg et；k ? rt arg et)+dk, 其中，（k = 1，2,…，K)，xk代表第k個樣本的SERS光譜；c IS，jP c t a,g 分別代表第 k個樣本中內(nèi)標物質(zhì)和待測物質(zhì)的濃度；rIS和分別代表內(nèi)標物質(zhì)和待測物質(zhì)的分 子散射特性；非乘子參數(shù)dk代表由于背景干擾和增強基底物理性質(zhì)變化對第k個校正樣本 SERS光譜信號產(chǎn)生的非乘子效應(yīng)；乘子參數(shù)bk代表由于SERS基底物理性質(zhì)以及激光光源 的功率和聚焦位置的變化對第k個校正樣本SERS光譜信號強度產(chǎn)生的乘子效應(yīng)。
6. 如權(quán)利要求5所述的定量分析方法，其特征在于，采用所述校正模型計算出待測樣 本中待測物質(zhì)的濃度包括以下步驟： (1) 從校正樣本的SERS光譜數(shù)據(jù)中計算出校正樣本的乘子參數(shù)bk，（k= 1，2,…，K); (2) 在xk和bk之間建立校正模型bk= a ^^^在義^匕一^^^^之間建立校正 模型bkXctmget，k= a 2+xk|32，用多元線性回歸方法計算校正模型中的參數(shù) 負2; (3) 計算樣本中待測物質(zhì)濃度，即ctest= (a
7. -種如權(quán)利要求1-6任一所述的定量分析方法在痕量物質(zhì)定量分析中的應(yīng)用。
【文檔編號】G01N21/65GK104502326SQ201510002031
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2015年1月5日 優(yōu)先權(quán)日:2015年1月5日
【發(fā)明者】陳增萍, 陳瑤, 田中群 申請人:湖南大學(xué)