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專利名稱：α－巖藻糖苷酶單一穩(wěn)定液體檢測試劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種主要用于原發(fā)性肝癌的早期診斷和療效觀察的試劑，具體為α-巖藻糖苷酶單一穩(wěn)定液體檢測試劑。
隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，國內(nèi)大量自動化的生化分析儀的普及，對疾病的早期診斷、預(yù)防和治療提供了依據(jù)，作為分析儀的試劑，其質(zhì)量和穩(wěn)定性越來越重要。但目前所用的試劑都存在一些缺點(diǎn)及不足之處，如多為終點(diǎn)比色法試劑，對樣品抗干擾能力差、費(fèi)時(shí)；多為干粉固體試劑，使用不方便，穩(wěn)定性不佳；對溶血樣品和脂血樣品耐受性差，容易受到干擾等。
鑒于此，本發(fā)明的目的是提供一種α-巖藻糖苷酶單一穩(wěn)定液體檢測試劑，來解決上述不足之處。
本發(fā)明的目的是通過這樣的技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的采用新型底物(CPNPF)提高了反應(yīng)的靈敏度；采用液體穩(wěn)定技術(shù)，使試劑單一并具有良好的穩(wěn)定性，使用極方便；采用速率比色法，克服了原終點(diǎn)法的不足；加入了溶血(獨(dú)有)抗干擾劑和新型消脂劑，克服了樣品中血紅蛋白和脂質(zhì)干擾。
本發(fā)明產(chǎn)生的有益效果是本試劑主要用于原發(fā)性肝癌的早期診斷和療效觀察。由于可以方便的定量，該試劑具有極廣泛的適用范圍，不僅可以在大中型醫(yī)院廣泛使用，而且在具有半自動化分析儀的單位也可以使用。可用于健康體檢、肝癌病人的過篩及療效觀察。
下面結(jié)合實(shí)施例詳述本發(fā)明。
用途本試劑用于測定血清、血漿、尿液、唾液、淚液等中α-L-巖藻糖苷酶(AFU)的含量。適用于半/全自動生化分析儀。
原理AFU催化M+G+CPNP-α-L-Fucoside+H2O——→M+G+CPNP+α-L-巖藻糖測定405nm波長下每分鐘CPNP的吸光度變化值(ΔA)，其ΔA/min與樣品中所含AFU的含量成正比。試劑組成(R測定應(yīng)用試劑)Good′s緩沖液(pH5.00)新型成色底物CPNP-α-L-FucosideM(脂血或脂質(zhì)樣品抗干擾劑消脂劑)TST-109G(溶血樣品抗干擾劑溶血清除劑)ER-76高效穩(wěn)定劑SF-3；J-2樣品要求樣品為空腹血清、血漿(EDTA抗凝，1.8mgEDTA可抗凝1.0ml血)。樣品中AFU在2～8℃可穩(wěn)定3天，冰凍保存可穩(wěn)定1個(gè)月。樣品應(yīng)在低溫條件下運(yùn)送。測定步驟1、基本儀器操作參數(shù)方法速率法 反應(yīng)溫度37℃主波長405nm反應(yīng)時(shí)間10分鐘副波長505nm樣品/試劑1/9儀器日立7060全自動分析儀或其它自動/半自動生化分析儀2、操作2.1一步法試劑開瓶即可使用，使用中應(yīng)注意避光。使用后盡快放2～8℃貯存。平均吸光度變化值ΔA/min。R225μl樣品25μl計(jì)算樣品AFU活力(U/L)＝ΔA/min×F一步法計(jì)算因素(F)＝2012性能指標(biāo)1、線性范圍0-300 U/L(37℃)，r≥0.99。2、精密度批內(nèi)、批間平均CV分別為5.3％；6.8％。3、準(zhǔn)確度不準(zhǔn)確度≤15％。4、試劑空白吸光度試劑空白在405nm處，10mm光徑下，吸光度應(yīng)小于0.500。注意事項(xiàng)1、如果樣品中AFU活力超過300U/L，則用生理鹽水稀釋后測定或減量操作，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。2、試劑與樣品量可根據(jù)需要按比例改變。3、工作液在405nm波長，以蒸餾水調(diào)零，測定吸光度大于0.500，試劑將不能使用，應(yīng)棄去。4、本法禁止使用肝素和枸櫞酸鹽抗凝血漿。貯存本試劑2～8℃密閉避光貯存穩(wěn)定12個(gè)月。參考值范圍[血清]5～40U/L(37℃)[血清]83～667nKat/L(37℃)
權(quán)利要求
1.一種α-巖藻糖苷酶單一穩(wěn)定液體檢測試劑，其特征在于試劑為單一穩(wěn)定液體試劑，可在半/全自動生化分析儀上使用、采用新型的底物(CPNPF)，配方中同時(shí)加入溶血抗干擾劑和消脂劑、采用速率法(單一液體試劑)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種α－巖藻糖苷酶單一穩(wěn)定液體檢測試劑，本試劑為單一穩(wěn)定液體試劑，試劑具有良好的穩(wěn)定性和抗干擾性。采用速率比色法，可在半/全自動生化分析儀上使用，由于采用了新型的底物，配方中同時(shí)加入了獨(dú)有的溶血抗干擾劑和消脂劑，使試劑具有靈敏度高、抗干擾性強(qiáng)的特點(diǎn)；同時(shí)采用液體穩(wěn)定技術(shù)，加入特有的穩(wěn)定劑和防腐劑，使試劑具有優(yōu)良的穩(wěn)定性，溫度在2－8度貯存(避光密閉)12個(gè)月仍不影響其性能，可廣泛用于原發(fā)性肝癌的早期診斷、健康體檢、肝癌普查和療效觀察等。
文檔編號G01N33/574GK1464066SQ0211534
公開日2003年12月31日 申請日期2002年6月10日 優(yōu)先權(quán)日2002年6月10日
發(fā)明者趙瑜 申請人:趙瑜