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提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法
【專利摘要】本發明提供一種提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法，包括根據抗人IgA堿性磷酸酶自身特點配制相應的酶標二抗工作液；其改進之處是，在所述配制好的酶標二抗工作液中依次加入下列物質：（1）加入低濃度高分子聚合物，使加入的高分子聚合物溶解于配制好的酶標二抗工作液中；（2）在加入高分子聚合物的酶標二抗工作液中再加入抗人IgA堿性磷酸酶，進行攪拌，使其充分溶解，得到提升抗人IgA堿性磷酸酶活性的酶標二抗工作液；通過加入低濃度的高分子聚合物達到提高抗人IgA堿性磷酸酶的反應活性，提高檢測靈敏度的效果。
【專利說明】提高酶標工作液抗人I gA堿性磷酸酶活性的工藝方法

【技術領域】
[0001]本發明涉及生物體外診斷試劑的制備，尤其涉及一種提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法。

【背景技術】
[0002]目前，免疫學檢測技術及其產品已廣泛應用于重大傳染性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤標志物、食品安全及優生優育等眾多檢測領域，在這些檢測技術如酶聯免疫吸附試驗，酶聯免疫斑點法試驗，膠體金快速檢測試驗中，酶是檢測中必不可少的重要環節。目前酶的應用都是根據酶自身的特點。如親和力，酸堿度等選擇相應的酶標二抗工作液，在很多檢測中容易受到外界實驗環境的干擾，導致漏檢，有的試驗中酶的反應時間較長，不利于臨床上推廣。所用酶標二抗與待檢樣品中抗體的結合速度，成為試劑盒產品性能中靈敏度的關鍵。因此，有待研究提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法。


【發明內容】

[0003]本發明的主要目的在于克服現有產品存在的上述缺點，而提供一種提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法，通過加入低濃度的高分子聚合物達到提高抗人IgA堿性磷酸酶的反應活性，提高檢測靈敏度的效果。
[0004]本發明的目的是由以下技術方案實現的。
[0005]本發明提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法，包括根據抗人IgA堿性磷酸酶自身特點配制相應的酶標二抗工作液；其特征在于，在所述配制好的酶標二抗工作液中依次加入下列物質:(I)加入低濃度高分子聚合物，使加入的高分子聚合物溶解于配制好的酶標二抗工作液中；(2)在加入高分子聚合物的酶標二抗工作液中再加入抗人IgA堿性磷酸酶，進行攪拌，使其充分溶解，得到提升抗人IgA堿性磷酸酶活性的酶標二抗工作液。
[0006]前述的提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法，其中，所述配制好的酶標二抗工作液中加入的高分子聚合物重量百分比濃度為1±0.5%，且該高分子聚合物為聚乙二醇6000或聚乙烯吡咯烷酮K30。
[0007]前述的提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法，其中，所述酶標二抗工作液為含有蛋白的磷酸緩沖液或者磷酸鹽緩沖液(PBS)。
[0008]前述的提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法，其中，所述在加入高分子聚合物的酶標二抗工作液中再加入的抗人IgA堿性磷酸酶的重量百分比濃度為0.06%ο
[0009]本發明權利要求1所述的提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法在酶聯免疫吸附試驗、酶聯免疫斑點法試驗或者膠體金快速檢測試驗中的應用。
[0010]本發明提高抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法的有益效果，本發明通過加入低濃度的高分子聚合物而改變酶標二抗工作液中的成分，使抗人IgA堿性磷酸酶能夠結合更多的特異性抗體，從而有效提高抗人IgA堿性磷酸酶的反應活性。低濃度的高分子聚合物可以促進抗人IgA堿性磷酸酶與待檢樣品中的IgA碰撞幾率，提高抗人IgA堿性磷酸酶和IgA結合速度，同時又避免了非特異性反應。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0011]圖1為本發明酶標二抗工作液中加入聚乙二醇6000后的抗EA-1gA試驗結果。
[0012]圖中標號說明:
[0013]1、2、3、4、5 為 EA-1gA 陽性樣本;
[0014]6、7、8 為 EA-1gA 陰性樣本。
[0015]A行是使用本發明的方法配制的酶標二抗工作液的檢測結果。
[0016]B行是使用現有技術方法配制的酶標二抗工作液的檢測結果。

