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一種染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置制造方法
【專利摘要】本實(shí)用新型公開(kāi)了一種染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置，包括端蓋，端蓋上設(shè)置有一個(gè)貫通端蓋兩側(cè)的通管，通管伸出端蓋外側(cè)的一端上通過(guò)可拆卸安裝的吸液管連通有吸液件，通管伸入端蓋內(nèi)側(cè)的一端上安裝有染色吸管；所述的吸液管上安裝有三通閥，吸液管上還加工有與三通閥配合的排氣孔；轉(zhuǎn)動(dòng)三通閥可使得吸液件只與染色吸管連通吸取染色液，再轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)動(dòng)三通閥可使得吸液件只與排氣孔連通排氣，反復(fù)吸取染色液，直至足量；所述的彈性條放置在染色吸管內(nèi)，染色吸管吸入染色液用于為超薄切片染色；所述的端蓋設(shè)置在不透光的支架瓶上，將染色吸管放置在不透光的支架瓶?jī)?nèi)，防止染色液見(jiàn)光。
【專利說(shuō)明】一種染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型屬切片染色領(lǐng)域，涉及薄切片的染色，具體涉及一種超薄切片的染色輔助裝置。

【背景技術(shù)】
[0002]在電鏡超薄切片染色過(guò)程中，使用的染料及液體多為放射性或重金屬污染的液體，在整個(gè)操作過(guò)程中對(duì)環(huán)境及操作者都是一種污染。以往的透射電鏡超薄切片染色大多是將超薄切片撈在銅網(wǎng)或鎳網(wǎng)上進(jìn)行染色，整個(gè)過(guò)程需多次夾取銅網(wǎng)或鎳網(wǎng)，在不同染料中染色，或者在銅網(wǎng)、鎳網(wǎng)上滴上染料進(jìn)行染色，每次染色都需要大量的染色液體，不利于液體回收，且這種方法染色后，切片染色質(zhì)量不高，雜質(zhì)較多。銅網(wǎng)或鎳網(wǎng)的直徑為3_，厚度為0.03?0.02mm，非常小而薄，在染色過(guò)程中用鑷子反復(fù)夾取非常容易掉落及破損，以至于污染和損壞切片，使切片正反面混淆，嚴(yán)重影響后續(xù)的電鏡觀察工作。目前也有專門(mén)用于此項(xiàng)染色的超薄切片染色機(jī)，但實(shí)際操作起來(lái)很不實(shí)用。首先，使用染色機(jī)染色，染液的消耗量非常大；其次染色時(shí)間比較長(zhǎng)，而且染色數(shù)量一次只允許染不超過(guò)30張切片等。對(duì)于電鏡切片量大，時(shí)間要求緊的單位，很難在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)完成染色及診斷工作。
[0003]超薄切片的染色是生物樣品電鏡技術(shù)中樣品制備的重要一環(huán)。超薄切片在染色過(guò)程中的污染是很難避免的。用傳統(tǒng)的染色方法進(jìn)行染色，不但操作麻煩而且容易污染。雖然現(xiàn)在有報(bào)道介紹各種避免切片污染的染色方法，但操作程序大都比較復(fù)雜。市面上也有成品的染色儀出售，但價(jià)格昂貴、所需染色液量也大。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本實(shí)用新型的目的在于，提供一種染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置，很好地避免了染色液污染，并且能夠調(diào)節(jié)染色液的量。
[0005]為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本實(shí)用新型采用如下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn):
