專利名稱：3,5－取代噁唑烷酮類化合物的純度的檢測方法
技術領域：
本發明提供一種3，5-取代噁唑烷酮類化合物的利用高效液相方法進行純度檢測的方法。此外，本發明還提供了含有3，5-取代噁唑烷酮類化合物或者在制備過程中產生的中間體的純度的檢測方法，3，5-取代噁唑烷酮類化合物作為有效成分的抗菌藥物的純度檢測。
背景技術：
3，5-取代噁唑烷酮類化合物屬于噁唑烷酮類化合物。近年來各類抗生素的不斷被開發和問世，使細菌感染疾病的治療有了很多針對性藥物，在肯定其積極效果的同時還可以看到了大量針對抗菌劑的耐藥菌也是發展迅速，由于細菌接觸抗菌藥物后，通過質粒或染色體介導發生變異，獲得耐藥性，給臨床治療帶來了新的困難。早在1978年，杜邦公司在US4128654專利中公開了5-鹵甲基-3-芳基噁唑烷酮對某些植物病菌有抗菌活性。CN1355165A號專利在此基礎上進行了結構修飾合成了3，5-取代噁唑烷酮類化合物，但是其合成修飾的產品成果目前尚未有有關物質(即雜質)的檢測方法，很顯然，如何進行3，5-取代噁唑烷酮類化合物，尤其是(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺等有關物質的檢測問題在研發中也日益突出。一般而言，色譜分析因其具有快速、靈敏、分離度高的特點，常應用于藥物分離和定量分析研究工作中，是藥物純度分析的重要方法之一，是藥典所要求的純度檢測必不可少的方法。相對于薄層色譜檢測方法或者其他方法，高效液相色譜儀(HPLC)法具有快速準確的優點，所以其應用也日益廣泛，但是對于特定物質而言，篩選合適的HPLC檢測存在相當大的難度。經過大量的文獻檢索，發現一般公開的文獻中記載的方法，例如，與本發明檢測的化合物結構相似的利萘唑酮等類似物的液相檢測條件，流動相多采用正己烷∶乙醇∶TFA(65∶35∶1)。盡管結構相似，但是采用以上公知方法測定本發明的3，5-取代噁唑烷酮類化合物，流動相的溶解性不好，不能有效分離各組分，而且中間體無法檢出，花費時間也較長。
發明內容
本發明的目的在于提供一種3，5-取代噁唑烷酮類化合物的純度的檢測方法。該方法應該具有樣品溶解速度快，時效高；被分析物中各成分間分離徹底；相應試劑的配制操作簡單，分析方法穩定，適應性強等特點。
本發明提供的3，5-取代噁唑烷酮類化合物的檢測方法，其特征在于，包括用高效液相色譜儀進行檢測，所述的高效液相色譜儀含有紫外檢測器，設定檢測波長為200-400nm，所述高效液相色譜儀的色譜柱為反相柱，流動相為水與極性有機溶劑的混合液，其中有機相的比例為30％-90％。
所述的極性有機溶劑為乙腈、甲醇、乙醇、四氫呋喃、氯仿、異丙醇或其混合物，優選乙腈和/或甲醇；本發明的檢測方法中流動相為水與乙腈、水與甲醇、水與乙醇、水與四氫呋喃、水與氯仿、水與異丙醇或水與乙腈+甲醇的任何比例的混合液，以流動相重量為100％計，水在流動相中所占的重量比例可以選為10-70％，優選20-60％，更優選20-50％，如果有機溶劑是乙腈和甲醇的混合物，則該混合物優選占流動相重量的50-80％，其中乙腈和甲醇的比例為0.1～3∶1，優選0.12～2∶1。
本發明上述色譜柱也稱為固定相，其采用反相柱，優選為C4、C8、C18反相色譜柱，柱溫優選為20-50℃；流動相為水與極性有機溶劑的混合液。
本發明的檢測波長優選為200-300nm。
本發明所述的3，5-取代噁唑烷酮類化合物可以是3，5-取代噁唑烷酮類化合物的粗品、精制品，或者在制備過程中的中間體，或其起始原料，以及還包括3，5-取代噁唑烷酮類化合物作為有效成分的最終產品，例如含有有效濃度或者治療有效劑量的3，5-取代噁唑烷酮類化合物的抗菌藥物。
本發明的關鍵是在此流動相和波長條件下可以很好地分離3，5-取代噁唑烷酮類化合物，以及其中間體，甚至是含有該類成分的產品。采用本發明的檢測方法，用乙腈∶水90-30％∶10-70％(尤其是70∶30)做流動相可以迅速溶解樣品，分離過程所用時間更短，一般15分鐘即可完成檢測。做為流動相并且分離效果很好，各個組分都得到完全分離，非常適合3，5-取代噁唑烷酮類化合物的純度的檢測。而采用目前有記載的對本發明想近似結構的化合物所用到的“25％的乙腈∶75％的水”的檢測，申請人經過反復實驗發現樣品無法被溶解，其中間體更無法溶解，所以根本無法實施測定。因此本發明所建立的高效液相色譜法具有操作簡單，準確度高，專一性強等特點。
本發明所述的3，5-取代噁唑烷酮衍生物及其結構包括化合物1(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；化合物2(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；化合物3(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；化合物4(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇對甲苯磺酸酯；化合物5(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇乙酸酯；化合物6(S)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基咪唑；化合物75-甲基-2-[(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基]巰基-1，3，4-噻二唑；化合物8(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；化合物9(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1H-四氮唑；化合物10(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基樟腦酰亞胺；化合物111-甲基-5-[(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基巰基四氮唑；化合物12(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基鄰苯二酰亞胺；化合物13(S)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；化合物14(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基硫酚；化合物15(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺；化合物16(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基苯并三氮唑；化合物17(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；化合物18(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；化合物19(