專利名稱：一種生物芯片裝置的制作方法
技術領域：
本實用新型屬于生命科學檢測領域，特別涉及一種對基因、蛋白質(抗原或抗體)、藥物或受體、組織或細胞、凝集素或復合糖進行并行檢測、識別、鑒定的芯片裝置。
背景技術：
現有的生物芯片是指包被在固相載體上的高、中、低密度核酸探針、蛋白質(多肽、酶分子、抗原、抗體)、藥物或受體、細胞或組織的微點陣(Microarray)。是利用生物大分子間具有特異相互識別的能力而將他們有序的排列在固相載體基片(膜、玻璃片、硅片、瓷片等)上，與待檢樣品和相應的標記生物分子同時進行特異性反應或雜交，通過自動閱讀設備可獲得大量有用的生命科學信息。
生物芯片常用的固相載體基片有有機和無機聚合物薄膜、玻璃片、硅片、瓷片等，該類載體基片通常經過修飾處理，即用各種不同的活化試劑通過化學反應在載體基片表面鍵合上各種各樣的活性基團，以便與點樣物共價結合，形成具有不同生物特異性的親和型載體基片，即生物芯片，用來固定和檢測各種不同的活性生物分子，如蛋白質、多肽、酶、核酸、抗原、抗體等，甚至在載體基片上構建各種各樣的微結構(微坑、微溝、微槽、微管、微泵等微型結構或裝置)，以利于樣品的處理和試劑的分配。
上述生物芯片制作工藝復雜，通常需要特殊昂貴設備，相應檢測手段要求條件很高，不利于常規應用。
現有膠體金免疫滲濾裝置，通常采用將抗原或抗體直接點樣于硝酸纖維素膜上，呈點狀或線狀，待干燥后作為滲濾膜備用。該種滲濾裝置的滲濾膜上僅包被一種抗原或抗體，僅能檢測一種相應的抗體或抗原，而不能同時檢測兩種以上相應的抗體或抗原，更不能同時檢測抗原(或抗體)和核酸(DNA或RNA)，這樣不僅使測定項目單一、操作步驟增加，常造成患者費用和標本以及實驗室人力和物力的浪費，而且影響了該方法和裝置對臨床疾病的診斷效率，易導致相同或不同疾病的待測標記物不能同時檢出而缺診或漏診，不能很好的滿足臨床需求，以體現當今免疫學測定敏、準、快、簡的特點。
發明目的本實用新型的任務就是提供能夠對待檢測樣品中的多種待測物實現多項目平行測定的一種生物芯片裝置。
發明內容
本實用新型的任務是這樣完成的一種生物芯片裝置，為由卡蓋、卡座組成的卡盒式裝置，其特征在于；上述卡蓋上設有觀測孔，卡座內設有滲濾膜，該滲濾膜位于觀察孔的下方；滲濾膜下還設有至少一層吸水材料，滲濾膜上以物理吸附或共價結合的方式固化結合有兩種或兩種以上生物點陣。
本實用新型采用以上結構后，由于設置了固化結合有兩種或兩種以上生物點陣點樣線(點)、陽性對照線(點)和陰性對照線(點)的滲濾膜，再配合其他相關試劑，只需1-2步操作，即可達到對基因、抗原或抗體、藥物或受體、組織或細胞、凝集素或復合糖的多項目并行檢測、識別和鑒定的目的，尤其適合核酸和蛋白質的并行檢測和鑒定。本實用新型操作簡便快速，結果準確可靠，易于觀察。適用于疾病相關基因、抗原或抗體、病原體、藥物或受體、組織或細胞、凝集素或復合糖等生命科學領域中的多項目并行檢測、識別和鑒定，一次加入待測樣品即可并行處理，從而同時得到大量的生命信息。
附圖1是本實用新型的俯視圖。附圖2是本實用新型的主視圖。附圖3是本實用新型的剖視圖。
