專利名稱::用于血樣分析的方法以及實施該方法的設備和試劑的制作方法
技術領域:
:本發明涉及一種用于血樣分析的方法,以及用于其執行的設備和試劑。更具體地,本發明涉及血樣的自動分析領域。
背景技術:
:通過血樣分析通常致力于測定-白細胞的總數;-更具體地說,通過亞-種群(嗜堿細胞,嗜酸性細胞,中性白細胞,單核細胞和淋巴細胞)的白細胞數;-紅細胞和血小板的數目;以及-血紅蛋白水平。已知多種分析技術,特別是-血紅蛋白測定在紅細胞溶解之后執行,也就是破壞紅細胞的細胞膜,并且通過在培養基中釋放的血紅蛋白的分光光度測量法測定;血紅蛋白的測定還需要血紅蛋白以一種復合形式(氧合血紅蛋白或氰化正鐵血紅蛋白(cyanmethemoglobin))穩定,以便在適當的波長測定單個化合物的吸收率。-白細胞總數通過實施特定溶解紅細胞并保護白細胞在血樣上由抵抗性數出白細胞的總數。-通過亞-種群對白細胞的鑒別以及對其的計數是這樣進行的-在特定溶解紅細胞,保護白細胞并調節pH之后,通過抵抗性容積測量進行;然而這不能在單次的分析中鑒別所有的亞-種群;-或者通過光學方式,具體地通過流式血細胞計數進行;在特定溶解紅細胞并保護白細胞之后,在白細胞流上在較窄、中等和較大角的軸中,并且可選^^地在加入示蹤劑(例如氯唑黑,或者DNA或RNA示蹤染劑,或者熒光劑)后,通過測定不同的參數(具體地衍射率、熒光率、吸收率),并且通過在不同的波長測定而進行;這種方法允許區分白細胞亞-種群的鑒別。-紅細胞和血小板計數通過抵抗性測量在稀釋的樣品上進^",不需要加入特定的試劑。存在許多的自動血細胞分析儀,其使用所述技術以便獲得盡可能完全的血樣分析。在這些自動設備中,傳統地同時存在兩個不同的分析回路-第一回路,設計用于測定血紅蛋白和/或計算白細胞總數;以及-第二回路,設計用于對血樣執行鑒別和/或通過流式血細胞測量術計數白細胞。每個回路特征為適合于所用測量裝置的血樣稀釋率、加入一種或多種試劑以及一些用于執行和測量的適當裝置。因此,對于血紅蛋白的測量和白細胞的計數來說,回路典型地包括所謂的計數槽,在其中血樣被稀釋,在其中加入試劑,所述試劑具體包括紅細胞溶解化合物、對由血紅蛋白和白細胞保護(leucoprotect've)化合物形成的混合物進行穩定的穩定化合物,并且直接在這個計數槽中測定下面的內容通過分光光度測定法測定血紅蛋白,并且通過抵抗性測定白細胞數。稀釋率選擇為使得分析溶液優選為同質的,并且使得測定設備不會飽和。這個稀釋率在1/100th-l/500th之間,一般在/160th-l/〗80th之間。對于通過流式細胞測量術的白細胞鑒別來說,回路使用一個用于稀釋血樣的槽,其中加入一種或多種試劑,包含紅細胞溶解劑,可選擇地包含鑒別劑(例如DNA或RNA白細胞熒光彩色劑),然后取這個溶液的一部分以便將其注射進入流式細胞測量術的循環光學槽中。此處使用的稀釋率小于l/100th,允許由目前市場上能夠獲得的血細胞計數器(液壓動力聚焦型)得到最佳的分析時間。因此,常規地,通常為兩個分析曰路必須使用兩種不同的試劑,并且在這兩個分析回路中執行血樣的不同稀釋。制造商的主要目的是通過減少化合物和試劑的數目來簡化現有的自動設備,能夠節省生產和維護成本并減小自動設備的尺寸,而不會減少一次完全血樣分析的時間。本發明具體旨在實現這些目的。為此目的的文獻WO2004/003517提出了一種方法和設備,其中兩個分析回路具有^^用的裝置。原理為在一個單獨的稀釋槽中執行血樣的第一次稀釋,并且將部分選定容量的這個稀釋液連續輸送到測量或計數單元,以便每次測量或計數血樣中所含的不同元素。為了執行完全的分析,也就是計數紅細胞和血小板、計數白細胞、測量血紅蛋白和白細胞鑒別,該文獻描述了下面的解決辦法使用第一次輸送以計數紅細胞和血小板,加入溶解劑到稀釋槽中,然后執行第二次輸送以計數白細胞,執行溶解后稀釋溶液的第三次輸送以測量血紅蛋白水平,加入白細胞鑒別劑,并執行第四次輸送以在測量單元中實現白細胞鑒別。這個原理能夠使用單獨的所謂的稀釋槽,但其不能節省分析次數,因為測量或計數在部分稀釋液的每次輸送之后連續執行。此外,它需要完美控制連續試劑和被分配的稀釋液的容量以及輸送給測量單元的稀釋液的容量。此外,它還需要使用多個注射器和溶解劑。本發明的目的也是克服這種缺陷。
發明內容根據第一目的,本發明涉及一種用于血樣自動分析的方法,以及一種用于執行這個方法的設備。在根據本發明的方法中-一種分析溶液,包含所述血樣、稀釋劑,和-至少一種溶解紅細胞的化合物;-至少一種生色復合體形式的穩定血紅蛋白的化合物;形成于一個單獨的稀釋和分析槽中,-在所述槽中在溶解紅細胞之后,在這個分析溶液中通過分光光度測定法測得血紅蛋白水平;以及-適量的這個分析溶液從所述槽取出,通過光學裝置對其執行白細胞鑒別。的化合物,以便能夠鑒別出五種主要的白細胞亞-種群。白細胞的計數可以在分析槽中共同進行和/或由光學裝置進行。紅細胞的計數以及可選擇的血小板的計數例如可以在該方法的前一步驟中,對從唯一的稀釋和分析槽中取出的樣品進行。因此,本發明基于這樣的觀念所用的唯一的分析溶液例如用于兩種類型的分析,它們通常在兩個獨立的回路中執行,也就是一方面測量血紅蛋白并且可選擇地計數白細胞,另一方面通過光學裝置鑒別白細胞,所述分析溶液混合了"試劑"化合物,該試劑化合物借助于它們的性質和它們的數量能夠至少執行這些分析。引入的試劑化合物這樣選擇,其互相化學相容并且在數量上適于目標分析。它們可以選自現有技術中典型使用的化合物。也可能使用一種通常用于執行白細胞鑒別的商業配方,也就是包含用于溶解紅細胞的化合物和白細胞保護化合物,并且為其加入生色復合體形式的用于穩定血紅蛋白的第三試劑化合物。由于這個單一的分析溶液,本發明具體地具有下面的優勢-自動分析設備可以包括一個單獨的槽用于準備分析溶液,-血紅蛋白測量可以直接在這個槽中進行,并且也可以通過分析溶液的々氐抗性測試進行白細胞的全計數;-有可能使用單-試劑,其混合了對血紅蛋白測量和通過光學裝置對白細胞鑒別所需的全部"試劑"化合物;這具體地允許簡化液壓回路,其將從下文中看出;-可以在單獨的稀釋液和分析槽中執行血樣的單-稀釋,稀釋率由所用的測量方法和檢測裝置確定。單-試劑可以用作用于執行這個單-稀釋的稀釋劑。優選地,選擇稀釋率為1/100th-l/500th之間,對應于血紅蛋白水平測試所需的稀釋率,也優選約1/175th的稀釋率(在下面給出的實施方式中為l/173th)。