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一種茶粕、椿油粕及其制品中茶皂素含量的測定方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種茶粕、椿油粕及其制品中茶皂素含量的測定方法，包括以下步驟：1）提取：稱取待測樣品，記下質量M，置于三角磨口燒瓶中，加入100mL無水乙醇，沸水浴回流2h，熱水浴靜置1h，趁熱將提取液過濾后濾入經(jīng)105℃恒重的平底燒瓶中，記下平底燒瓶的質量M1，再向三角磨口燒瓶中加入40mL無水乙醇，繼續(xù)沸水浴回流1h，熱水浴靜置1h，趁熱將提取液過濾后濾入平底燒瓶中；2）提取物的干燥：將盛有提取液的平底燒瓶蒸發(fā)至近干，將平底燒瓶移入恒溫烘箱，在105℃的條件下烘2h，再烘30min，直到恒重，記下平底燒瓶的質量M2；3）計算：待測樣品中茶皂素含量（%）為：（M2-M1）/M×100。本發(fā)明的茶粕、椿油粕及其制品中茶皂素含量的測定方法步驟簡單，結果準確。
【專利說明】一種茶粕、椿油粕及其制品中茶皂素含量的測定方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法。
【背景技術】
[0002]茶皂素(又名茶皂甙)是由茶樹種子中提取出來的一類醣甙化合物，是一種性能優(yōu)良的非離子型天然表面活性劑，具有乳化、分散、濕潤、發(fā)泡等性能，有抗?jié)B、消炎、鎮(zhèn)痛等方面的藥理作用，同時還有滅菌殺蟲和刺激某些植物生長的功能。近年來應用于水產(chǎn)清塘、沿海農田殺螺、蔬菜種植殺蚯蚓等蟲害，在工業(yè)、農業(yè)及醫(yī)藥領域有著廣泛的應用前景。我國現(xiàn)有茶油栽培面積約3.67 X 106hm2，每年的茶籽產(chǎn)量在65萬t左右，約生產(chǎn)15萬t茶油以及50萬t的茶籽餅柏，茶籽資源十分豐富，利用潛力巨大，開發(fā)茶皂素的應用有重要的現(xiàn)實意義和十分廣闊的前景。目前，國內外對茶皂素中皂甙含量測定主要有以下幾種:(1)重量法(皂苷元定量法)。該方法涉及到換算系數(shù)的問題，由于不同研究者對茶皂苷分子量的測定值略有出入，且該方法分析所需時間長，操作繁瑣，試劑消耗量大，難以滿足工業(yè)分析的需要；(2)比色法。利用三萜類皂苷的顯色反應，選擇一種線性關系良好的顯色劑，用分光光度計測吸光度，用對照品皂苷的標準工作曲線定量，此種方法操作步驟繁瑣，不易操作；
[3]熒光光度法。通常情況下用該方法對茶皂苷進行測定時，無需對樣品進行特殊或分離處理便可直接測定，線性范圍為0-4.25mg/mL。該法重現(xiàn)性和靈敏度優(yōu)于速差法，但熒光法的回收率偏低，測量濃度范圍稍小，僅適用于微量茶皂苷的測定；(4)薄層掃描法。該方法重現(xiàn)性好，回收率高，結果較準確，穩(wěn)定性好，但該法比較復雜，不易分離；(5)溴酸鉀法。由于茶皂苷有些含一個雙鍵、有些含兩個雙鍵，因此茶皂苷與溴加成的η值需要通過對純品測試結果來確定；且由于干擾溴加成反應的影響因素較多，該方法在測定之前需對試樣加以預處理，比較復雜；(6)高效液相色譜法。該法具有高壓、快速、高效、靈敏度的特點，但由于茶皂苷結構的相似性和復雜性，目前主要應用于茶皂苷的分離和純化方面。綜合分析，并無茶柏中茶皂素含量的測定方法。

【發(fā)明內容】

[0003]為解決上述技術問題，本發(fā)明提供一種茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，易于操作，結果較準確。
[0004]本發(fā)明的茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，包括以下步驟:
1)提取:稱取待測樣品，記下質量Μ，置于干燥的250mL的三角磨口燒瓶中，加入IOOmL無水乙醇，裝上干燥的冷凝回流器，沸水浴干燥回流2h，取下冷凝器，將三角磨口燒瓶斜置于熱水浴鍋上，靜置lh，趁熱將提取液過濾后濾入經(jīng)105°C恒重的平底燒瓶中，記下平底燒瓶的自身質量M1，不溶物保留在三角燒瓶中，再向三角磨口燒瓶中加入40mL無水乙醇，繼續(xù)沸水浴回流lh，靜置lh，趁熱將提取液過濾后投入所述平底燒瓶中；
2)提取物的干燥:將盛有提取液的平底燒瓶蒸發(fā)至近干，將平底燒瓶移入恒溫烘箱，在105°C的條件下烘2h，取出，放在干燥器內冷卻后稱重，再烘30min，冷卻稱重，直到恒重，并記下平底燒瓶的總體質量M2 ；
3)計算:待測樣品中茶皂素含量(％)為:(M2-M1) /MX 100。