附圖中，1為卡蓋、2為觀測孔、3為生物點陣、4為滲濾膜、5為吸水材料、6為卡座、7為檢測項目標示、8為陽性對照線(點)、9為陰性對照線(點)、10為檢測區域、11為卡門、12為卡窗、13為過濾膜、14為加樣區域、15為標記物、16為抗凝劑。
具體實施方式
以下結合附圖對本實用新型作進一步的詳細描述。
如附圖1、圖2、圖3所示，本實用新型生物芯片裝置，主要為由卡蓋、卡座組成的卡盒式裝置，在卡蓋1和卡座6的結合部設有至少一個嵌合裝置，使二者緊密結合，其內形成空腔。所述卡蓋1上設有至少一個觀測孔2；在卡蓋1外表面上同時設有兩種或兩種以上檢測項目標示7；在卡座內觀測孔2的內表面上設有至少一層滲濾膜4，滲濾膜4與觀測孔2密封粘合；在滲濾膜4的下方還設有至少一層吸水材料5。滲濾膜4上以物理吸附或共價結合的方式固化結合有兩種或兩種以上生物點陣。
所述兩種或兩種以上生物點陣3呈點狀或線狀，兩種或兩種以上生物點陣3點樣線(點)、陽性對照線(點)8和陰性對照線(點)9共同構成至少兩種檢驗項目的檢測指標；所述觀測孔2呈圓形、方形和多邊形中的任一種，該觀測孔2兼作加樣孔；所述滲濾膜4的形狀與觀測孔2的形狀相同，其大小大于觀測孔2；所述觀測孔2、滲濾膜4上的兩種或兩種以上生物點陣3和滲濾膜4共同構成兩種或兩種以上檢測項目的檢測區域(觀測區域)10；所述吸水材料5呈圓形或方形，其大小大于滲濾膜4。
所述滲濾膜4是硝酸纖維素膜、偏聚二氟乙烯膜、尼龍膜中的任一種。
在滲濾膜4上固化結合的兩種或兩種以上生物點陣3是以陽性對照線(點)8或陰性對照線(點)9為中心依次呈放射狀或行列均勻排布；所述生物點陣3是由DNA探針、cDNA探針、PNA探針、mRNA、抗原、抗體、藥物或受體、組織或細胞、凝集素或復合糖中的任意兩種或兩種以上組合構成。
根據不同的實驗要求，本實用新型還配備有附件，所述附件包括卡門11、卡窗12和過濾膜13。
所述卡門11置于卡盒內，位于滲濾膜4和吸水材料5之間，其形狀與滲濾膜4相同，其大小大于滲濾膜4；該卡門11可開啟和關閉。
所述卡窗12置于卡盒外，位于觀測孔2的上方，其形狀與觀測孔2相同，其大小小于觀測孔2。
所述過濾膜13置于卡窗12的內表面上，位于卡窗12和觀測孔2之間，其形狀與卡窗12相同，其大小大于卡窗12；所述過濾膜13上物理吸附有一層抗凝劑或標記物15和抗凝劑的結合。上述卡窗12和過濾膜13共同構成待檢樣品的加樣區域14。
實施例1本方法適用于待測物含量多或雜交速度快的檢測項目，其操作步驟如下操作時，將本實用新型(不用附件)放于水平桌面上，取待檢血清100-200微升直接加入觀測孔2中，待滲濾，此時待檢樣品中的兩種或兩種以上待檢物同時與滲濾膜4上固化的兩種或兩種以上生物點陣3發生特異性反應或雜交而被捕獲在滲濾膜4上，然后再加入相應標記物試劑，待滲濾，此時被捕獲的兩種或兩種以上待檢物在與相應標記物發生特異性反應或雜交，室溫2-30分鐘后觀察結果或洗滌后或再加入相應顯色(發光)試劑后再洗滌，最后通過目測或在判讀設備上判讀結果，以顯色(發光)條帶(點)的有無多少，判斷兩種或兩種以上待測物的檢測、識別和鑒定結果；如在其中一項待測物的檢測區域無顯色(發光)條帶(點)，則該檢測物為陰性，否則為陽性，對于陽性的待測物亦可與其陽性對照線(點)相比較，根據顯色(發光)條帶(點)的顏色深淺而對該待測物進行定量或半定量檢測；另外，如果各檢測區陽性對照線(點)顯色(發光)，示本實用新型有效，否則，示該本實用新型失效。