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基鄰苯二酰亞胺；化合物20(S)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；化合物21(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；化合物22(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基樟腦酰亞胺；化合物23(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺；化合物24(R)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；化合物25(R)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；化合物26(R)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基鄰苯二酰亞胺；化合物27(S)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；化合物28(R)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；化合物29(R)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基樟腦酰亞胺；化合物30(R)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺；化合物31(R)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；化合物32(R)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；化合物33化合物39(R)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基鄰苯二酰亞胺；化合物34(S)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；化合物35(R)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；化合物36(R)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基樟腦酰亞胺；化合物37(R)-[N-3-(3 ′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺；化合物38(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基)甲醇；化合物39(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基)甲醇甲磺酸酯；化合物40(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基)甲基鄰苯二酰亞胺；化合物41(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基)甲基-1，2，4-1H-三氮唑；化合物42(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基)甲基丁二酰亞胺；化合物43(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-(4-甲氧基)苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；化合物44(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-(4-甲氧基)苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；化合物45(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-(4-甲氧基)苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基鄰苯二酰亞胺；化合物46(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-(4-甲氧基)苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；化合物47(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-(4-甲氧基)苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺；化合物48(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；化合物49(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；化合物50(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基鄰苯二酰亞胺；化合物51(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；化合物52(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；化合物53(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基樟腦酰亞胺；化合物54(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺；化合物55(R)-[N-3-(3′-氟-4′-哌啶基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；化合物56(R)-[N-3-(3′-氟-4′-哌啶基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；化合物57(R)-[N-3-(3′-氟-4′-哌啶基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基鄰苯二甲酰亞胺；化合物58(R)-[N-3-(3′-氟-4′-哌啶基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；化合物59(R)-[N-3-(3′-氟-4′-哌啶基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基樟腦酰亞胺；化合物60(R)-[N-3-(3′-氟-4′-哌啶基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺。