[0006]一種染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置，包括由硅橡膠材料制成的彈性條，彈性條上加工有均勻分布的卡槽，卡槽用于嵌入卡住銅網(wǎng)片，銅網(wǎng)片上吸附有超薄切片；
[0007]所述的染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置還包括端蓋，端蓋上設(shè)置有一個(gè)貫通端蓋兩側(cè)的通管，通管伸出端蓋外側(cè)的一端上通過(guò)可拆卸安裝的吸液管連通有吸液件，通管伸入端蓋內(nèi)側(cè)的一端上安裝有染色吸管；
[0008]所述的吸液管上安裝有三通閥，吸液管上還加工有與三通閥配合的排氣孔；轉(zhuǎn)動(dòng)三通閥可使得吸液件只與染色吸管連通吸取染色液，再轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)動(dòng)三通閥可使得吸液件只與排氣孔連通排氣，反復(fù)吸取染色液，直至足量；
[0009]所述的彈性條放置在染色吸管內(nèi)，染色吸管吸入染色液用于為超薄切片染色；
[0010]所述的端蓋設(shè)置在不透光的支架瓶上，將染色吸管放置在不透光的支架瓶?jī)?nèi)，防止染色液見(jiàn)光。
[0011]本實(shí)用新型還具有如下區(qū)別技術(shù)特征:
[0012]所述的端蓋與支架瓶之間通過(guò)螺紋副連接，使得支架瓶?jī)?nèi)的空氣與外界不流通，減少染色液的污染。
[0013]所述的吸液件為乳膠吸管。
[0014]所述的吸液件為注射器。
[0015]所述的三通閥上加工有三個(gè)連通的通道，第一通道和第二通道同軸線設(shè)置連通，第三通道和第一通道垂直設(shè)置；
[0016]當(dāng)?shù)谝煌ǖ琅c吸液件連通、第二通道與染色吸管連通以及第三通道與吸液管上沒(méi)有加工有排氣孔一側(cè)的內(nèi)壁接觸時(shí)，三通閥處于吸液狀態(tài)；
[0017]當(dāng)?shù)谝煌ǖ琅c排氣孔連通、第二通道與吸液管上沒(méi)有加工有排氣孔一側(cè)的內(nèi)壁接觸以及第三通道與吸液件連通時(shí)，三通閥處于排氣狀態(tài)。
[0018]所述的吸液管上三通閥下方的位置處設(shè)置有緩沖球。
[0019]本實(shí)用新型與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下技術(shù)效果:
[0020]本實(shí)用新型的染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置能夠?qū)崿F(xiàn)染色吸管染色，操作簡(jiǎn)單，也減少了污染。本實(shí)用新型的的超薄切片染色吸管染色法基本上可以避免污染，且操作程序簡(jiǎn)單方便，染色效果也有了很大提高。
[0021]本實(shí)用新型的裝置在染色過(guò)程中，操作人員的手始終不與染色吸管接觸，避免污染，也避免殘留的染色液沾到操作者所戴的實(shí)驗(yàn)手套上。
[0022]本實(shí)用新型的裝置在染色過(guò)程中可以反復(fù)吸取染色液，直到染色液滿足實(shí)驗(yàn)所需的量。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0023]圖1是本實(shí)用新型的一個(gè)方案的整體結(jié)構(gòu)示意圖，圖中有一個(gè)超薄切片為了表示清楚超薄切片的結(jié)構(gòu)，便于標(biāo)號(hào)，去掉了銅網(wǎng)片，實(shí)際使用過(guò)程中超薄切片一般是肉眼不能夠辨別的，吸附在銅網(wǎng)片上。