由于可能使用單-稀釋劑和單-試劑,由于本發明的第一方面,因此有可能大大簡化分析設備,同時仍然提供血樣的完整分析。根據本發明還提出了用于光學測試的裝置,其允許在高于i/iooth稀釋率時分析白細胞(通過亞-種群計數和鑒別),其在下文中限定和描述。在根據本發明的方法中使用的單-試劑允許通過分光光度測量法測量血樣的血紅蛋白濃度,以及通過光學裝置對白細胞鑒別。其也允許白細胞的抵抗性和/或光學計數。優選地,其這樣選擇以便能夠鑒別至少5種亞-種群。優選地,其選擇為不包含氰化物。根據本發明,用于溶解紅細胞的化合物優選由至少一種陽離子表面活性劑構成。在本身已知的在先方式中,選擇形成一種氧合血紅蛋白復合體(與包含氰根離子的氰化正鐵血紅蛋白相比它是無毒的)。因此陽離子表面活性劑選擇為使得還氧化釋放的血紅蛋白,以便僅形成氧合血紅蛋白復合體。因此陽離子表面活性劑的數量選擇為使得有效地使紅細胞溶解并且氧化被釋放的血紅蛋白。它優選選自-季銨鹽,優選烷基三曱銨鹽,更優選為十六基-、十二烷基、十四烷基和十六烷基三曱銨的溴化物和氯化物;-吡p定鹽;-長鏈乙氧化胺;以及-烷基硫酸鹽(SDS)。根據本發明的白細胞保護化合物是一種延遲或防止白細胞破壞的化合物。優選它是一種選自下面的非-離子或兩性表面活性劑-乙氧基化醇,具體是2-苯氧基醇、聚氧乙烯烷基苯基醚,例如商品IPEGAL990,TERGITOLNP9,TRITONX100或者XI14,plurafacA38或者Brij35);-季銨的甜菜堿和磺基甜菜堿,具體是丙基氨基月桂甜菜堿(LAB)、以及十二烷基二甲基-3-胺基-1-丙烷磺酸鹽(DDAPS)或者十四烷基二曱基-3-胺基-l-丙烷磺酸鹽(TDAPS);叔胺氧化物,例如N,N-二曱基十二烷醇野芝麻花堿-N-氧化物(LDAO)或者3-[(3丙基氨基膽汁)-二曱基氨基-]-l-丙烷磧酸鹽(CHAPS或者CHAPSO);-葡糖苷類型的化合物,更具體地為三萜皂苷;-糖類型的化合物(甘露醇、D-葡萄糖、海藻糖、葡聚糖硫酸鹽)。生色化合物形式的穩定血紅蛋白的化合物優選選自-單或多配位基的螯合物,具有配位子(非-結合對0,N,S和共-羧基COO-等),具體是'乙二胺四乙酸(EDTA)鹽或者乙烯乙二醇-二-(3-氨基乙醚)N-N,-四乙酸(EGTA)鹽,以及特別是它們的二鈉或二鉀鹽;草酸鉀&2(^0^(:2042-;.鞋胺鹽(優選氫化亞氯酸鹽);以及-有機酸(具體為蟻酸或者乙酸)。-芳族化合物(單或多配位基的螯合物),包括配位子(具有非-結合對0,N,S等),具體是Tiron-8-羥基喹啉及其衍生物;.吡啶或雙吡卩定以及它們的A't生物;-1,10-菲咯啉及其衍生物;酚類化合物(單或雙,以及它們的衍生物);-吡唑和/或吡唑啉酮以及它們的衍生物;咪峻及其衍生物;'磺基水楊酸;以及-皂角苷,叔胺氧化物,四元銨的甜菜堿和磺基甜菜堿(例如DDAPS,TDAPS,LAB)。除了根據本發明限定的三種化合物以外,有可能加入下列(多種)(單)-試劑-至少一種染劑(或混合物),具體標識某些白細胞,更具體為嗜酸性細胞(或嗜堿細胞),以便能夠區別至少5種主要的白細胞亞-種群,選自,花青素苦5-惡溱750;-Wdght和Romanowskyi式齊寸;.DAPI;-ClorazoleblackE;-甲苯胺藍;AstraBlue;蓬唑橙G.或藍i-其他的熒光劑。-至少一種能夠硬化白細胞細胞膜的固定劑,其優選是醛,更具體地為戊二醛或者曱醛;-至少一種濕潤劑,用于最優化流體并防止形成也能用作碎片增溶劑的氣泡,選自-乙醇(曱醇乙醇或者丙烷-2-醇或酚);.乙二醇(乙烯或者丙二醇);.乙氧基乙二醇(具體為TritonX100⑧或者Brij35⑧);'配糖化合物TWEEN80⑧或者TWEEN20;嚴格限制固定劑和增溶劑的濃度,因為一旦超出將阻止紅細胞的溶解并改變白細胞的光學特征;以及-一個緩沖系統,用于將pH值設定在5.0-10.0之間,優選在6.0-8.0.之間,并且最優地接近中性(7.0±0.4)。選擇這樣一個pH值的目的是遵守細胞的原始環境。此外,這個pH值允許根據本發明實施的組分的更好的溶解。所述緩沖劑由通過鹽酸或者蘇打(4-6N)調節至上述pH值的一對鹽(無機或者有機)構成,選自.磷酸二氫/磷酸氫鈉或者鉀H2PCV/HP042—;碳酸氬鈉/碳酸鈉NaHC03/Na2C03.檸檬酸/檸檬酸鈉(III)緩沖劑-TRIS-HCI.三乙醇胺(TEA).咪唑-選自下面的一種酸.有機酸苯二甲酸、磺基水楊酸或者蟻酸,其也用于血紅蛋白生色化合物的形成和穩定);以及.無機酸HCI,HsP04等。-一種基底鹽,確保抵抗性測試所需傳導率為10-50ms/cm,摩爾滲透壓濃度為120-500mOsm并優選接近等滲性(290±5mOsm),選自氯化鈉NaCl;.氯化鉀KC1;-氯化鎂MgCl2;.氯化鉤CaCl2;.硫酸鈉Na2S04;這個基底鹽能夠被包含在緩沖系統中;-至少一種防腐劑,具有抗氧化劑、和/或抗生素特性,選自-2-苯氧基乙醇;對羥苯甲酸;BHT;.異硫氮雜茂(isothiazolone)(Proclin150或者300);-咪唑或者尿素衍生物;.抗生素;-一種天然的抗生素細胞穿透化合物(離子載體),其也促進染劑或者多種染劑的穿透,選自.NH4+的離子載體I(nonatine);Ca2+的離子載體III(calcimycine);cr的離子載體;K+的離子載體I(valinomycine);本發明的組分在下面的表中概括給出,同時還給出了適當的濃度幅度。<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>本發明也提議一種用于執行根據本發明方法的設備,其特征為-一個分析槽,其能夠收容所述分析溶液;-一個在所述槽中通過分光光度測量法用于測量所述分析溶液中存在的血紅蛋白水平的裝置;-一個用于取樣所述分析溶液的裝置;-一個用于對所述樣品進行光學測量的裝置,以便進行白細胞分析。根據第二目的,本發明涉及一種用于血樣自動分析的自動設備的光學裝置,特別有優勢地,也用于執行根據本發明第一目的的方法。如上所迷,白細胞的某些亞-種群僅可以通過光學測量鑒別,例如細胞以一個或多個角度衍射的測量,或者細胞的吸收測量。血細胞的特征化光學系統具有一個共用的底座,在其中設置一個光源,發出光束;一個光學槽,在其中血細胞穿過光束;一個用于調節在細胞流的光束的系統;以及一些用于測量源自光學槽的被細胞阻擋之后的光的裝置。