實施例2本方法適用于待測物含量微或雜交速度慢的檢測項目，其操作步驟如下操作時，將本實用新型(用附件)放于水平桌面上，關閉附件卡門(閥)11，取待檢血清100-200微升直接加到卡窗12的加樣區域14中，待滲入，此時待檢樣品中的兩種或兩種以上待檢物同時與過濾膜13上的相應標記物15和滲濾膜4上固化的兩種或兩種以上生物點陣3發生特異性反應或雜交而被捕獲在滲濾膜4上，然后再加入相應標記物試劑，待滲濾，此時被捕獲的兩種或兩種以上待檢物在與相應標記物發生特異性反應或雜交，室溫2-60鐘后開啟附件卡門(閥)11，待滲濾，然后觀察結果，或洗滌后目測或在判讀設備上判讀結果，以顯色(發光)條帶(點)的有無及多少，判斷兩種以上待測物的檢測、識別和鑒定結果；如在其中一項待檢物的檢測區域無顯色(發光)條帶(點)，則該檢測物為陰性，否則為陽性，對于陽性的待測物亦可與其陽性對照線(點)相比較，根據顯色(發光)條帶(點)的顏色深淺而對該待測物進行定量或半定量檢測；另外，如果各檢測區陽性對照線(點)顯色(發光)，示本實用新型有效，否則，示該本實用新型失效。
實施例3取免疫不孕檢測芯片，在該芯片的滲濾膜4上固化有精子抗原AsAg、子宮內膜抗原EmAg、卵巢抗原O Ag和人絨毛膜促性腺激素抗原HCG Ag四種抗原，用于檢測與免疫不孕相關的抗精子抗體AsAb、抗子宮內膜抗體EmAb、抗卵巢抗體O Ab和抗人絨毛膜促性腺激素抗體HCG Ab四種免疫抗體，其操作步驟如下操作時，將免疫不孕檢測芯片(不用附件)放于水平桌面上，取待檢血清100-200微升直接加入觀測孔2中，待滲濾，此時待檢樣品中的四種待檢抗體同時與滲濾膜4上固化的四種抗原生物點陣3發生特異性免疫結合反應而被捕獲在滲濾膜4上，然后再加入金標記抗人免疫球蛋白試劑，待滲濾，此時被捕獲的四種待檢抗體(如存在時)與金標記抗人免疫球蛋白試劑發生特異性反應，室溫2分鐘后，洗滌后觀察結果，最后通過目測或在判讀設備上判讀結果，以顯紅斑點的有無及多少，來判斷四種待測抗體的檢測結果；如在其中一項待測抗體的標示檢測區域內無紅斑點，則該待測抗體為陰性，否則為陽性，對于陽性的待測抗體亦可與其陽性對照線(點)相比較，根據紅色斑點的顏色深淺而對該待測抗體進行定量或半定量檢測。
使用本免疫不孕檢測芯片，僅需1-2步操作，即可同時得到與免疫不孕相關的四種免疫抗體包括抗精子抗體AsAb、抗子宮內膜抗體EmAb、抗卵巢抗體O Ab和抗人絨毛膜促性腺激素抗體HCG Ab的檢測結果，本方法簡便快速、準確可靠，非常適合臨床應用。