【具體實施方式】
[0017]本發明提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法，包括根據抗人IgA堿性磷酸酶自身特點配制相應的酶標二抗工作液；其改進之處在于，在所述配制好的酶標二抗工作液中依次加入下列物質:(I)加入低濃度高分子聚合物，使加入的高分子聚合物溶解于配制好的酶標二抗工作液中；(2)在加入高分子聚合物的酶標二抗工作液中再加入抗人IgA堿性磷酸酶，進行攪拌，使其充分溶解，得到提升抗人IgA堿性磷酸酶活性的酶標二抗工作液。
[0018]本發明提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法，其中，所述配制好的酶標二抗工作液中加入的高分子聚合物重量百分比濃度為1±0.5%，且該高分子聚合物為聚乙二醇6000或聚乙烯吡咯烷酮K30。所述酶標二抗工作液為含有蛋白的磷酸緩沖液或者磷酸鹽緩沖液(PBS)。所述在加入高分子聚合物的酶標二抗工作液中再加入的抗人IgA堿性磷酸酶的重量百分比濃度為0.06%ο
[0019]本發明權利要求1所述的提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的工藝方法在酶聯免疫吸附試驗、酶聯免疫斑點法試驗或者膠體金快速檢測試驗中的應用。
實施例:
[0020]A、配制酶標二抗工作液，該酶標二抗工作液為含有蛋白的磷酸緩沖液；
[0021]B、在上述酶標二抗工作液加入重量百分比濃度為0.5%的聚乙二醇6000，攪拌，使其充分溶解；
[0022]C、再向加入聚乙二醇6000的酶標二抗工作液中加入重量百分比濃度為0.06/%的抗人IgA堿性磷酸酶，攪拌，使其充分溶解；得到提升抗人IgA堿性磷酸酶活性的酶標二抗工作液。
[0023]如圖1所不，1-5號為EA-1gA陽性樣本，6-8號為EA-1gA陰性樣本。
[0024]A行是使用本發明的方法的檢測結果，B行是使用現有技術的檢測結果。陰性樣本斑塊中間無顯色條帶，陽性樣本斑塊中間顯色條帶越深，說明樣本的陽性程度越強，對于同一份陽性樣本來說，顯色條帶越深說明檢測靈敏度水平越高。由附圖可以清楚地看出，在5份EA-1gA陽性樣本中，經過本發明方法處理過酶標二抗的檢測結果顯色條帶比現有技術的檢測結果顯色條帶明顯加深，而3份EA-1gA陰性的檢測結果兩種方法一致。結果說明，本發明處理方法可有效提高提高酶標工作液抗人IgA堿性磷酸酶活性的反應活性，提高檢測靈敏度水平。
[0025]本實施例中未將進行說明的內容為現有技術，故，不再進行贅述。
[0026]以上所述，僅是本發明的較佳實施例而已，并非對本發明作任何形式上的限制，凡是依據本發明的技術實質對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發明技術方案的范圍內。
【權利要求】
1.一種提高酶標工作液抗人I#堿性磷酸酶活性的工藝方法，包括根據抗人I#堿性磷酸酶自身特點配制相應的酶標二抗工作液；其特征在于，在所述配制好的酶標二抗工作液中依次加入下列物質:(1)加入低濃度高分子聚合物，使加入的高分子聚合物溶解于配制好的酶標二抗工作液中:(2)在加入高分子聚合物的酶標二抗工作液中再加入抗人18八堿性磷酸酶，進行攪拌，使其充分溶解，得到提升抗人I#堿性磷酸酶活性的酶標二抗工作液。
2.根據權利要求1所述的提高酶標工作液抗人I#堿性磷酸酶活性的工藝方法，其特征在于，所述配制好的酶標二抗工作液中加入的高分子聚合物重量百分比濃度為1±0丨5%，且該高分子聚合物為聚乙二醇6000或聚乙烯吡咯烷酮1(30。
3.根據權利要求1所述的提高酶標工作液抗人I#堿性磷酸酶活性的工藝方法，其特征在于:所述酶標二抗工作液為含有蛋白的磷酸緩沖液或者磷酸鹽緩沖液(口防)。
4.根據權利要求1所述的提高酶標工作液抗人I#堿性磷酸酶活性的工藝方法，其特征在于:所述在加入高分子聚合物的酶標二抗工作液中再加入的抗人I#堿性磷酸酶的重量百分比濃度為0.06%。
5.一種如權利要求1所述的提高酶標工作液抗人I#堿性磷酸酶活性的工藝方法在酶聯免疫吸附試驗、酶聯免疫斑點法試驗或者膠體金快速檢測試驗中的應用。
【文檔編號】G01N33/558GK104345143SQ201310343210
【公開日】2015年2月11日 申請日期:2013年8月8日 優先權日:2013年8月8日
【發明者】朱京山 申請人:北京和杰創新生物醫學科技有限公司