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專利名稱：用于熒光計的液池的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型涉及一種熒光測定裝置。
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR)是通過一對引物對基因組或克隆的靶序列進(jìn)行外酶促擴(kuò)增的系統(tǒng)。用PCR技術(shù)可以在3h內(nèi)將靶序列放大109倍。經(jīng)過10多年的發(fā)展，這一技術(shù)現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)生物科學(xué)和臨床研究的諸多領(lǐng)域，如直接測序、基因克隆、DNA分型、點介導(dǎo)的突變、產(chǎn)前遺傳性疾病研究、等位基因變異分析、食品污染及環(huán)境微生物檢測等。PCR產(chǎn)物的傳統(tǒng)檢測法有凝膠電泳及核酸固相雜交法。這2種方法存在耗時、操作步驟繁瑣、可能由于先前擴(kuò)增產(chǎn)物的傳遞污染而導(dǎo)致假陽性結(jié)果等缺點。近年來發(fā)展的PCR-ELISA技術(shù)將PCR擴(kuò)增與ELISA檢測相結(jié)合，使檢測過程大為縮短，適合于大批樣品分析，但因污染而導(dǎo)致的假陽性問題仍是該法存在的主要問題。熒光分析法及熒光標(biāo)記物由于具有選擇性好、靈敏度高、可選擇參數(shù)多、容易克服背景干擾等優(yōu)點而在PCR產(chǎn)物的檢測中日益受到重視。這一方法尤其在實現(xiàn)PCR產(chǎn)物的均相封管測定從而解決污染問題方面具有獨到的優(yōu)越性。但是現(xiàn)有商品化的熒光計(含熒光分光光度計)所用的液池一般呈方形筒狀，由玻璃或石英制成，不能直接用于PCR產(chǎn)物的檢測。這一缺陷極大地限制了PCR產(chǎn)物熒光檢測技術(shù)的推廣和普及。國外已開發(fā)了可用于PCR產(chǎn)物直接測定的熒光儀器(TshiguraT.Anl.Biochem.,(1995,229:207～213)，采用耐熱的聚丙烯代替聚苯乙烯制成專用的PCR反應(yīng)板用于PCR擴(kuò)增，在用該系統(tǒng)進(jìn)行微孔掃描測定。已商品化的這類儀器均為專用系統(tǒng)，功能單一，價格昂貴，且不能與現(xiàn)行廣泛使用的PCR反應(yīng)管兼容，使這類儀器的推廣應(yīng)用受到了很大的限制。因此，如何對現(xiàn)行的熒光分光光度計(或熒光計)進(jìn)行適當(dāng)改造，使其可與現(xiàn)用的PCR反應(yīng)管兼容用于PCR產(chǎn)物的帶管測定，是一項具有很大現(xiàn)實意義的工作。
本實用新型的目的旨在提供一種可容納PCR反應(yīng)管，在現(xiàn)有商品化的熒光計(含熒光分光光度計)上用于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)產(chǎn)物的直接檢測的熒光計液池。
本實用新型設(shè)有一由硬質(zhì)材料制成的長方體池體，由池體的上方開設(shè)呈倒圓錐體狀的池槽，在池體下部一側(cè)開設(shè)激發(fā)光入射孔，在其余側(cè)面開設(shè)至少1個發(fā)射光出射孔。
所說的硬質(zhì)材料為高分子材料，不銹鋼或有機(jī)玻璃等。所說的激發(fā)光入射孔和發(fā)射光出射孔為圓形，方形，梯形，三角形，多邊形或其他形狀。
使用時PCR反應(yīng)管插入池槽。需要時池體底部可設(shè)池底座，以適用于不同入射方向的儀器。池體、池槽、激發(fā)光入身射孔與發(fā)射光出射孔的尺寸可依PCR反應(yīng)管的體積而定。
由于在現(xiàn)有商品化的熒光計(含熒光分光光度計)配用本實用新型可解決PCR反應(yīng)管與現(xiàn)有熒光計不能兼容的問題，從而實現(xiàn)PCR產(chǎn)物帶管直接熒光檢測，操作簡便，測定迅速，可最大程度地克服已有PCR技術(shù)存在的主要問題-污染。由于本實用新型可隨時裝卸，裝上時可進(jìn)行PCR產(chǎn)物的檢測，不裝時，可按平常使用，適于水平入射或垂直入射以及不同PCR反應(yīng)管容積，因此本實用新型拓寬了熒光計的功能。由于一般的熒光分光光度計均具有多種功能，可提供多種熒光測定參數(shù)，因此在使用本實用新型后，不僅可進(jìn)行PCR產(chǎn)物的定性定量分析，還可利用原來儀器功能多樣的特點通過多種熒光參數(shù)的測量而獲得有關(guān)PCR產(chǎn)物的更多信息。另外，已有所用的PCR產(chǎn)物熒光檢測系統(tǒng)，其激發(fā)波長和發(fā)射波長都是固定的，因此使其在熒光試劑的選擇上受到很大的限制(僅限于熒光素-羅丹明這一對能量轉(zhuǎn)移體系)。但使用本實用新型后，由于測定是在熒光分光光度計、熒光計上進(jìn)行，激發(fā)波長和發(fā)射波長可在寬廣的范圍內(nèi)選擇，從而極大地拓寬了熒光試劑的選擇范圍，給使用者帶來很大方便。


圖1為本實用新型的結(jié)構(gòu)圖。
如圖1所示，設(shè)有高分子材料制成的長方體池體1，從池體1的上方開設(shè)呈倒圓錐體狀的池槽2，在池體1的下部一側(cè)開設(shè)呈正方形的激發(fā)光入射孔3，在其余側(cè)面開設(shè)2個呈正方形的發(fā)射光出射孔4,5。在入射孔3的對面一側(cè)也可設(shè)發(fā)射光出射孔。作為實施例，池體的長、寬、高分別為12.5、12.5、30mm，池槽開口直徑為φ8mm，入射孔3和出射孔4,5的長為5mm。
權(quán)利要求1．用于熒光計的液池，其特征在于設(shè)有一由硬質(zhì)材料制成的長方體池體，由池體的上方開設(shè)呈倒圓錐體狀的池槽，在池體下部一側(cè)開設(shè)激發(fā)光入射孔，在其余側(cè)面開設(shè)至少1個發(fā)射光出射孔。
2．如權(quán)利要求1所述的用于熒光計的液池，其特征在于所說的硬質(zhì)材料為高分子材料，不銹鋼或有機(jī)玻璃。
3．如權(quán)利要求1所述的用于熒光計的液池，其特征在于所說的激發(fā)光入射孔和發(fā)射光出射孔為圓形，方形，三角形，多邊形或其他形狀。
專利摘要涉及一種熒光測定裝置,設(shè)硬質(zhì)材料制成的長方體池體,上方設(shè)倒圓錐體狀的池槽,在池體下部一側(cè)設(shè)激發(fā)光入射孔,在其余側(cè)面開設(shè)至少1個發(fā)射光出射孔。解決PCR反應(yīng)管與現(xiàn)有熒光計不能兼容的問題,實現(xiàn)PCR產(chǎn)物帶管直接熒光檢測,操作簡便,測定迅速,克服PCR技術(shù)的污染問題,拓寬熒光計的功能。
文檔編號G01N33/52GK2344777SQ9824341
公開日1999年10月20日 申請日期1998年9月16日 優(yōu)先權(quán)日1998年9月16日
發(fā)明者李東輝, 許金鉤, 廖綿初 申請人:廈門大學(xué)