具體地,在白細胞特征化的情況中,白細胞在槽中以液流移動。它們在其中-皮聚焦在該液流上的光束照亮,該液流被稱作樣品流。這種裝置是昂貴的;具體地,激光器用作光源,它們體積較大并且通常需要散熱系統;作為激光器的激光二極管需要昂貴的對準系統。由這些光源發出的光束具有的光線橫截面分布近似為高斯形狀。因此,強度僅在射線的狹窄中央部分近似保持不變和達到最大。對準系統使這個中央部分對準樣品流。此外,樣品流的寬度不必須超過這個中央部分的寬度,并且這兩個寬度越接近,則對準系統必須同樣達到更高的精度。因此,必須盡可能地減小樣品流的寬度。光線越聚焦,包含需要計數和/或需要鑒別的血細胞的樣品流必須越窄。因此,使用橫截面寬度小于50fim的液流,其必須穿過光束,所述光束本身被聚焦成橫截面大于樣品流橫截面的光束。這需要特別精密和因此昂貴的系統,用于將該液流注射進入光學槽中。在現有技術中,使用液壓動力聚焦類型的系統(英文表達"hydrodynamicfocusing"的縮寫)獲得這種結果。樣品流被套管流環繞。用于樣品流的注射器浸沒在套管流的中心。因此產生的樣品流隨其從注射器運動到由光束照亮的區域被拉伸或者聚焦,因此在該點,其直徑具有期望的約為5-50jim的寬度。為了實現這個目的,有時需要一個單獨或者雙層的套管。此外,如前面所述的,根據所需的給定精度水平,一個調節系統對于使細胞流與光束重合來說是必需的??梢杂袃煞N方法可以移動細胞流或者光束。如果選擇移動血細胞流,所有的光學槽單元必須移動。當采用這個選擇時,槽安裝在一個平移臺上,由于其滾珠軸承而確保沿著兩個軸線的精確和均勻移動。這種精確機械組件非常昂貴。也可以移動光束以便使其與血細胞流重合。這通常使用多個可調節的透鏡實現。這個解決方法也要求較高的成本,其將光學元件與精密機構組合在一起。此外,當其越過光束時,血細胞偏轉光束軌跡。偏轉光線的強度和角度提供需要獲得的細胞類型信息。通常使用兩個角度范圍相對于光軸小于10度的小角,以及近似垂直于光軸的大角度。在小角的范圍中,兩個信息是有用的軸中的損失和衍射。垂直于光軸地,通常測得反射和熒光性。對于兩個角度范圍,光線因此必須分布在兩個不同的通道中。這一般地由分色鏡或者由干擾濾光片獲得。光學部件都通過將薄膜沉積在玻璃基質上產生。它們具有良好的功效,但在一個過濾器和另一個過濾器之間存在較大的不同,并且它們的使用壽命有限。它們因此必須定期更換。所有這些通常體積較大的裝置也是易碎的并且需要維護,這也非常昂貴。這種裝置因此限制于分析實驗室,它們足夠大以致能夠投資這種自動設備。本發明的目的在于提供一種用于白細胞鑒別和/或白細胞計數的裝置,其結構簡單并且制造和維護都更加經濟,能夠使用自動設備,即使是小型的實驗室也能夠裝備這種裝置,同時保持足夠的測量品質。根據本發明的第二目的,提供一種在自動血液分析儀中用于白細胞計數和/或鑒別的光學裝置,特征在于其包括電致發光二極管類型的光源,以便使用光源光束照亮在光學槽中沿注射軸循環的血樣。這種二極管能夠獲得在其橫截面寬度上更加均勻的光束,并因此獲得更大和更均勻的讀取區域。優選地,二極管發射波長小于600毫微米的光線,更優選地小于500毫微米。這種波長具有更好的衍射效率,因此對使用衍射的測量具有更好的精度。此外,由光學裝置發出的光束的寬度,也就是照亮樣品流的光束,有優勢地在50-200微米(pm)之間,接近注射軸,從而能夠照亮更寬的樣品流,同時對于進行的測量具有足夠的精度。仍然更有優勢地,其寬度在90-120微米之間。這種光束寬度具體通過使用電致發光二極管而被允許。優選地,光源光束近似地在槽的方向中發射,近似橫向于樣品流動的方向。設置一個透明玻片用于光束在其兩個相對表面之間穿過,其可旋轉安裝并設置在二極管和槽之間,當光線穿過玻片由于其兩次折射,能夠允許光束在橫向方向中移動。玻片的旋轉允許改變玻片上光束的入射角,并因此調節橫向位移的值。優選地,透明玻片繞一個大致平行于槽中血樣移動方向的軸線可旋轉地安裝。在光學槽之外,有優勢地使用Fresnel光損分離裝置,用于源自光源光束的入射生成光束,因此將所述光束分成一個軸向生成光束和至少一個由Fresnel光損產生同時穿過分離裝置的光束。分離裝置包括至少一個分離表面,其是一種透明分離材料的一個表面,軸向光束穿過透明材料,源自Fresnel光損的光束由分離表面反射,所述表面相對于槽外的光束傾斜。一個普通的便宜的玻璃片可以用作分離裝置。此外,其具有接近無限制的使用壽命,不用維護不像分色鏡或干擾濾光片。所述裝置也可以包括一個用于測量軸向-生成光束的光線的設備,以及至少一個用于測量至少一個源自Fresnel光損的光束的光線的其他設備。這些測量設備包括用于測量熒光性、靠近軸的光損和靠近軸的衍射。其也可以包括用于測量由槽中樣品衍射的大角度光束的裝置。例如,這些大角度可以是60。-150。之間的角度。裝置也可以在槽前面在光束路徑中包括至少一個用于寄生光線的停止隔膜。本發明還涉及一種血液學設備,具體地涉及一種裝備有這種裝置的自動血液分析4義。根據本發明的第三方面,本發明還涉及一種流過型光學槽,用于適于白細胞計數和鑒別的光學裝置,例如流式血細胞計數器,以及一種裝備有這種槽的分析設備。本發明的目的在于提供一種槽,其結構簡單并且生產和維護更加經濟,能夠被小型實驗室使用裝備有這種槽的自動設備,同時保持足夠的測量品質。根據本發明,用于在自動血液分析儀中適于白細胞計數和鑒別的光學裝置的流過型槽,特征在于在槽的分析區域中,槽的橫截面具有至少在1-5毫米之間的橫向尺寸。這個橫截面可以近似為矩形的,并且橫向尺寸可以在矩形的一側和/或另外一側上測量。這種槽因此可以,至少部分地,由注塑的塑料制成。與現有技術的槽相比,現有技術的槽一般由石英壁形成通過粘結組裝,本發明的槽以特別有優勢的方式生產。槽還可以包括至少一個與槽模制成一體的透鏡。這個至少一個的透鏡包括一個用于相對于光軸橫向設置的透鏡。其可以包括半球形透鏡。沿著光軸,槽可以包括一個用于引入光束的窗口和一個用于光束離開的窗口。至少一個窗口可以與槽4莫制成一體和/或被插入在透明材料中,例如石英或玻璃。槽有優勢地包括一個用于樣品流的注射器和用于繞注射液流形成套管流的裝置。注射器包括出口孔,其直徑在20-150微米之間,能夠獲得明顯大于現有技術液流的樣品流。與現有技術的裝置不同,不是套管流通過將其拉伸而限定樣品流的寬度,而是注射器出口的形狀和橫截面限定。