[0005]本發(fā)明的茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，在步驟I)中:所述提取過程采用無水乙醇作為提取液，提取液過濾時采用脫脂棉進行過濾。
[0006]本發(fā)明的茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，在步驟2)中，所述盛有提取液的平底燒瓶在蒸發(fā)時采用以下步驟進行:將盛有提取液的平底燒瓶裝于旋轉蒸發(fā)儀上，旋轉蒸發(fā)至近干。
[0007]本發(fā)明的茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，在步驟2)中，所述盛有提取液的平底燒瓶在蒸發(fā)時采用以下步驟進行:將盛有提取液的平底燒瓶裝上索氏抽提管和回流冷凝器，在水浴上將無水乙醇蒸入索氏抽提管中進行回收，至燒瓶內的無水乙醇近干。
[0008]與現(xiàn)有技術相比本發(fā)明的有益效果為:本發(fā)明的茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法步驟簡單，回收率高，結果較準確，穩(wěn)定性好，操作時間短。
【具體實施方式】
[0009]下面結合實施例，對本發(fā)明的【具體實施方式】作進一步詳細描述。以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0010]實施例1
一種茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，包括以下步驟:
1)提取:稱取待測樣品5.00克，記下質量M，置于干燥的容量為250mL的三角磨口燒瓶中，加入IOOmL無水乙醇，裝上干燥的冷凝回流器，沸水浴干燥回流2h，取下冷凝器，將三角磨口燒瓶斜置于熱水浴鍋上，靜置lh，趁熱將提取液通過脫脂棉過濾后濾入經(jīng)105°C恒重的平底燒瓶中，記下平底燒瓶的自身質量M1, M1的值為81.4898克，不溶物保留在三角燒瓶中，再向三角磨口燒瓶中加入40mL無水乙醇，繼續(xù)沸水浴回流lh，靜置lh，趁熱將提取液通過脫脂棉過濾后投入所述平底燒瓶中；
2)提取物的干燥:將盛有提取液的平底燒瓶蒸發(fā)至近干，將平底燒瓶移入恒溫烘箱，在105°C的條件下烘2h，取出，放在干燥器內冷卻后稱重，再烘30min，冷卻稱重，直到恒重，并記下平底燒瓶的總體質量M2，M2的值為82.3742克；
3)計算:待測樣品中茶皂素含量(％)為:(M2-M1)/MX 100= (82.3742-81.4898)/5X100=17.69%ο
[0011]本發(fā)明的茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，在步驟2)中，所述盛有提取液的平底燒瓶在蒸發(fā)時采用以下步驟進行:將盛有提取液的平底燒瓶裝于旋轉蒸發(fā)儀上，旋轉蒸發(fā)至近干。
[0012]實施例2
一種茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，包括以下步驟:
I)提取:稱取待測樣品5.00克，記下質量M，置于干燥的容量為250mL的三角磨口燒瓶中，加入IOOmL無水乙醇，裝上干燥的冷凝回流器，沸水浴干燥回流2h，取下冷凝器，將三角磨口燒瓶斜置于熱水浴鍋上，靜置lh，趁熱將提取液通過脫脂棉過濾后濾入經(jīng)105°C恒重的平底燒瓶中，記下平底燒瓶的自身質量M1, M1的值為115.2506克，不溶物保留在三角燒瓶中，再向三角磨口燒瓶中加入40mL無水乙醇，繼續(xù)沸水浴回流lh，靜置lh，趁熱將提取液通過脫脂棉過濾后投入所述平底燒瓶中；
2)提取物的干燥:將盛有提取液的平底燒瓶蒸發(fā)至近干，將平底燒瓶移入恒溫烘箱，在105°C的條件下烘2h，取出，放在干燥器內冷卻后稱重，再烘30min，冷卻稱重，直到恒重，并記下平底燒瓶的總體質量M2, M2的值為116.1959克
3)計算:待測樣品中茶皂素含量(％)為=(M2-M1)/MX100= (116.0959-115.2506)/5X100=16.91%。
[0013]本發(fā)明的茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，在步驟2)中，所述盛有提取液的平底燒瓶在蒸發(fā)時采用以下步驟進行:將盛有提取液的平底燒瓶裝上索氏抽提管和回流冷凝器，在水浴上將無水乙醇蒸入索氏抽提管中進行回收，至燒瓶內的無水乙醇近干。
[0014]實施例3