本發明的上述3，5-取代噁唑烷酮類化合物的化合物其優選(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；(R)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-哌啶基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑。
在優選實施例中，本發明的上述化合物的純度的檢測方法具體為供試品溶液的制備取樣品(3，5-取代噁唑烷酮類化合物，具有代表性的具體化合物例如(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺)適量，加流動相溶解并稀釋制成每1ml中含主藥0.1mg的溶液，作為供試品溶液，精密量取供試品溶液2ml，置100ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液；測定法量取對照溶液20μl，注入液相色譜儀，其中高效液相色譜儀用十八烷基鍵合硅膠為填充劑；檢測波長245nm；柱溫35℃；流動相為乙腈和水。調節檢測靈敏度，使主成分色譜峰峰高約為滿量程的10％～20％。再量取供試品溶液與對照溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保留時間的3-5倍，供試品溶液的色譜圖中如顯雜質峰，各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的2倍(2.0％)。
本發明所述化合物的純度的檢測方法實際上檢測的對象是該化合物中所含有的有關物質(非活性成分，也稱雜質)，即檢測的是化合物中含有的雜質，通過對雜質的量的檢測，可以得到化合物的純度。
圖1本發明實施例1的流動相為乙腈∶水(75∶25)的色譜圖，其中，4.0分鐘為1號樣品峰，12.34分鐘為中間體7，6.55分鐘為中間體6，8.85分鐘為中間體5，9.03分鐘為中間體4；圖2本發明實施例1的流動相為乙腈∶甲醇∶水(10∶70∶20)的色譜圖，其中，6.7分鐘為1號樣品峰，24.10分鐘為中間體7，12.59分鐘為中間體6，5.28分鐘為中間體5，20.27分鐘為中間體4；圖3本發明實施例1的流動相為甲醇∶水(80∶20)的色譜圖，其中4.73分鐘為1號樣品峰，14.68分鐘為中間體7，8.39分鐘為中間體6，10.47分鐘為中間體5，12.46分鐘為中間體4。
具體實施例方式
實施例1檢測波長的確定將樣品(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺(樣品)及其中間體用流動相(乙腈∶水＝70∶30)配置成5ug/ml的濃度，進行紫外掃描，將樣品及中間體的紫外圖譜重疊發現在245nm為其交差點。故選245nm為有關物質的檢測波長。
實施例2樣品(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺在不同反相填料柱中的保留行為。
以乙腈-水(70∶30)為流動相，流速為1.0ml/ml。進樣量為20ul，在240nm處記錄色譜圖，考察在不同型號的反相C18填料柱中的色譜行為，結果見表1。
表1.樣品在不同ODS色譜柱中的保留行為
由表1可以看出，現有的C18品牌均可以用于樣品的測定，綜合考察，優選Diamonsil ODS柱。
選擇Diamonsil ODS(200×4.6mm，5um)為色譜柱，分別考察了柱溫20、30、40、50℃，結果表明均能將樣品測定。主峰的保留時間隨柱溫的升高而縮短，分離度合格。實際應用中，合適的柱溫度范圍約在20-50℃范圍內，也可根據實際的該類化合物或其衍生物的結構選擇低于或高于此范圍的合適的柱溫。
實施例3(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺(樣品)在C8柱中的保留行為。
表2.樣品在不同C8柱中的保留行為
由表2可以看出，現有的C8品牌均可以用于樣品的測定，綜合上述指標，優選Kromasil C8柱。
選擇Kromasil C8(150×4.6mm，5um)為色譜柱，分別考察了柱溫20、30、40、50℃，結果表明均能測定樣品的純度。分離度合格。
實施例4(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺(樣品)在色譜柱Kromasil ODS(200×4.6mm，5um)，不同流動相中的參數，見表3。
表3.樣品在不同流動相中的保留行為
注分離度(resolution，R又稱為解析度、分辨率)是色譜圖中相鄰兩峰分離程度的量度。按照中國藥典2005年版二部附錄VD高效液相色譜法的規定，分離度應大于1.5。
拖尾因子(tailing factor，T)--用以衡量色譜峰的對稱性。也稱為對稱因子(symmetryfactor)或不對稱因子(symmetry factor)。按照中國藥典2005年版二部附錄VD高效液相色譜法的規定，托尾因子應在0.95-1.05之間。
由表3可看出，樣品在不同比例的乙腈-水、甲醇-水、乙醇-水、分氫呋喃-水、氯仿-水、異丙醇-水中雖可被檢出，但乙醇-水、四氫呋喃-水、氯仿-水、異丙醇-水分離度和托尾因子均不合格，且柱壓較高；而乙腈-水、甲醇-水的柱壓較低，保留時間適中，分離度和托尾因子均較好，所以優選乙腈-水和甲醇-水。
實施例5考察在Kromasil ODS(200×4.6mm，5um)柱中，不同乙腈-水配比的流動相對(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺的分離效果。結果見表4。
表4.在各比例乙腈-水中的保留行為
由表4可以看出，(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺在不同比例的乙腈-水中均可以被檢出，且(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺的中間體7，6，5，4在此條件下也可以被檢出且與主成分峰完全分離，結果見圖1。從省時的角度考慮在此條件下優選乙腈-水(75∶25)。
實施例6考察在Kromasil ODS(200×4.6mm，5um)柱中，不同乙腈-甲醇-水配比的流動相對(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺(樣品)和雜質的分離效果。結果見表5。
表5.樣品在各種比例的乙腈-甲醇-水中的保留行為
由表5可以看出，樣品在乙腈-甲醇-水(20∶30∶50)時，中間體7未被檢出。在乙腈-甲醇-水(30∶30∶40)和乙腈-甲醇-水(40∶30∶30)時其中間體的保留時間過長，接近40分鐘才可以將其檢出，操作不方便，且峰的對稱性差。乙腈∶甲醇∶水＝(50∶25∶25)時中間體雖然可以被檢出，但峰的對稱性差。故最優選乙腈-甲醇-水(10∶70∶20)，即當乙腈和甲醇的量占流動相重量的70％-80％時，是較佳的流動相條件，在此條件下所有中間體在30分鐘內均可以被檢出，操作方便，且托尾因子合格。見圖2。