因此套管流不扮演主動角色,而僅僅是被動角色,具體地,例如對于在一個較寬槽中樣品流的對中來說。根據第一實施方式,這個注射器可以由一種大致剛性的材料中形成一個整體件。這個材料例如可以是不銹鋼、陶乾、人造紅寶石或塑料或者這些材料中的多個。根據第二實施方式,這個注射器可以包括一個剛性結構管,例如由金屬制成,例如由不銹鋼制成,并且在結構管內部,一個塑料套裝管延伸出一個噴嘴,其與該塑料套裝管形成一個整體件。注射器的塑料可以是聚四氟乙烯,其使樣品在管中的流動更容易并且減少積垢的風險。本發明還涉及一種用于本發明槽的注射器,其注射器根據這些實施方式中的一個被生產。本發明還涉及一種血液學設備,具體地為自動血液分析儀,裝備有根據本發明的槽。根據第四目的,本發明還涉及一種用于血液分析設備的液壓裝置,其結構簡單并且生產和維護更經濟,并且其使小型實驗室能夠使用裝備有這種裝置的自動設備,同時保持足夠的測量質量。本發明還涉及一種適于這種裝置的分析方法。本發明因此提供一種用于血液分析設備的液壓裝置,血液分析設備具體地為自動設備,包括用于將樣品流加壓注射進入一個流過型光學槽并用于在樣品流周圍由套管液體產生液體套管流的裝置,特征在于其包括用于相對于套管流的流速調節樣品流流速的裝置。這種調節使其能夠保持槽中的均勻和近似無-湍流。注射裝置可以包括注射器、液壓回路和電磁閥。這些裝置可以包括用于相對于套管流將樣品加壓注射的裝置。這個裝置有優勢地包括一些用于構成活塞的裝置,該活塞用于與一種移位流體一起被注射的樣品。這種移位液體允許4義使用對分析而言足夠的少量樣品,注射所需的剩余液體為在分析設備中能夠獲得的液體,不像樣品那樣珍貴。當使用一個具有較寬橫截面的槽,同時維持樣品流的較小橫截面,套管特別有用。在相對套管流調節樣品流的裝置中,該裝置有優勢地包括用于相對套管液體流速調節移位液體的流速的裝置。調節裝置可以包括用于移位液體支路中壓降的裝置和/或用于套管液體支路中壓降的裝置。例如,壓降裝置可以選自已知長度的標準管、固定的流體阻力和變化的阻力。液壓裝置可以僅包括一個動力源,例如一個單獨的電機,以便同時產生樣品流和套管流。此外,其可以包括至少兩個注射器,用于產生樣品流和套管流,注射器活塞互相固定連接。因此它們具有共同的運動,并且樣品和套管流實際上同步。具體地,可以使用現有技術的液壓動力聚焦槽,其具有如前所述的本發明的回路,樣品注射進入這個槽可以相對于套管流沒有壓力地進行。根據本發明,還提出一種用于在流過型血細胞計數器中分析血樣的方法,特征在于血樣,可選擇地在壓力下,被注射進入血細胞計數器的流過型槽中,樣品在那形成樣品流,在樣品流周圍由套管液體產生一個液體套管流,特征在于樣品流的流速相對于套管流的流速調節。具體地,可將樣品引入液壓回路的注射支路中,并且在注射支路中在樣品上游引入一個移位液體,移位液體用作在將樣品注射進入槽的期間推動樣品。這個移位液體可以選自試劑和稀釋劑,優選試劑。為了進行分析或解析,提供除了對制備樣品所嚴格必須的液體之外的其他液體是沒有用的。還可能在槽中的樣品流周圍由套管流產生一個套管流。這個套管液體也可以選自試劑或稀釋劑,優選為稀釋劑。同樣在這種情況中,為了進行分析或解析,提供除了對制備樣品所嚴格必須的液體之外的其他液體是沒有用的。在使用液壓動力聚焦方法或者根據本發明第三目的槽的情況中,相對于套管液體的流速調節移位液體的流速是有優勢的,例如通過在移位液體支路中引入壓降和/或在套管液體支路中引入壓降裝置。在根據本發明的方法中,具體用于根據本發明第三目的的槽中,可以容易地實現血樣稀釋率至少為1/100&。實際上,在這樣的一個方法中,樣品可以相對于套管流加壓引入到槽中,速度大于現有技術方法的速度,并且對于槽中的樣品流具有更大的橫截面。因此,不用增加分析時間,對于白細胞鑒別和計數,可以使用這樣的稀釋率,其與常規使用的用于測量血紅蛋白的相等,具體地稀釋率在1/100氣1/500"之間,具體在1/160th-l/180化之間。本發明還涉及一種血液學設備,具體為一種自動血液分析設備,特征在于其包括根據本發明的液壓裝置。根據下面具體實施方式的說明,該說明具體參照附圖,本發明將被更好地理解并且其它優勢也將變得明顯,其中圖1示意性圖示了一個根據本發明第一目的的設備的實施例;圖2a-2e是根據本發明的方法通過分光光度測定法對血紅蛋白測定的線性測試圖表;圖2f-2i是相應的細胞圖3是自動設備的示意圖,其用于根據本發明的第四目的使用液壓裝置分析血樣;圖4是根據本發明第二目的的光學裝置單元的示意性縱視圖5是圖4光學裝置更詳細的示意性縱視圖,其垂直于圖4的平面;圖6根據本發明第三目的的光學槽的透視圖7是用于根據本發明的光學槽的注射器第一實施方式的縱向剖面圖8是用于根據本發明的光學槽的注射器第二實施方式的縱向剖面圖9是圖8注射器一端的縱向剖面圖10是槽的縱向剖面圖,其圖解了現有技術用于將血樣注射入槽中的方法;以及圖lla-llc是圖表,分別圖示了由使用本發明方法的自動設備獲得的結果,以及使用由根據本發明的光學裝置和槽獲得的結果。具體實施例方式圖1示意性示出了一個唯一的稀釋和分析槽1,其能提供需要分析的血樣2、稀釋劑3和試劑4,共同形成分析溶液。該槽1裝備有用于通過光度測定法測量在所述分析溶液中血紅蛋白水平的裝置5,以及用于測量所述分析溶液抵抗性以便計算白細胞總數的裝置6。還提供一些用于從分析槽1中取出一部分分析溶液的裝置和用于將其注射入光學槽7中的裝置,所述光學槽7裝備有光學測量裝置8(例如流動血細胞計數器)用于分析白細胞。根據所選的實施例,還提供用于取出一部分由血液和稀釋劑組成的樣品預溶液并將其注入計數和稀釋槽9中的裝置,所述計數和稀釋槽9裝備有用于測量所述部分溶液抵抗性的裝置10,以便計數紅細胞和血小板。該設備通常裝備有加熱裝置,以便獲得約35。C的恒溫控制溫度。這個溫度允許溶解反應時間和最優的紅血球溶解質量。該設備以下面的方式操作-將一等分血液(15.6ul)注入分析槽1中并用2ml的稀釋劑稀釋以便形成分析預溶液;稀釋率為1/130th;-從這個分析預溶液中取出非常少量的一部分(約20ul),并將其沉積在槽9中用于計數紅血球和血小板;-然后在分析槽1中為剩余的預溶液加入0.7ml的試劑;溶解持續約10秒(以便破壞紅血球,形成并且使氧合血紅蛋白復合體穩定),因此形成的分析溶液最終的稀釋率約為l/173fd;取出一部分所述分析溶液并注入光學槽7中,在那可以進行白細胞的分析(通過亞群對白細胞計數和/或鑒別);同時在分析槽1中,白細胞通過抵抗性測量被計數,并且血紅蛋白通過對形成的氧合血紅蛋白復合體的波長的吸收而測量。