實施例4取雞傳染病檢測芯片，在該芯片的滲濾膜4上固化有雞新城疫病毒NDV、傳染性法氏囊病毒IBDV、傳染性支氣管炎病毒IBV和雞產蛋下降綜合征病毒EDSV四種抗體，在該芯片的過濾膜13上固化有與雞傳染病相關的抗NDV、抗IBDV、抗IBV和抗EDSV四種抗體的金標記物，用于檢測由上述四種病毒引起的雞傳染病，其操作步驟如下操作時，將雞傳染病檢測芯片(用附件)放于水平桌面上，關閉附件卡門(閥)11，取待檢血清100-200微升直接加到卡窗12的加樣區域14中，待滲入，此時待檢樣品中的四種待檢病毒抗原(如存在時)同時與過濾膜13上的四種金標記抗體15和滲濾膜4上固化的四種包被抗體即生物點陣3發生特異性反應而被捕獲在滲濾膜4上，待滲濾，室溫10鐘后開啟附件卡門(閥)11，待滲濾，然后洗滌并觀察結果，或洗滌后目測或在判讀設備上判讀結果，以紅色斑點的有無及多少，判斷四種待測病毒抗原的檢測結果；如在其中一項待檢病毒的標示檢測區域無紅色斑點，則該待測病毒抗原為陰性，否則為陽性，對于陽性的待測物亦可與其陽性對照線(點)相比較，根據紅色斑點的顏色深淺而對該待測病毒抗原進行定量或半定量檢測。
使用本雞傳染病檢測芯片，僅需1-2步操作，即可同時得到與雞傳染病相關的四種病毒抗原包括NDV、IBDV、IBV和EDSV抗原的檢測結果，用以快速診斷四種雞傳染病包括雞新城疫、傳染性法氏囊、傳染性支氣管炎和雞產蛋下降綜合征，本方法簡便快速、準確可靠，非常適合批量檢測使用。
權利要求1.一種生物芯片裝置，為由卡蓋、卡座組成的卡盒式裝置，其特征在于上述卡蓋[1]上設有觀測孔[2]，卡座內設有滲濾膜[4]，該滲濾膜[4]位于觀察孔的下方；滲濾膜[4]下還設有至少一層吸水材料[5]，滲濾膜[4]上以物理吸附或共價結合的方式固化結合有兩種或兩種以上生物點陣[3]。
2.根據權利要求1所述的生物芯片裝置，其特征在于上述生物點陣[3]呈點狀或線狀。
3.根據權利要求1或2所述的生物芯片裝置，其特征在于上述滲濾膜[4]與觀測孔[2]密封粘合；
4.根據權利要求3所述的生物芯片裝置，其特征在于所述滲濾膜[4]是硝酸纖維素膜、偏聚二氟乙烯膜、尼龍膜中的任一種。
5.根據權利要求4所述的生物芯片裝置，其特征在于在滲濾膜[4]和吸水材料[5]之間還設有可開啟的卡門[11]。
6.根據權利要求5所述的生物芯片裝置，其特征在于觀測孔[2]上方的卡蓋[1]上還設有一個卡窗[12]，該卡窗[12]的內表面上設有一層過濾膜[13]。
7.根據權利要求6所述的生物芯片裝置，其特征在于所述過濾膜[13]上物理吸附有一層抗凝劑[14]或標記物[15]和抗凝劑[14]的結合。
專利摘要本實用新型涉及一種生物芯片裝置，是一種由卡蓋、卡座組成的卡盒式裝置，屬于生命科學檢測領域。特點是卡蓋1上設有觀測孔2，卡座內設有滲濾膜4，滲濾膜下還設有至少一層吸水材料5，滲濾膜4上以物理吸附或共價結合的方式固化結合有兩種或兩種以上生物點陣。只需1－2步操作，即可達到對基因、抗原或抗體、藥物或受體、組織或細胞、凝集素或復合糖的多項目并行檢測、識別和鑒定的目的，尤其適合核酸和蛋白質的并行檢測和鑒定。本實用新型操作簡便快速，結果準確可靠，易于觀察。
文檔編號G01N33/48GK2908518SQ20062000525
公開日2007年6月6日 申請日期2006年1月22日 優先權日2006年1月22日
發明者郭占軍, 龐保軍, 崔麗華, 孫冬蘭, 于震 申請人:郭占軍
專業數控銑床產品供應商
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