一種茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，包括以下步驟:
1)提取:稱取待測樣品5。00克，記下質量M，置于干燥的容量為250mL的三角磨口燒瓶中，加入IOOmL無水乙醇，裝上干燥的冷凝回流器，沸水浴干燥回流2h，取下冷凝器，將三角磨口燒瓶斜置于熱水浴鍋上，靜置lh，趁熱將提取液通過脫脂棉過濾后濾入經(jīng)105°C恒重的平底燒瓶中，記下平底燒瓶的自身質量M1, M1的值為91.8757克，不溶物保留在三角燒瓶中，再向三角磨口燒瓶中加入40mL無水乙醇，繼續(xù)沸水浴回流lh，靜置lh，趁熱將提取液通過脫脂棉過濾后投入所述平底燒瓶中；
2)提取物的干燥:將盛有提取液的平底燒瓶蒸發(fā)至近干，將平底燒瓶移入恒溫烘箱，在105°C的條件下烘2h，取出，放在干燥器內冷卻后稱重，再烘30min，冷卻稱重，直到恒重，并記下平底燒瓶的總體質量M2, M2的值為92.7742克
3)計算:待測樣品中茶皂素含量(％)% =(M2-M1)ZMXlOO= (92.7742-91.8757)/5X100=17.97%。
[0015]本發(fā)明的茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，在步驟2)中，所述盛有提取液的平底燒瓶在蒸發(fā)時采用以下步驟進行:將盛有提取液的平底燒瓶裝上索氏抽提管和回流冷凝器，在水浴上將無水乙醇蒸入索氏抽提管中進行回收，至燒瓶內的無水乙醇近干。
[0016]本發(fā)明的茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法步驟簡單，回收率高，結果準確，穩(wěn)定性好，操作時間短。
[0017]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出，對于本【技術領域】的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明技術原理的前提下，還可以做出若干改進和變型，這些改進和變型也應視為本發(fā)明的保護范圍。
【權利要求】
1.一種茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，其特征在于，包括以下步驟: 1)提取:稱取待測樣品，記下質量M，置于干燥的250mL的三角磨口燒瓶中，加入IOOmL無水乙醇，裝上干燥的冷凝回流器，沸水浴干燥回流2h，取下冷凝器，將三角磨口燒瓶斜置于熱水浴鍋上，靜置lh，趁熱將提取液過濾后濾入經(jīng)105°C恒重的平底燒瓶中，記下平底燒瓶的自身質量M1，不溶物保留在三角燒瓶中，再向三角磨口燒瓶中加入40mL無水乙醇，繼續(xù)沸水浴回流lh，靜置lh，趁熱將提取液過濾后投入所述平底燒瓶中； 2)提取物的干燥:將盛有提取液的平底燒瓶蒸發(fā)至近干，將平底燒瓶移入恒溫烘箱，在105°C的條件下烘2h，取出，放在干燥器內冷卻后稱重，再烘30min，冷卻稱重，直到恒重，并記下平底燒瓶的總體質量M2 ； 3)計算:待測樣品中茶皂素含量(％)為:(M2-M1)/MX 100。
2.根據(jù)權利要求1所述的茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，其特征在于，在步驟I)中:所述提取劑采用乙醇，且提取方式采用索氏抽提方式。
3.根據(jù)權利要求1所述的茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，其特征在于，在步驟2)中，所述盛有提取液的平底燒瓶在蒸發(fā)時采用以下步驟進行:將盛有提取液的平底燒瓶裝于旋轉蒸發(fā)儀上，旋轉蒸發(fā)至近干。
4.根據(jù)權利要求1所述的茶柏、椿油柏及其制品中茶皂素含量的測定方法，其特征在于，在步驟2)中，所述盛有提取液的平底燒瓶在蒸發(fā)時采用以下步驟進行:將盛有提取液的平底燒瓶裝上索氏抽提管和回流冷凝器，在水浴上將無水乙醇蒸入索氏抽提管中進行回收，至燒瓶內的無水乙醇近干。
【文檔編號】G01N5/04GK103698244SQ201310631681
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年12月3日 優(yōu)先權日:2013年12月3日
【發(fā)明者】江龍發(fā), 白凌云, 魏遠隆, 鄒燕華, 于清麗, 楊偉根, 喻紅亮 申請人:江西出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫綜合技術中心