一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒及檢測方法
【專利摘要】本發明屬于食品檢測領域，具體涉及一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒及檢測方法。所述的檢測試劑盒包括以下含量的組分：有機溶劑50-100ml、酸溶液50-100ml、水20-50ml、氯化鈉水溶液20-50ml、蛋白質標準液20-30ml、顯色液0.2-0.5g。采用該檢測試劑盒對乳制品中蛋白質進行檢測的方法步驟為：分別將樣品溶液與蛋白質標準液加入兩支比色管中，再分別加氯化鈉水溶液，有機溶劑、酸溶液、水及顯色液濾液，在595nm波長下，測定吸光度，根據朗伯爾定律計算濃度。本發明操作簡單，檢測結果準確，檢測迅速，可滿足食品監管部門對市售乳制品中蛋白質含量的檢測。
【專利說明】一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒及檢測方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于食品檢測領域，具體涉及一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒及檢測方法。
【背景技術】
[0002]蛋白質具有多種生理功能，可充當人體所需維生素及微量元素等物質的載體、提高免疫能力、調節機體水電解質平衡及提供多種氨基酸等。現代科學證明，蛋白質與生命的產生、存在及消亡均密切相關。因此，蛋白質作為人類生命現象中最基本的物質基礎及人體六大營養物質之一，其攝入與人體健康息息相關。牛奶蛋白具有易消化，因此，嬰幼兒、青少年、老年人及慢性病患者可經常食用，以增加蛋白質攝入，提高機體抵抗力。
[0003]為了保證乳及乳制品的質量，我國有關標準中明確規定了乳及乳制品中的蛋白質含量，但許多不法廠商為了獲取經濟利益，在乳及乳制品中非法添加三聚氰胺、尿素及硝酸銨等含氮量高的化合物，嚴重影響了產品質量，同時，對食用者的身體健康也構成極大的危脅。因此，測定食品中蛋白質的含量不僅是檢驗食品質量的重要舉措，同時也是保證人們身體健康的重要手段。傳統的蛋白質測定方法多采用測定氮的含量間接測定蛋白質的含量，該方法也是我國測定蛋白質含量的標準方法，其適用性強，重復性好，但這種方法存在的最大的缺陷就是測得的結果不僅包含了蛋白質，而且還包含了尿素氮及無機胺鹽等含氮的化合物。此外，蛋白質的測定方法還包括雙縮脲法、水楊酸比色法，但雙縮脲法靈敏度低，干擾大，水楊酸法測定結果準確性較差。因此，提供一種檢測方便、結果準確的蛋白質檢測方法至關重要。
【發明內容】
[0004]為解決現有技術中存在的上述技術問題，本發明的目的是提供一種乳制品中蛋白質的快速準確的檢測試劑盒及檢測方法。
[0005]本發明的技術方案如下:
一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒，包括以下含量的組分:
有機溶劑50-100ml，
酸溶液50-100ml，
水20_50ml,
氯化鈉水溶液20-50ml，
0.01%的蛋白質標準液20-30ml，
顯色液0.2-0.5g。
[0006]優選的，所述的有機溶劑選自乙醇、丙二醇或丙三醇中的一種。
[0007]優選的，所述的有機溶劑為90-95%體積份的有機溶劑。
[0008]優選的，所述的酸溶液選自醋酸或磷酸中的一種。
[0009]優選的，所述的酸溶液為80-90%體積份的酸溶液。
[0010]優選的，所述的水為去離子水。
[0011]優選的,所述的氯化鈉水溶液濃度為0.1-0.3mol/Lo
[0012]優選的，所述的染色液為考馬斯亮藍G-250。
[0013]采用如上所述的檢測試劑盒對乳制品中蛋白質進行檢測的方法，包括以下步驟:
(1)樣品前處理:取固體樣品2-5g或液體樣品5-10ml,置入比色管中，加入5-10ml水，充分混勻，制得待測試樣；同時準確量取蛋白質標準液5-10ml加入另一支比色管中；
(2)在步驟(I)中的兩支比色管中分別加入2-5ml氯化鈉水溶液，搖勻，再加入有機溶劑5-10ml、酸溶液5-10ml、水2_5ml，將顯色液過濾，取濾液3_5ml分別加入兩支比色管中；