實施例7考察在Kromasil ODS(200×4.6mm，5um)柱中，不同甲醇-水配比的流動相對樣品(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺的雜質分離效果。結果見表6。
表6.在各種不同比例的甲醇-水中的保留行為
由表6可以看出，除甲醇∶水(45∶55)外其它不同比例的甲醇-水可以將樣品(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺及其中間體均可以檢出，其中間體與主峰可以完全分離。見圖3。從操作方便及省時的角度可以優選甲醇-水(80∶20)。
實施例8(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺檢測(樣品)的方法學考察。
標準曲線以流動相為溶劑，配制成2.5ug/ml、12.5ug/ml、25ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、200ug/ml、500ug/ml的系列溶液，分別進樣20ul，以濃度(C)為橫坐標，峰面積(A)為縱坐標，回歸方程C＝31.37A(10-4)+0.3779R＝0.9996線性范圍2.5～500ug/ml。
最低檢出量取樣品的對照品適量。用流動相稀釋成不同濃度，取20ul。注入色譜儀，時峰高為儀器基線噪音的三倍，此時溶液濃度為0.5ug/ml。最低檢出量為10ng。
溶液穩定性試驗取對照品適量，用流動相稀釋成200ug/ml的溶液，取10ul進樣，結果見表7。
表7.在流動相溶液中的穩定性
說明樣品在流動相溶液中具有一定的穩定性，而且該方法靈敏，最低檢測量低，可以滿足分析測定要求。
實施例9制劑輔料干擾試驗(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺片劑或者膠囊制劑中的輔料包括淀粉、微晶纖維素和乳糖這三種白色粉末。按照膠囊配方制得不含(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺的空白輔料，取空白輔料100mg置10ml的容量瓶中，按供試品溶液溶解過程溶解的白色渾濁液，過濾，取濾液20ul注入色譜儀，按照上述分析方法測定。結果表明，輔料在本發明的檢測條件下，在分析過程中均不出峰，制劑輔料不干擾供試品有關物質檢測。
實施例10采用乙腈∶水(75∶25)為流動相，十八烷基鍵合硅膠為填充劑，檢測波長245nm；柱溫35℃檢測化合物1-60的有關物質，結果見表8。
表8.3，5-取代噁唑烷酮類化合物有關物質檢測結果
從上述實驗結果可以看出，采用乙腈-水(70∶30)可以檢測化合物1～60號的有關物質。
實施例11采用甲醇∶水(80∶20)為流動相，十八烷基鍵合硅膠為填充劑，檢測波長245nm；柱溫35℃檢測化合物1-60的有關物質，結果見表9。
表9.3，5-取代噁唑烷酮類化合物的有關物質檢測結果
上述結果可看出，采用甲醇-水(80∶20)可檢測化合物1～60的有關物質。
實施例12乙腈∶甲醇∶水(10∶70∶20)為流動相，十八烷基鍵合硅膠為填充劑，檢測波長245nm；柱溫35℃檢測化合物1-60的有關物質，結果見表10。
表10，3，5-取代噁唑烷酮類化合物有關物質檢測結果
實施例13采用乙腈∶水(75∶25)為流動相，辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑，檢測波長245nm；柱溫35℃檢測化合物1-60的有關物質，結果見表11。
表11.3，5-取代噁唑烷酮類化合物有關物質檢測結果
從上述實驗可以看出采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈∶水(75∶25)、甲醇-水(80∶20)、乙腈∶甲醇∶水(10∶70∶20)為流動相，檢測波長245nm，檢測1～60號化合物，相關雜質與其主峰能夠完全分離。且分離度均大于1.5。采用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈∶水(75∶25)、甲醇∶水(80∶20)、乙腈∶甲醇∶水(10∶70∶20)為流動相，檢測波長245nm，檢測3，5-取代噁唑烷酮類化合物，相關雜質與其主峰能夠完全分離。且分離度均大于1.5。說明在此條價下3，5-取代噁唑烷酮類化合物的雜質可以完全被檢出。
權利要求
1.一種3，5-取代噁唑烷酮類化合物的純度的檢測方法，該方法包括用高效液相色譜儀進行檢測，所述的高效液相色譜儀含有紫外檢測器，設定檢測波長為200-400nm，所述高效液相色譜儀的色譜柱為反相柱，流動相為水與極性有機溶劑的混合液，其中有機相的比例為30％-90％。
2.如權利要求1所述的檢測方法，其中，所述的3，5-取代噁唑烷酮類化合物包括下列化合物(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇對甲苯磺酸酯；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇乙酸酯；(S)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基咪唑；5-甲基-2-[(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基]巰基-1，3，4-噻二唑；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1H-四氮唑；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基樟腦酰亞胺；1-甲基-5-[(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基巰基四氮唑；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基鄰苯二酰亞胺；(S)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基硫酚；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-氟4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基苯并三氮唑；(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基甲基鄰苯二酰亞胺；(S)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基樟腦酰亞胺；(R)-[N-3-(4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；(R)