在下面描述了本發明的光學裝置,其特別適用于對稀釋率低于1/100th的分析溶液的白細胞分析,更具體地適用于1/160&和1/180th之間的稀釋。通常,1/160th的稀釋率被認為低于l/100th。當然上面描迷的方法和設備的變化實施方式都是可能的-對于設備可以提供用于分別引入溶解化合物、白細胞保護化合物和穩定在分析槽1中由血紅蛋白形成復合體的化合物的裝置,并因此更多地以單-試劑的形式引入;用于測量分析溶液抵抗性的裝置6是可選擇的;白細胞總數能夠通過分析溶液的光學分析獲得;類似地,計數槽9和用于測量這個槽中抵抗性的裝置10僅在需要血樣完全分析的情況下才提供;-同樣地對于該方法反應化合物可以單獨引入或者全部代替單-試劑,引入可以同時或者連續進行;計數紅細胞和血小板的前一步驟以及白細胞總計的步驟可以被省略;此外,可以執行血樣的兩次連續稀釋;第一次稀釋,其特別適用于白細胞鑒別(稀釋至約1/80th),在公知的標準液壓動力聚焦類型血細胞計數器中進行,白細胞鑒別所需的部分從其中取出,然后在第二階段適用于血紅蛋白(在1/100th和l/500th之間)測量的第二次稀釋可以通過已知的分光計進行。根據另一種變化形式,槽1可以用于在第二階段在清潔之后執行計數紅細胞和血小板,所述清潔通過由保持在注射器針頭中的樣品填充該槽而進行?,F在將通過根據本發明的(單)-試劑的具體實施例描述荻得的結果使用ABX/^司的Eosinofix⑧處方設計單試劑用于測量流式細胞光度計中的白細胞,并且為此目的包含用于分析紅細胞的化合物和白細胞保護化合物(比較ABX公司的專利EP0430750)。根據本發明,加入穩定血紅蛋白的化合物。通過分光光度測定法測定血紅蛋白使用分光光度計在542nm進行線性測試。在圖2a-2e中顯示了圖標。它們表示與期望濃度相關的測得的血紅蛋白濃度。更具體地-圖2a對應于用于通過分光光度測定法測定血紅蛋白的參照溶解(ORPHEE/>司出售的LMG);畫圖2b、2c和2d對應于根據第4實施方式的單-試劑,其具有作為血紅蛋白復合體的安定劑,分別為試鈦靈(Tiron)、DDAPS和異吡唑;以及-圖2e對應于單獨使用單-試劑Eosinofix⑧執行本發明的方法,也就是不含根據本發明的血紅蛋白復合體穩定劑。對于根據本發明執行的三個測試,由1±10—4的相關系數W對于每一個測試可以獲得一個陽性的線性測試(在附圖中示出)。通過對比,如圖2e中所示,具有試劑(Eosinofix)沒有血紅蛋白安定劑,不能獲得線性關系。這意味著這個試劑不能單獨用于測試血紅蛋白水平。通過流式細胞光度計進行白細胞恭別圖2f-2i是使用BDFACScan⑧流式細胞光度計獲得的細胞圖,分別對應于單獨4吏用Eosinofix和為Eosinofix加入DDAPS、試4太靈(Tiron)和異吡唑。在這些附圖中,可以看出能真正地獲得亞群的鑒別,并且其以與白細胞鑒別標準試劑(在圖2f中由Eosinofix獲得的基體)相當的方式獲得。也可以參照圖llb的細胞圖(其在下文描述),其具體地由根據本發明的血細胞計數器荻得?,F在將描述根據本發明第四目的的液壓裝置。圖3部分地表示了液壓回路100的示意圖以及自動血液分析儀20的一部分設備,由這些可以理解根據本發明的液壓裝置。在圖3中示出的自動設備具體包括用于將待分析血液取樣在管中的針IOI,所述管用于存儲并運輸到自動設備中。取出的血液由針以血樣的形式被注入槽102中。槽102具體被設計用于血樣紅細胞的稀釋和/或溶解。在稀釋之前或之后,可以取出血樣的全部或部分以便在自動設備的另外部分中進行分析,例如在裝置120中,其將在下文中描述。用于分析血紅蛋白的裝置110(例如分光光度計)靠近槽102設置。用于稀釋產品的存儲器103和用于試劑的存儲器104通過液壓回路100被連接到槽102,所述試劑具體為溶解試劑。另一個分析裝置120更明確地用于,例如在從槽102取出的樣品的全部或部分上白細胞的計數和鑒別。在下文中樣品也指這個全部或部分。用于分析白細胞的裝置120具體地包括光學裝置200和光學槽300。光學槽通過液壓回路100連接到槽102。一套注射器允許液體在液壓回路中流動。在這些注射器中,表示出了用于稀釋的注射器105和用于試劑的注射器106,因此本發明可以被很好地理解。其它的注射器沒有示出,因為它們對于理解本發明不是必需的,加上這些其它的注射器可以完整構成該裝置。除了用于液體循環的管路以外,液壓回路包括用于在液壓回路100中根據其用途在特定的分析時刻轉換不同回路的電磁閥。在圖3中示出了液壓回路100的8個電磁閥111-119。每個電磁閥包括兩個狀態,其分別用字母A或B標出。如將在下面描述的,液壓回路的設計允許對于示出的注射器使用唯一的動力源M。同樣的動力源也可以用于其它的注射器。因此,注射器105、106的活塞被牢固地互相連接。因此它們的運動同步,即當它們被推入各自注射器的注射器中時的推動P,還是當它們被抽出時的拉出T?,F在將描述設置以及自動設備的液壓操作。在主體301內部槽300包括外部主體301和注射器302在主體和注射器之間形成一個套管空間303。液壓回路100包括-注射支路131,其在注射器的上游延伸,位于注射器和閥111之間;-樣品支路132,其在樣品支流點142處連接到照射支路并且延伸到槽102;-抽吸支路133,其在抽吸支流點143處通過閥113連接到注射支路,位于樣品支流點142的上游,并且延伸到真空源107,例如注射器或蠕動泵;-排出支路134,其在排出支流點144處連接到注射支路,位于抽吸支流點143的上游,并且延伸到試劑產品存儲器104;-套管支路135,其在主體301的上游延伸并且連接套管空間和閥115;-稀釋支路136,其在閥116和通過閥115稀釋劑的使用108之間延伸;-稀釋支路137,其在稀釋劑存儲器103和閥H6之間延伸;-試劑支路140,其在試劑存儲器104和閥117之間延伸;-反應支路141,其在閥117和通過閥lll試劑的使用109之間延伸;-用于槽102的導流支路138,其在槽102和通過閥118的真空源107之間延伸,樣品支路132在槽102和閥118之間與導流支路連接,并且抽吸支路在閥118之外相對槽被連接到出口支路132;以及-出口支路139,其通過閥119將槽30的下游連接到廢物槽,例如在大氣壓力下或者通過抽吸源、注射器或蠕動泵。