[0024]圖2是本實(shí)用新型的另一個(gè)方案的整體結(jié)構(gòu)示意圖，圖中有一個(gè)超薄切片為了表示清楚超薄切片的結(jié)構(gòu)，便于標(biāo)號(hào)，去掉了銅網(wǎng)片，實(shí)際使用過(guò)程中超薄切片一般是肉眼不能夠辨別的，吸附在銅網(wǎng)片上。
[0025]圖3是三通閥的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0026]圖4是二通閥處于吸液狀態(tài)的不意圖。
[0027]圖5是三通閥處于排氣狀態(tài)的示意圖。
[0028]圖6是用本實(shí)用新型的裝置染色后的魚(yú)肝臟超薄切片在透射電鏡下放大時(shí)的細(xì)胞圖片。
[0029]圖7是用本實(shí)用新型的裝置染色后的小麥葉片超薄切片在透射電鏡下放大時(shí)的細(xì)胞圖片。
[0030]圖中各個(gè)標(biāo)號(hào)的含義為:1_彈性條，2-卡槽，3-銅網(wǎng)片，4-超薄切片，5-端蓋，6-通管，7-吸液件，8-染色吸管，9-支架瓶，10-吸液管，11-三通閥，12-排氣孔，13-緩沖球，(11-1)-第一通道，(11-2)-第二通道，(11-3)-第三通道。
[0031]以下結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型的具體內(nèi)容作進(jìn)一步詳細(xì)解釋說(shuō)明。

【具體實(shí)施方式】
[0032]以下給出本實(shí)用新型的具體實(shí)施例，需要說(shuō)明的是本實(shí)用新型并不局限于以下具體實(shí)施例，凡在本申請(qǐng)技術(shù)方案基礎(chǔ)上做的等同變換均落入本實(shí)用新型的保護(hù)范圍。
[0033]實(shí)施例:
[0034]遵從上述技術(shù)方案，如圖1和圖2所示，本實(shí)施例給出一種染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置，包括由硅橡膠材料制成的彈性條1，彈性條I上加工有均勻分布的卡槽2，卡槽2用于嵌入卡住銅網(wǎng)片3，銅網(wǎng)片3上吸附有超薄切片4 ;
[0035]所述的染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置還包括端蓋5，端蓋5上設(shè)置有一個(gè)貫通端蓋5兩側(cè)的通管6，通管6伸出端蓋5外側(cè)的一端上通過(guò)可拆卸的安裝的吸液管10連通有吸液件7，通管6伸入端蓋5內(nèi)側(cè)的一端上安裝有染色吸管8 ；
[0036]所述的吸液管10上安裝有三通閥11，吸液管10上還加工有與三通閥配合的排氣孔12 ;轉(zhuǎn)動(dòng)三通閥11可使得吸液件7只與染色吸管8連通吸取染色液，再轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)動(dòng)三通閥11可使得吸液件7只與排氣孔12連通排氣，反復(fù)吸取染色液，直至足量；
[0037]所述的彈性條I放置在染色吸管8內(nèi)，染色吸管8吸入染色液用于為超薄切片4染色；
[0038]所述的端蓋5設(shè)置在不透光的支架瓶9上，將染色吸管8放置在不透光的支架瓶9內(nèi)，防止染色液見(jiàn)光。
[0039]端蓋5與支架瓶9之間通過(guò)螺紋副連接，使得支架瓶9內(nèi)的空氣與外界不流通，減少染色液的污染。
[0040]優(yōu)選的吸液件7為乳膠吸管或注射器，在三通閥11的配合下均能夠?qū)崿F(xiàn)反復(fù)吸取染色液，直到所需要的量。
[0041]如圖3至圖5所示，三通閥11上加工有三個(gè)連通的通道，第一通道11-1和第二通道11-2同軸線設(shè)置連通，第三通道12-3和第一通道11-1垂直設(shè)置；
[0042]當(dāng)?shù)谝煌ǖ?1-1與吸液件7連通、第二通道11-2與染色吸管8連通以及第三通道11-3與吸液管10上沒(méi)有加工有排氣孔12 —側(cè)的內(nèi)壁接觸時(shí)，三通閥11處于吸液狀態(tài)；
