專利名稱：一種玫瑰紅b的檢測方法
技術領域：
本發明涉及色素檢測技術領域，具體地講是一種玫瑰紅B的檢測方法，主要用于調味品及肉制品中玫瑰紅B的檢測。
背景技術：
玫瑰紅B又稱羅丹明B (Rhodamine B)，或堿性玫瑰精，俗稱花粉紅，是一種具有鮮桃紅色的人工合成染料。主要用作實驗室中細胞熒光染色劑、有色玻璃、特色煙花爆竹等行業， 但因為它對調味品及肉制品等有提亮、增鮮等作用，大大改善感官色澤，因此有人將其作為添加劑使用。實驗證明羅丹明B易誘導皮下組織產生肉瘤、有明確的致癌作用，對人體有極大的危害，因此不能作食品染色之用。目前，玫瑰紅B的檢測方法多為定性方法，無法定量及確證。
發明內容
本發明的目的是克服上述已有技術的不足，而提供一種食品中玫瑰紅 B的檢測方法，主要解決現有的玫瑰紅B檢測方法無法精確定量及定性確證的問題。為了達到上述目的，本發明是這樣實現的一種玫瑰紅B的檢測方法，其特殊之處在于它包括如下工藝步驟
a取樣品于容器中，加入正己烷和無水硫酸鈉，渦旋混勻，超聲提取，并離心分離，得上清液備用；再次加入正己烷，重復該步驟。b離心分離的提取液合并、定容，然后經氧化鋁固相萃取柱凈化，正己烷淋洗，然后甲醇洗脫，旋蒸至干；
c用高效液相色譜串聯二級質譜(四極桿)檢測，流動相為水(含0. 1%甲酸)和乙腈，夕卜標法定量；
d玫瑰紅B含量計算。本發明的玫瑰紅B的檢測方法，c步驟所述的高效液相色譜串聯二級質譜(三重四極桿)檢測條件為
色譜柱SB-C18柱，2. 1 X 50mm 1. 8 μ m ；流動相A水(含0. 1%甲酸);B乙腈；梯度洗脫50%B，Imin — 95%B，2. 5min —50 %B，6. 5min;流速 0. 2mL/min ；進樣量10yL;柱溫40 °C ；
采用ESI離子源，正離子模式，MRM掃描，碎裂能(160V，160V)，碰撞能(52V，82V)干燥氣溫度300°C。本發明的一種玫瑰紅B的檢測方法，該方法的原理是首先采用正己烷提取，然后經氧化鋁柱萃取，最后經高效液相色譜串聯二級質譜(三重四極桿)定性定量檢測，得到待測液的濃度，然后根據稱量及定容參數，換算為樣品中的玫瑰紅B含量。本發明的一種玫瑰紅B的檢測方法與已有技術相比具有突出的實質性特點和顯著進步采用高效液相色譜串聯二級質譜(三重四極桿)檢測，能夠對食品中玫瑰紅B進行準確定性與定量，該方法前處理簡單，結果準確，選擇性高，檢測限低，對食品中測試玫瑰紅 B含量及定性確證比較適用。
具體實施例方式為了更好地理解與實施，下面結合實施詳細說明本發明。
實施例1，稱取2.5g (m)試樣，于50mL具塞離心管內，加無水硫酸鈉(與樣品中含水量的重量比值約1:1)，再加約10 mL正己烷，渦旋0. 5min，超聲20min，4500r/min離心， 取上清液于25mL具塞比色管中，再加10 mL正己烷，重復上述操作，合并上清液，并用正己烷定容至25mL (V1),取5mL (V2)過已活化的氧化鋁固相萃取柱，8mL正己烷淋洗，最后用 7mL甲醇洗脫，旋蒸至干；用高效液相色譜串聯二級質譜(三重四極桿)檢測，流動相為水(含 0. 1%甲酸)和乙腈，用ImL初始流動相定容，過濾，上機檢測，檢測條件為色譜柱SB-C18 柱，2. 1Χ50_ 1.8μπι;流動相Α水(含0. 1%甲酸)；Β乙腈；梯度洗脫50%B，Imin — 95%B, 2. 5min — 50 %B, 6. 5min ；流速 0. 2mL/min ；進樣量10 μ L ；柱溫:40°C ；采用 ESI 離子源，正離子模式，MRM掃描，碎裂能(160V, 160V)，碰撞能(52V，82V)干燥氣溫度300°C ； 得待測液濃度C ；并計算得到樣品中玫瑰紅B的含量為
權利要求
1.一種玫瑰紅B的檢測方法，其特征在于它包括如下步驟a取樣品于容器中，加入正己烷和無水硫酸鈉，渦旋混勻，超聲提取，并離心分離，得上清液備用；再次加入正己烷，重復該步驟；b離心分離的提取液合并、定容，然后經氧化鋁固相萃取柱凈化，正己烷淋洗，然后甲醇洗脫，旋蒸至干；c用高效液相色譜串聯二級質譜(三重四極桿)檢測，流動相為水(含0. 1%甲酸)和乙腈，外標法定量；d玫瑰紅B含量計算。
2.根據權利要求1所述的一種玫瑰紅B的檢測方法，其特征在于c步驟所述的高效液相色譜串聯二級質譜(三重四極桿)檢測條件為色譜柱SB-C18柱，2. 1X50_ 1.8ym；流動相A水(含0. 1%甲酸);B乙腈；梯度洗脫50%B，lmin — 95%B，2. 5min — 50 %B，6. 5min;流速 0. 2mL/min ；進樣量IOyL ；柱溫40 °C ；采用ESI離子源，正離子模式，MRM掃描，碎裂能(160V, 160V),碰撞能(52V，82V)干燥氣溫度300°C。
全文摘要
本發明公開了一種玫瑰紅B的檢測方法，其特點包括如下處理步驟取樣品于容器中，經正己烷提取、無水硫酸鈉除水后，渦旋并超聲提取，離心分離，然后提取液經固相萃取柱凈化，最后經高效液相色譜串聯質譜檢測；該方法前處理簡單，選擇性高，結果準確，檢測限低，相對標準偏差(RSD)小于2%，加標回收率在90-102%，適用于調味品及肉制品中玫瑰紅B的檢測。
文檔編號G01N30/02GK102507782SQ20111035247
公開日2012年6月20日 申請日期2011年11月10日 優先權日2011年11月10日
發明者宋維娟, 徐世明, 徐冬雪, 王光杰, 趙瑞連, 郭光平 申請人:煙臺市喜旺食品有限公司
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