在分116的第一位置116A中,稀釋注射器105與稀釋劑存儲器聯通,因此拉出運動T使注射器105充滿稀釋劑。在第一情況中稀釋注射器包含稀釋劑,閥116處于其第二位置116B,其將注射器105連接到稀釋支路136,并且閥115處于其第一位置,其將稀釋支路連接到稀釋劑的使用108,推動P使稀釋劑移動到這個使用108,例如在槽102中,例如用于全部樣品的稀釋。在第二情況中,閥116處于其第二位置116B,閥115處于其第二位置115B,其將稀釋支路連接到套管支路135,推動P使稀釋劑運動到光學槽300中,以便在那兒形成套管流。在本發明中這個套管流的益處將在下面槽300的說明中分析。閥117處于第一位置117A中,其將試劑注射器連接到試劑存儲器104,并且閥114處于第一位置114A中,其關閉排出支路134,牽拉運動T使試劑注射器106填滿試劑。在第一種情況中,試劑注射器包含試劑,閥117處于其第二位置117B中,其將試劑注射器104連接到反應支路141,閥lll處于第一位置111A,其將反應支路連接到試劑的使用109,推動P使試劑運動到這個使用109,例如在槽102中,例如用于整個樣品的溶解。在第二種情況中,閥117處于其第二位置117B中,并且閥ni處于其第二位置111B中,其將反應支路141連接到注射支路131,試劑注射器106直接連接到注射器302。閥118處于第一位置118A,其通過引流支路將抽吸支路133與樣品支路132隔離開,岡112處于第一位置112A,其將樣品支流132的上游部分連接到下游部分,閥113處于第一位置113A,其將抽吸支路133的下游部分連接到上游部分,因此連接到真空源107,需要分析的樣品被吸入注射支路131中,在樣品支流點142和抽吸支流點143之間。排出支路134包括可變或者標準化的流體阻力150。當稀釋注射器105包含稀釋劑時,試劑注射器106包含試劑,并且需要分析的血樣處于注射支路131中;并且當閥112、113處于它們的第二位置112B、113B中時,它們將與支路的上游部分和下游部分隔離開;并且當閥H5、116處于它們的第二位置115B、116B中時,它們將稀釋注射器105連接到套管空間303;當最終閥111、117處于它們的第二位置111B、117B中時,它們將試劑注射器106連接到注射器302,并且閥114處于其第二位置U4B中;由一個唯一的動力源M產生的一個唯一的推動P在槽300的方向中推動稀釋劑、試劑和血樣并穿過槽300,同時根據流體阻力150部分試劑回到試劑存儲器104中。阻力150具體地允許調節套管流體和移位流體的相對流速。這允許使這些流速能夠適應這些液體的不同功能。具體地,當使用標準液壓動力聚焦槽時,這允許對于套管和在分析區域304中的樣品來說具有相同的流速。具體地,排出支路134和在前面描述的設置使其可能使用一個唯一的動力源,并因此具體地降低自動分析設備的成本,及其體積。在槽300的分析區域304中,稀釋劑形成一個用于樣品的套管流(具體參見圖4和5)。位于注射支路131中的樣品上游的試劑用作移位液體,也就是其允許試劑注射器的活塞運動被傳遞到樣品。因此,在將試劑注射器填滿樣品以便能夠對其進行分析的過程中不存在尖端點。因而,即使是少量的樣品也可以分析,并且所有的樣品可以被注射和分析而不會有部分樣品殘留在注射支流131中或殘留在注射器106中。當然,沒有在圖3中示出的其它注射器、閥和支路可以使液壓回路100完整,以便用于使自動分析設備20能夠完整和良好地操作。現在將描述根據本發明的光學裝置200,具體參考圖4和5。光學裝置包括一個近似單色的光源201。這個光源是一個電致發光二極管。光線主要沿著光軸X200發出。光軸X200近似垂直于光學槽300中樣品運動的注射軸X300設置。兩個軸X200和X300共同限定一個光學平面。為了防止由光源201產生的光束311受寄生光線污染,在光束路徑上設置一組三個的光闌,其每一個垂直于光束。光闌202穿有直徑近似等于光束的孔,并且每個光闌中孔的直徑逐步增加以便使其適應測量光束的直徑,測量光束的直徑隨著遠離光源201變大。光束然后穿過由一個或多個透鏡構成的聚焦裝置203。在聚焦裝置之外,光束遇到調節裝置,其允許光軸在一個垂直于注射軸X300的平面中移動,也就是在相對于槽中樣品運動的橫向方向中。光束的橫向移動可以導致樣品部分照射或者無照射,這將對分析結果造成直接影響。在所描述的實施例中,調節裝置由一個繞軸X220可旋轉安裝的透明玻片220構成。軸221近似平行于注射軸X300。如果玻片垂直于軸X200設置,光束穿過它而不會被折射。相反,如果玻片與光軸形成一定的角度,在玻片入射和出射處的雙折射使光束在垂直于調節軸X220的平面中移位。調節軸X220近似平行于注射軸X300,在玻片中通過折射僅產生一個橫向位移。玻片的厚度和/或折射率越大并且玻片相對于光軸越傾斜,位移越大。因此對于一個具有選定厚度和折射率的玻片,為了調節光束相對于在光學槽300的分析區域304中移動的樣品的位置,將玻片220繞其軸X220旋轉是足夠的。與現有技術的裝置相比這樣的一種調節裝置特別經濟,特別是因為精確的旋轉通常比使用高-精度機構的精確平移更易于執行。在透過槽并穿過樣品之后,光束至少部分地成為軸向-生成光束212,其近似沿光軸離開槽。軸向-生成光束212帶有關于其穿過的樣品的信息。為了能夠同時測量多個這些信息,其必須能夠由多個測量設備222、223分析光束。具體地,光學分析依賴于沿兩個角度的折射光束的測量小角和大角。因此需要將光線分布在兩個用于每個范圍的不同的通道中。因此使用將生成光束212分成兩個生成光束213、214的裝置205。分離裝置主要由光束分離器205構成。這個光束分離器是一個透明的玻璃玻片。其與光軸成45度設置。因此產生第二軸向-生成光束213,其由穿過光束分離器的光線形成,以及由菲涅耳光損(Fresnellosses)形成的光損所產生的光束214,也就是由光束分離器反射的光線。這種光束分離器相比現有技術中在這種類型光學分析裝置中所用的分離設備具有非常低的成本。具體地,因為其不包含任何而外的反射涂層,其實際上耐老化并幾乎不需要維護。在給定的玻片內多次反射以及軸向-生成光束入射輻射的偏振,約5-15%的能量被反射,剩余的傳遞到第二軸向-生成光束中。在槽和光束分離器之間,軸向-生成光束212通過適當的裝置206變平行。