[0043]當(dāng)?shù)谝煌ǖ?1-1與排氣孔12連通、第二通道11-2與吸液管10上沒(méi)有加工有排氣孔12 —側(cè)的內(nèi)壁接觸以及第三通道11-3與吸液件7連通時(shí)，三通閥11處于排氣狀態(tài)。
[0044]吸液管10上三通閥11下方的位置處設(shè)置有緩沖球13，用于緩沖存儲(chǔ)一部分染色液，或者防止染色液直接進(jìn)入吸液件7中。
[0045]以下以具體的例子來(lái)說(shuō)明本實(shí)用新型的裝置的工作過(guò)程:
[0046]材料:檸檬酸鉛染色液、醋酸雙氧鈾染色液；超純水；長(zhǎng)度9c m?10cm，外直徑7cm左右的棕色染色吸管8 ;支架瓶9為帶蓋棕色玻璃小瓶(高度略超染色吸管8的長(zhǎng)度)；吸液件7，即乳膠吸頭或注射器；長(zhǎng)度7cm?8cm、寬5cm的硅膠制成的彈性條I ;魚(yú)肝臟超薄切片，小麥葉片超薄切片。
[0047]方法:用鋒利的刀片在彈性條I的一面沿縱軸方向間斷切兩排約16個(gè)切口，即卡槽2，兩排切口間距離2mm?3mm，并在彈性條I的一端做成橢圓狀作頭端標(biāo)記，這樣彈性條I (或稱作銅網(wǎng)夾持硅膠片)就做好了。
[0048]將彈性條I平置于干凈的濾紙上或玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)，有卡槽2的一面向上，用鑷子輕壓彈性條I上卡槽2兩邊使卡槽2張開(kāi)，將吸附有超薄切片4的銅網(wǎng)片3嵌入卡槽2內(nèi)Imm?2mm，松開(kāi)鑷子，卡槽2自然閉合并夾住銅網(wǎng)片3。按順序依次同樣放入其他需染色的超薄切片4后，打開(kāi)吸液管10與通管6之間的連接，將嵌有超薄切片4的彈性條I放入染色吸管8內(nèi)。
[0049]將染色吸管8插入通管6內(nèi)和端蓋5、吸液件7 —起形成一個(gè)整體，通過(guò)吸液件7和三通閥11以及排氣孔12的配合下可以實(shí)現(xiàn)多次吸液和排氣，使得染色吸管8中的染色液的量達(dá)到所需要的量。染色前先吸入超純水清洗數(shù)次，再用染色吸管8吸取足量檸檬酸鉛染色液并放進(jìn)棕色的支架瓶9中，旋緊端蓋5和支架瓶9，使得染色過(guò)程中與外界空氣不流通，減少污染，染色完成后回收檸檬酸鉛染色液，然后用超純水清洗外表的殘余檸檬酸鉛染色液。清洗完成后再用醋酸雙氧鈾染色液染色。
[0050]染色結(jié)束后充分清洗，然后將染色吸管8取出平置于干凈的濾紙上或玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)，依次逐個(gè)取出吸附有超薄切片4的銅網(wǎng)片3，取出方法與前述放置方法相同，按順序用鑷子依次輕壓彈性條I上的卡槽2兩邊使卡槽2張開(kāi)，取出吸附有超薄切片4的銅網(wǎng)片3，晾干后上透射電鏡觀察。
[0051]觀察結(jié)果:采用上述滴管染色法分別染色了動(dòng)物組織細(xì)胞、植物組織細(xì)胞兩種組織切片，電鏡觀察照片如圖6和圖7所示。
[0052]結(jié)果分析:通過(guò)對(duì)上述幾種材料的染色效果分析，結(jié)合在其他材料的實(shí)際應(yīng)用效果，我們認(rèn)為采用本實(shí)用新型的裝置染色，基本上避免了超薄切片的污染。首先，在鉛、鈾染色前采用超純水清洗銅網(wǎng)片3，可以避免污染物附著于銅網(wǎng)片3上，也可使超薄切片4濕潤(rùn)后染色均勻；其次，整個(gè)染色操作是在半密閉、避光的條件下進(jìn)行，減少了超薄切片4與空氣中C02及塵埃的接觸，同時(shí)也減少了鈾染液的見(jiàn)光分解，降低了超薄切片4鉛、鈾污染的機(jī)率；再次，因其一次可以染色15張?20張超薄切片，使工作效率大大提高，此法特別簡(jiǎn)單方便，容易實(shí)現(xiàn)。
【權(quán)利要求】