(3)在加入顯色液后即采用可見紫外分光光度計進行測定吸光度，檢測波長為595nm，根據朗伯爾定律計算濃度。
[0014]步驟(3)中計算濃度的公式為:c=al/A，c為待測試樣濃度，a為吸收系數，I為光在樣本中經過的距離，A為吸光度。
[0015]和現有技術相比，本發明的有益效果在于:
1.考馬斯亮藍G-250在465nm處有最大吸收值，當其與蛋白質結合后形成的復發物在595nm處有最大吸收值，且其吸收值明顯高于465nm處的吸收值，因此，可大大提高蛋白質的檢測靈敏度，最低可達lug。本發明中采用考馬斯亮藍G-250作為檢測過程中的顯色液，可明顯提高乳制品中蛋白質的檢測限及檢測靈敏度。
[0016]2.本發明在檢測前先對樣品進行預處理，加入一定濃度的氯化鈉水溶液、酸試劑及有機溶劑等，可固化蛋白質，并排除其他氮化合物對檢測過程的影響，同時，先對樣品溶液進行過濾，取濾液進行檢測，均提高了檢測結果的準確性。
[0017]3.本發明檢測過程簡單，檢測時間短，可在5-10min左右內完成，且檢測試劑簡單，因此，檢測成本低，可滿足食品監管部門對市售乳制品的大樣本抽查。
[0018]4.本發明在對樣品進行檢測的同時，還對蛋白質標準溶液進行檢測，可通過蛋白質標準溶液的檢測結果判斷該方法檢測的可靠性，并可將其作為陽性對照，有效排除檢測環境對樣品檢測結果的干擾。
[0019]【具體實施方式】:
下面結合實施例對本發明做進一步說明:
實施例1
一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒，包括以下含量的組分:
90%體積份的乙醇50ml，
80%體積份的醋酸50ml，
去離子水20ml，
0.lmol/L的氯化鈉水溶液 20ml,
0.01%的蛋白質標準液 20ml，
馬斯亮藍G-250顯色液 0.2g。
[0020]采用如上所述的檢測試劑盒對乳制品中蛋白質進行檢測的方法，包括以下步驟:
(I)樣品前處理:取嬰兒奶粉2g，置入比色管中，加入5ml水，充分混勻，制得待測試樣；
同時準確量取蛋白質標準液5ml加入另一支比色管中； (2)在步驟(I)中的兩支比色管中分別加入2ml氯化鈉水溶液，搖勻，再加入有機溶劑5ml、酸溶液5ml、水2ml，將顯色液過濾，取濾液3ml分別加入兩支比色管中；
(3)在加入顯色液后即采用可見紫外分光光度計進行測定吸光度，檢測波長為595nm，根據朗伯爾定律計算濃度。
[0021]經計算并經單位換算后得該樣品中蛋白質含量為15g/100g，含量合格。
[0022]實施例2
本發明的技術方案如下:
一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒，包括以下含量的組分:
95%體積份的丙二醇100ml，
90%體積份的磷酸100ml，
去離子水50ml,
0.3 mol/L的氯化鈉水溶液 50ml,
0.01%的蛋白質標準液30ml，
考馬斯亮藍G-250顯色液 0.5g。
[0023]采用如上所述的檢測試劑盒對乳制品中蛋白質進行檢測的方法，包括以下步驟:
(1)樣品前處理:取女士奶粉5g，置入比色管中，加入1ml水，充分混勻，制得待測試樣；同時準確量取蛋白質標準液1ml加入另一支比色管中；
(2)在步驟(I)中的兩支比色管中分別加入5ml氯化鈉水溶液，搖勻，再加入有機溶劑10ml、酸溶液10ml、水5ml，將顯色液過濾，取濾液5ml分別加入兩支比色管中；
(3)在加入顯色液后即采用可見紫外分光光度計進行測定吸光度，檢測波長為595nm，根據朗伯爾定律計算濃度。
[0024]經計算并經單位換算后得該樣品中蛋白質含量為8g/100g。
[0025]實施例3
本發明的技術方案如下:
一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒，包括以下含量的組分:
93%體積份的丙三醇80ml，
85%體積份的醋酸80ml，
去離子水30ml，
0.2 mol/L的氯化鈉水溶液 30ml,
0.01%的蛋白質標準液25ml，
考馬斯亮藍G-250顯色液 0.35g。