在光束分離器之外,生成光束213、214通過各自適當的裝置207、208被再次聚焦,用于通過各自的測量設備222、223對它們進行分析。在所描述的實施例中,分析第二軸向-生成光束213的測量設備222是用以測量靠近光軸由血細胞產生衍射(稱為FSC測量)的設備。在所描述的實施例中,分析由涅耳光損214所產生光束的設備是用于測量軸線中光線損耗(稱為ALL測量)的設備,也就是光線被樣品中的細胞遮擋。圖5示意性表示了槽在一個垂直于注射軸X300并包含光學軸XMO的平面中的一部分。如在這個圖中特別示出的,由側向-生成流315中的樣品從側部重發射的光線也被分析,其被聚焦在槽外的測量設備224中。現在將描述根據本發明的光學槽,具體展望使用例如在先描述的液壓回路,具體參考圖6。該槽的操作可以與現有技術的液壓動力聚焦-類型操作比較,其在圖10中非常示意性地示出。圖10的槽350包括主體351、注射器302和分析區354。槽的內部橫向尺寸D354約為250微米。如果槽為圓形橫截面,這個尺寸可以是直徑,或者如果槽為方形或矩形橫截面,這個尺寸是邊長。如由虛線示出的,使用套管流362來具體減小樣品流361的直徑,因此在現有技術中,在分析區域354中,樣品流的直徑D361小于50微米。根據本發明的槽300,在圖4-6中示出,包括主體301和注射器302,沿著注射軸X300近似同軸地設置。分析區304設置在注射器的下游。主體由注塑材料制成,優選由塑料制成。這種生產方法能夠獲得復雜的形狀。具體地,在主體中模制一個透鏡305。這個透鏡能夠收集被血細胞遮擋、折射或散射的光線。這個透鏡必須具有一些尺寸,尤其是一足夠的直徑,使得相對這些尺寸注射原料中的可能的局部不均勻性可被忽略。在示出的實施例中,透鏡305直徑約為3毫米。這個注塑透鏡是一個側面透鏡305,其側面被生成的光束315穿過。此外,側面透鏡必須允許光線能夠在盡可能多的方向中收集,也就是具有盡可能大的方向范圍。因而,透鏡越靠近樣品,方向范圍越大。在示出的實施例中,透鏡是一個稱為90。的半球形透鏡透鏡。此外,透鏡是槽壁的一部分,其與槽中的液體直接接觸,也就是在樣品和透鏡之間不存在空氣間隙,具有較低的折射率。這改善了測量。為了克服均勻性不完善的缺陷,在光線具體聚焦的位置使用玻璃,例如BK7類型的玻璃。這種情況特別用于軸向窗口306,在那光源光束211透入槽并且在那軸向-生成光束212離開槽。為了能夠產生產生具有這種尺寸的注塑透鏡,在分析區域中,槽300必須具有至少類似的尺寸。此外,這些較大的尺寸使玻璃窗能夠被整合到塑料壁中,而具有較小尺寸的現有技術的槽由全部是玻璃或石英的壁組成。在特別是圖5和6中示出的實施例中,槽的下部沿著光軸為4.5毫米,在垂直方向中為3毫米。這個具有較大尺寸的矩形部分與少量的樣品相關,其傳輸需要分析的血細胞,需要使用血樣的流體動力套管。通過比較,現有技術的槽具有分析區域內部橫向尺寸D354,接近250微米。在分析區域304的上游,槽的主體301環繞注射器302并且繞注射器形成套管空間303。在注射器內部,注射器的壁在套管空間中從套管流312分離出一個由樣品形成的液流311。樣品流發源于液壓回路的套管支路135。在分析區域中,兩股液流接觸,保持同心并且同時流入槽中。為了降低自動設備的生產成本,降低生產部件的精度是有優勢的。如上面提到的,這種目的可以通過產生具有更大橫截面的樣品流實現。然而,如果使用樣品流被套管流拉長的現有技術,具有較大橫截面的樣品流將成為湍流,其特別危害測量的精度。此外,樣品流的橫截面將被逐步減小,這與所期望的效果相反,期望獲得具有較大橫截面的樣品流。這個目的通過使用根據本發明的液壓回路100實現,其在前面參照圖1說明。這種回路使其可能為套管流和樣品流獨立選擇流速,以便在樣品流中出現較少的湍流并且這個湍流不會對分析結果產生顯著的影響。兩股液流每一個可以是近似均勻的,作為選擇在某些適當流速的范圍中分層。此外,如圖7或圖8中圖示的注射器302也能夠限制樣品流中的湍流。此外,其允許樣品以較高的注射速度進入光學槽中,同時保持其流動近似均勻。如圖7中示出的注射器302包括一個結構管320,例如由不銹鋼制成保證注射器的剛性。結構管在內側套裝一個由塑料制成的管321,塑料例如聚四氟乙烯(PTFE)。在示出的實施例中,結構管和套裝管為圓柱形的。在結構管的下游,套裝管延伸一個由塑料制成的噴嘴。結合使用的塑料區分結構管的結構功能和噴嘴的注射功能的事實允許以較低的成本獲得足夠精確的形狀。噴嘴具有這樣的橫截面,其從套裝管的內徑D321開始到噴嘴322下游端324處出口孔323的內徑D323逐步變窄。在所述的實施例中,下游端324為圓柱形,長度為L324。噴嘴的壁首先向內凹入,然后彎曲成為向內凸起,噴嘴的橫截面因此從上游到下游,從直徑D^1到直徑D324逐步變窄。凹入面正切于圓柱形套裝管的內表面。凸起面正切于圓柱形端324的內表面。在所述的實施例中,孔323的直徑D323約為60微米,套裝管的內徑D321約為1毫米,噴嘴的長度L322約為2.5毫米,結構管的長度L320約為6毫米,并且圓柱形端的長度L324約為200微米。注射器302,例如在圖8和9中示出的,為一單一構件并且由單一基本剛性的材料制成。這個材料例如可以是不銹鋼、陶瓷、人造紅寶石或塑料。塑料有優勢地可以為聚四氟乙烯。注射器包括一個近似圓柱形的管331,其下游延伸一個噴嘴332。噴嘴逐步向內變窄,從管331的內徑D331到樣品出口孔333的內徑D333,該出口孔在噴嘴332的下游端334處。在示出的實施例中,變窄根據一個優選9-10度的截頭的錐形打開進行。在該截頭的錐形以外并且直到出口孔333,圓柱形部件335中的直徑保持不變,長度為L335直徑為D333。在噴嘴的外部,其外徑根據一個約為8-9度的截頭錐形打開逐步變大,然后,在非常明顯的更加變小的端部中根據約為35-45度的角度A334形成截頭的錐形打開,直到出口孔333的外徑D334。D334比D333大約3-4孑咅。例如D333=60|um,D334-200并且A334=40。。由于前述的不同設置,有可能獲得較高的注射速度。因此,在所述的實施例中,有可能在不到10秒內注射超過200微升的樣品。具體地,這種注射速度使其有可能使用高稀釋率的血樣,于現有技術的自動設備相比而不必提高分析的持續時間。