專利名稱：一種魚體受鎘污染的檢測方法
技術領域：
本發明涉及化學領域，是一種魚體在水體中對重金屬鎘的吸收及累積產生的綜合 作用結果的評價技術。進一步說就是一種魚體受鎘污染新的評價技術。具體說就是魚體在 超標水體中或在鎘含量處在高限環境中長時間生存，有可能在魚體內產生有毒有害物質， 針對這種情況發明的一種檢測與評價方法。
背景技術：
通過食物鏈傳遞到人體的Cd主要來自土壤及水體污染。目前我國河流、湖泊等淡 水流域重金屬污染嚴重，例如長江、湘江、北江等河流，山東南四湖、貴州紅楓湖等湖泊，沈 陽張士污染灌區等水域。許多水域Cd含量超過我國漁業水質標準規定的限量值5yg廠1。 由于Cd亦被生物體吸收，且在生物體內不易轉化而積累在生物體內，因而水環境中的Cd可 經食物鏈富集可達相當高的濃度，嚴重影響了淡水養殖業的可持續發展。污染淡水環境中 養殖的水產品可通過人體膳食攝入對人體產生危害。水產品中Cd的超標現象屢有發生，不 但威脅到人體健康，更成為制約我國水產品出口創匯等經濟效益。水體中的Cd可以在各類 魚體中中富集，且存在一定規律。食品Cd污染是環境保護和公共衛生中的一大問題，對普通人群來說，食物鏈是Cd 進入體內并在組織器官中積累的主要途徑，食物鏈中的Cd主要來自土壤及水體污染。目前 水體重金屬污染時有發生，因此魚類等水產品中Cd超標現象嚴重，有必要對魚體中Cd的超 標風險加以評價，為無公害水產養殖提供理論依據。
發明內容
本發明的目的是提供一種魚體受鎘污染的檢測方法，通過檢測魚體中磷脂的總量 和各種磷脂成分的變化量，應用建立的統計模型，檢測與評價魚體受鎘污染的情況，對食品 安全起到指示作用。包括如下步驟⑴魚體樣品的采集；⑵魚體樣品的處理；⑶樣品的 分析；(4)結果的處理；(5)結果的評價。具體步驟為所述(1)魚體樣品的采集樣品采集后應迅速處理，清除內臟，-30 -20°C冷凍保 存；所述⑵魚體樣品的處理稱取80_150mg魚肉樣品，加入200-600 μ L甲醇/氯仿 (2 1, ν/ν)，渦旋1 3分鐘，放置溫度-30 -20°C，離心5 8分鐘。重復提取2 3 次，將提取所得上清液合并；在上清液中首先加入氯仿+水=1 1 (ν/ν)，200-300 μ L，從 而形成兩相體系；離心后，將磷脂所在的氯仿相與水相分離；氯仿相采用真空離心蒸發濃 縮器(Speed-Vac)干燥，溫度設定于45°C，干燥后樣品于_30°C保存備用；所述(3)樣品的分析取出步驟(2)干燥后的磷脂粗提物，用1 l(v/v)甲醇/ 氯仿復溶；分別取5 μ L磷脂溶液與5 μ L基質溶液混合后，從中取1 μ L滴于樣品探頭靶心， 待溶劑揮發產生結晶后，將靶送入基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜儀(MALDI-T0F)離 子源，采用氮激光器，波長200-400nm，延時引出(delayed extraction)和直線型(linear)的工作方式，采集質譜數據；所述(4)結果的處理在磷脂質譜中提取如下27個質核比(m/z)譜峰的峰面積 732、734、740、742、756、758、760、762、764、766、780、782、784、786、796、798、804、806、808、 820、822、824、828、830、832、844、846，其中譜峰數(a)在20-27之間，將每一譜圖中的所有 譜峰的峰面積值除以同一譜圖中內標物譜峰的面積而獲得相對峰面積，將其做為自變量 (Xi)，利用如下的模型，即可計算得到魚體Cd的含量
權利要求
1.一種魚體受鎘污染的檢測方法，其特征在于通過檢測魚體中磷脂的總量和各種磷 脂成分的變化量，應用建立的統計模型，評價魚體受鎘污染的情況，具體包括如下步驟(1) 魚體樣品的采集；⑵魚體樣品的處理；⑶樣品的分析；⑷結果的處理；(5)結果的評價。
2.根據權利1所述的檢測方法，其特征在于所述(1)魚體樣品的采集樣品采集后應迅速處理，清除內臟，"30 -20°C冷凍保存；所述⑵魚體樣品的處理稱取80-150mg魚肉樣品，加入200-600 μ L甲醇/氯仿 (2 1，ν/ν)，渦旋1 3分鐘，放置溫度-30 -20°C，離心5 &ι η。重復提取2 3次， 將提取所得上清液合并；在上清液中首先加入氯仿+水=1 1 (ν/ν)，200-300 μ L，從而形 成兩相體系；離心后，將磷脂所在的氯仿相與水相分離；氯仿相采用真空離心蒸發濃縮器 (Speed-Vac)干燥，溫度設定于45°C，干燥后樣品于_30°C保存備用；所述C3)樣品的分析取出步驟( 干燥后的磷脂粗提物，用1 l(v/v)甲醇/氯仿 復溶；分別取5 μ L磷脂溶液與5 μ L基質溶液混合后，從中取1 μ L滴于樣品探頭靶心，待 溶劑揮發產生結晶后，將靶送入基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜儀(MALDI-T0F)離子 源，采用氮激光器，波長200-400nm，延時引出(delayed extraction)和直線型(linear)的 工作方式，采集質譜數據；所述(4)結果的處理在磷脂質譜中提取如下27個質核比(m/z)譜峰的峰面積732、 734、740、742、756、758、760、762、764、766、780、782、784、786、796、798、804、806、808、820、 822、824、828、830、832、844、846，其中譜峰數(a)在20-27之間，將每一譜圖中的所有譜峰 的峰面積值除以同一譜圖中內標物譜峰的面積而獲得相對峰面積，將其做為自變量(Xi)， 利用如下的模型，即可計算得到魚體Cd的含量Y= ^(CixXi) (a 值為 20 27)/=I其中模型公式中的Ci為回歸系數，其變化范圍為1 士5%，Y值即樣本中魚體鎘暴露量 或魚體中Cd含量的估計值。
3.根據權利2所述的檢測方法，其特征在于所述基質溶液為2，5_二羥基苯甲酸 +0. 三氟乙酸的甲醇溶液。
4.根據權利2所述的檢測方法，其特征在于所述標的物為1，2_十四酰基磷脂酰膽堿 DMPC0
5.根據權利1所述的檢測方法，其特征在于所述(1)魚體樣品的采集為采集兩批平 行樣。
全文摘要
本發明公開一種魚體受鎘污染的檢測方法，通過檢測魚體中磷脂的總量和各種磷脂成分的變化量，應用建立的統計模型，檢測與評價魚體受鎘污染的情況，對食品安全起到指示作用。包括如下步驟(1)魚體樣品的采集；(2)魚體樣品的處理；(3)樣品的分析；(4)結果的處理；(5)結果的評價。本發明提供了一種關于魚體受鎘污染情況的新的檢測與評價方法。
文檔編號G01N27/64GK102043012SQ20091018785
公開日2011年5月4日 申請日期2009年10月13日 優先權日2009年10月13日
發明者李國琛, 王世成, 王姍姍, 王顏紅 申請人:中國科學院沈陽應用生態研究所
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