[0026]采用如上所述的檢測試劑盒對乳制品中蛋白質進行檢測的方法，包括以下步驟:
(1)樣品前處理:取純牛奶5ml，置入比色管中，加入5ml水，充分混勻，制得待測試樣；同時準確量取蛋白質標準液5ml加入另一支比色管中；
(2)在步驟(I)中的兩支比色管中分別加入2ml氯化鈉水溶液，搖勻，再加入有機溶劑50ml、酸溶液5ml、水2ml，將顯色液過濾，取濾液3ml分別加入兩支比色管中；
(3)在加入顯色液后即采用可見紫外分光光度計進行測定吸光度，檢測波長為595nm，根據公式c=al/A計算濃度。
[0027]計算濃度并經單位換算后得該樣品中，c為待測試樣濃度，a為吸收系數，I為光在樣本中經過的距離，A為吸光度。
[0028]經計算并經單位換算后得該樣品中蛋白質含量為10g/100g。
上述實施例僅為本發明的優選實施方式，并不應理解為對本發明的限定，本領域技術人員根據本發明的揭示，不脫離本發明范疇所做出的改進和修改都應該在本發明的保護范圍之內。
【權利要求】
1.一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒，其特征在于，包括以下含量的組分: 有機溶劑50-100ml， 酸溶液50-100ml， 水20_50ml, 氯化鈉水溶液20-50ml， 0.01%的蛋白質標準液20-30ml， 顯色液0.2-0.5g。
2.根據權利要求1所述的一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒，其特征在于，所述的有機溶劑選自乙醇、丙二醇或丙三醇中的一種。
3.根據權利要求1所述的一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒，其特征在于，所述的有機溶劑為90-95%體積份的有機溶劑。
4.根據權利要求1所述的一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒，其特征在于，所述的酸溶液選自醋酸或磷酸中的一種。
5.根據權利要求1所述的一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒，其特征在于，所述的酸溶液為80-90%體積份的酸溶液。
6.根據權利要求1所述的一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒，其特征在于，所述的水為去離子水。
7.根據權利要求1所述的一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒，其特征在于，所述的氯化鈉水溶液濃度為0.1-0.3mol/L。
8.根據權利要求1所述的一種乳制品中蛋白質的檢測試劑盒，其特征在于，所述的染色液為考馬斯亮藍G-250。
9.采用如權利要求1-8任一所述的檢測試劑盒對乳制品中蛋白質進行檢測的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)樣品前處理:取固體樣品2-5g或液體樣品5-10ml,置入比色管中，加入5-10ml水，充分混勻，制得待測試樣；同時準確量取蛋白質標準液5-10ml加入另一支比色管中； (2)在步驟(1)中的兩支比色管中分別加入2-5ml氯化鈉水溶液，搖勻，再加入有機溶劑5-10ml、酸溶液5-10ml、水2_5ml，將顯色液過濾，取濾液3_5ml分別加入兩支比色管中； (3)在加入顯色液后即采用可見紫外分光光度計進行測定吸光度，檢測波長為595nm，根據朗伯爾定律計算濃度。
10.根據權利要求9所述的檢測方法，其特在于，步驟(3)中計算濃度的公式為:c=al/A, c為待測試樣濃度，a為吸收系數，1為光在樣本中經過的距離，A為吸光度。
【文檔編號】G01N21/78GK104297177SQ201410482590
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年9月20日 優先權日:2014年9月20日
【發明者】郭狄 申請人:中山鼎晟生物科技有限公司
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