1.一種染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置，包括由硅橡膠材料制成的彈性條(1)，彈性條(I)上加工有均勻分布的卡槽(2)，卡槽(2)用于嵌入卡住銅網(wǎng)片(3)，銅網(wǎng)片(3)上吸附有超薄切片(4)，其特征在于: 所述的染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置還包括端蓋(5)，端蓋(5)上設(shè)置有一個(gè)貫通端蓋(5)兩側(cè)的通管(6)，通管(6)伸出端蓋(5)外側(cè)的一端上通過(guò)可拆卸的安裝的吸液管(10)連通有吸液件(7)，通管(6)伸入端蓋(5)內(nèi)側(cè)的一端上安裝有染色吸管(8)； 所述的吸液管(10)上安裝有三通閥(11)，吸液管(10)上還加工有與三通閥配合的排氣孔(12);轉(zhuǎn)動(dòng)三通閥(11)可使得吸液件(7)只與染色吸管(8)連通吸取染色液，再轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)動(dòng)三通閥(11)可使得吸液件(7)只與排氣孔(12)連通排氣，反復(fù)吸取染色液，直至足量; 所述的彈性條(I)放置在染色吸管(8)內(nèi)，染色吸管(8)吸入染色液用于為超薄切片(4)染色； 所述的端蓋(5)設(shè)置在不透光的支架瓶(9)上，將染色吸管(8)放置在不透光的支架瓶(9)內(nèi)，防止染色液見(jiàn)光。
2.如權(quán)利要求1所述的染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置，其特征在于:所述的端蓋(5)與支架瓶(9)之間通過(guò)螺紋副連接，使得支架瓶(9)內(nèi)的空氣與外界不流通，減少染色液的污染。
3.如權(quán)利要求1所述的染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置，其特征在于:所述的吸液件(7)為乳膠吸管。
4.如權(quán)利要求1所述的染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置，其特征在于:所述的吸液件(7)為注射器。
5.如權(quán)利要求1所述的染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置，其特征在于:所述的三通閥(11)上加工有三個(gè)連通的通道，第一通道(11-1)和第二通道(11-2)同軸線設(shè)置連通，第三通道(12-3)和第一通道(11-1)垂直設(shè)置； 當(dāng)?shù)谝煌ǖ?11-1)與吸液件(7)連通、第二通道(11-2)與染色吸管⑶連通以及第三通道(11-3)與吸液管(10)上沒(méi)有加工有排氣孔(12) —側(cè)的內(nèi)壁接觸時(shí)，三通閥(11)處于吸液狀態(tài)； 當(dāng)?shù)谝煌ǖ?11-1)與排氣孔(12)連通、第二通道(11-2)與吸液管(10)上沒(méi)有加工有排氣孔(12) —側(cè)的內(nèi)壁接觸以及第三通道(11-3)與吸液件(7)連通時(shí)，三通閥(11)處于排氣狀態(tài)。
6.如權(quán)利要求1所述的染色液量可調(diào)節(jié)的超薄切片的染色輔助裝置，其特征在于:所述的吸液管(10)上三通閥(11)下方的位置處設(shè)置有緩沖球(13)。
【文檔編號(hào)】G01N1/30GK204255727SQ201420754530
【公開(kāi)日】2015年4月8日 申請(qǐng)日期:2014年12月1日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月1日
【發(fā)明者】張國(guó)云, 高鵬程, 裴國(guó)亮, 姚娟妮, 張文婷, 郭付振, 何曉華 申請(qǐng)人:西北農(nóng)林科技大學(xué)