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；(R)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基鄰苯二酰亞胺；(S)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；(R)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；(R)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基樟腦酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-氯-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；(R)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；(R)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基鄰苯二酰亞胺；(S)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；(R)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；(R)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基樟腦酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-三氟甲基-4′-嗎啉基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基)甲醇；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基)甲醇甲磺酸酯；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基)甲基鄰苯二酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基)甲基-1，2，4-1H-三氮唑；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-苯基哌嗪基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基)甲基丁二酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-(4-甲氧基)苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-(4-甲氧基)苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-(4-甲氧基)苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基鄰苯二酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-(4-甲氧基)苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-(4-甲氧基)苯基哌嗪基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基鄰苯二酰亞胺；(S)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基乙酰胺；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基樟腦酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-(4″-芐基哌啶基))苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-哌啶基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-哌啶基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲醇甲磺酸酯；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-哌啶基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基鄰苯二甲酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-哌啶基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基-1，2，4-1H-三氮唑；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-哌啶基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基樟腦酰亞胺；(R)-[N-3-(3′-氟-4′-哌啶基)苯基-2-氧代-5-噁唑烷基]甲基丁二酰亞胺。
3.如權利要求1所述的檢測方法，其中，所述的色譜柱為C4、C8或C18色譜柱。
4.如權利要求1所述的檢測方法，其中，所述的檢測波長為200-300nm。
5.如權利要求1所述的檢測方法，其中，流動相為水與極性有機溶劑的混合液，有機相的比例為流動相的重量的40％-80％。
6.如權利要求1或5所述的檢測方法，其中，所述的極性有機溶劑為乙腈、甲醇、乙醇、四氫呋喃、氯仿、異丙醇或其混合物。
7.如權利要求6所述的檢測方法，其中，所述的極性有機溶劑為乙腈和/或甲醇。
8.如權利要求1所述的檢測方法，其中，所述的反相柱的柱溫為20-50℃。
9.如權利要求1或5所述的檢測方法，其中，所述的流動相為水與乙腈，以流動相重量為100％計，乙腈為流動相的重量的40-80％。
10.如權利要求1或5所述的檢測方法，其中，所述的流動相為水與乙腈和甲醇，以流動相重量為100％計，水在流動相中所占的重量比例為20-60％，乙腈和甲醇的比例為0.1～3∶1。
全文摘要
本發明提供一種3，5－取代噁唑烷酮類化合物的純度的檢測方法，包括用包含有紫外檢測器的高效液相色譜進行檢測，所述紫外檢測器的檢測波長為200－300nm，所述高效液相色譜的固定相為反相柱，流動相為水與極性有機溶劑的混合液；該方法應該具有如下特點樣品溶解速度快，時效高；被分析物中各成分間分離徹底；相應試劑的配制操作簡單，分析方法穩定，適應性強。
文檔編號G01N33/15GK101021511SQ20071008839
公開日2007年8月22日 申請日期2007年3月19日 優先權日2007年3月19日
發明者王瑩, 朱錦, 劉勁松, 魯韜 申請人:四川貝力克生物技術有限責任公司
專業數控銑床產品供應商
20年生產經驗，實力工廠，精工品質，質量有保障