具體地,相同的稀釋,例如l/160th,可以通過裝置IIO(參見圖3)用于分析血紅蛋白并且通過光學裝置120用于分析白細胞,而不必是用于分析白細胞通常所用的l/80th。圖lla-c圖示了使用根據本發明第一目的的方法和設備獲得的結果,所述設備使用根據本發明第三目的的光學槽7和根據本發明第二目的的光學裝置8。圖lla顯示了血紅蛋白測量的相對線性測試,并因此顯出了根據本發明對血樣血紅蛋白水平的可能的可靠測試。圖llb顯示了從測試血樣獲得的光學細胞圖,并加入了4艮據本發明的30%的嗜酸性細胞。在這個細胞圖上,出現了五個亞-種群并且區分表示(根據細胞區分種群E代表嗜酸性細胞,N代表中性白細胞,M代表單核細胞,B代表嗜堿細胞,L代表淋巴細胞)。圖llc顯示了通過白細胞水平抵抗性進行的相對線性測試。這些附圖顯示了由本發明,通過使用根據本發明的配方,特別是單-試劑形式的配方執行至少血紅蛋白水平和白細胞水平的分析以及白細胞的鑒別。當然,本發明不局限于所述的實施例,并且能對這些實施例應用許多'的改變而不會超出本發明的范圍。例如,可以使用不同于稀釋劑或試劑的產品,以1更分別形成套管流和流體活塞,特別是如果它們能夠在用于其他用途的自動設備中獲得。另外,除了僅設置在注射回路上以外,可以在套管回路或者在這兩者上同時設置流體阻力。借助于分別用于移動或套管的液體的移動裝置,由于給定最大流速的作用,這個可以發生。光學槽的透鏡和/或光學裝置的透鏡的多個或全部因此可以隨著槽主體一起通過注塑產生,而不是如前面所述的單一的部件。具體地,可以注塑出玻璃窗。特別是如果相對于測量所需的精度,注塑材料中的不均勻性大致可忽略??梢曰ハ嗒毩⒌厥褂们懊嫠龅恼{節裝置和/或分離裝置,并且可選擇的與不同于場致發光二極管的其他光源一起使用。權利要求1.一種用于血樣自動分析的方法,其中-在一個唯一的稀釋和分析槽中形成一種分析溶液,該分析溶液包含所述血樣、稀釋劑,和-至少一種溶解紅細胞的化合物;-至少一種生色復合體形式的穩定血紅蛋白的化合物,-在所述槽中在溶解紅細胞之后,在這個分析溶液上通過分光光度測定法測得血紅蛋白水平;以及-從所述槽取出適量的所述分析溶液,通過光學裝置在所述適量分析溶液上執行白細胞鑒別,其特征在于分析溶液還包含至少一種保護白細胞的化合物,能夠鑒別出至少四種主要的白細胞亞-種群。2.如權利要求l所述的方法,其特征在于分析溶液包含至少一種穩定氧合血紅蛋白形式的血紅蛋白的化合物。_3.如權利要求1或2中一項所述的方法,其特征在于還向分析溶液加入一種染劑或染劑混合物,用以標識至少一種白細胞亞-種群。4.如權利要求1-3中一項所述的方法,其特征在于所述化合物是化學相容的,加入它們以便形成單-試劑形式的分析溶液。5.如權利要求1-4中一項所述的方法,其特征在于單-試劑適于執行稀釋的功能,以便產生血樣的單-稀釋液。6.如權利要求1-5中一項所述的方法,其特征在于分析溶液的血樣稀釋率適于通過分光光度測量法測量血紅蛋白。7.如權利要求6所述的方法,其特征在于分析溶液的稀釋率在1/100吣l/50()th之間,并優選在1/16。th-l脂th之間。8.如前述任一項權利要求所述的方法,其特征在于在所述槽中所述測量溶液的白細胞數目通過抵抗性被計數。9.如前述任一項權利要求所述的方法,其特征在于在所述槽中所述測量溶液的白細胞數目使用光學裝置計數。10.如權利要求1所述的方法,其特征在于在所述槽中測量血紅蛋白之前取樣適量的分析溶液,以便執行白細胞鑒別,被取樣的測量溶液的稀釋率適合于通過所述光學裝置的所述測量,并且給所述剩余的分析溶液加入稀釋劑,以便提高在所述槽中的稀釋率,以便獲得適合通過分光光度測量法測量血紅蛋白的稀釋率。11.如權利要求IO所述的方法,其特征在于光學裝置是液壓動力-類型的流式血細胞計數器,并且用于血細胞計數的取樣分析溶液的稀釋率小于l/100th。12.如權利要求IO所述的方法,其特征在于光學裝置是具有被動套管的血細胞計數器,并且用于通過血細胞計數測量的取樣溶液的稀釋率小于l/100th。13.如權利要求10或11所述的方法,其特征在于用于通過分光光度測量法測量血紅蛋白的測量溶液的稀釋率在1/100th-l/50()th之間。14.如前迷任一項^又利要求所迷的方法,其特征在于在加入所述化合物之前的步驟中,取出一小部分預-溶液,其由血樣和稀釋劑構成,在該預溶液上通過抵抗性進行白細胞和/或血小板計數。15.如前述任一項權利要求所述的方法,其特征在于溶解化合物是一種陽離子表面活性劑,其選自-季銨鹽,優選烷基三曱銨鹽,更優選為十六基-、十二烷基-、十四烷基-和十六烷基三曱銨的溴化物和氯化物;-吡咬鹽;-長鏈乙氧化胺;以及-烷基硫酸鹽(SDS)。16.如前述任一項權利要求所述的方法,其特征在于生色復合體形式的穩定血紅蛋白的化合物優選選自-單或多配位基的螯合物,其具有配位子(非-結合對O,N,S和共-羧基COO-等),-芳族化合物(單或多配位基的螯合物),包括配位子(具有非-結合對0,N,S等),以及-皂角苷,叔胺氧化物,四元銨的甜菜堿和磺基甜菜堿。17.如前述任一項權利要求所述的方法,其特征在于白細胞保護化合物是一種非-離子或兩性表面活性劑,優選選自乙氧基化醇、季銨的甜菜堿和磺基甜菜堿、叔胺氧化物、葡糖苷類型的化合物以及糖類型的化合物。18.如前速任一項權利要求所速的方法,其特征在于白細胞的膈膜固定劑也#1加入分析溶液。19.如前述任一項權利要求所述的方法,其特征在于一種pH值緩沖劑也被加入分析溶液中,其能夠將分析溶液的pH值設置在5.0-8.0之間,優選將pH值設置為7。20.如前述任一項權利要求所述的方法,其特征在于一種基底鹽也被加入分析溶液中以確保其傳導性。21.用于執行根據權利要求1-20中一項所述方法的血液分析設備,其特征在于_一個唯一的分析槽(1),適于收容所述分析溶液;-一個在所述槽中通過分光光度測量法測量所述分析溶液中血紅蛋白水平的裝置(5);-一個用于取樣所述分析溶液的裝置;以及-一個用于在所述樣品上光學測量的裝置(7,8),以便進行白細胞分析。22.如權利要求21所述的設備,其特征在于包括一種用于在所述槽(1)中通過抵抗性計數白細胞的裝置(6)。23.如權利要求21或22所述的設備,其特征在于包括一些用于執行紅細胞和血小板計數的裝置(9,10)。24.如權利要求21-23中任一項所述的設備,其特征在于包括一種用于紅細胞和血小板的計數槽(9)以及一些用于在所迷計數槽中測量抵抗性的裝置(10)。全文摘要本發明涉及一種用于分析血樣的方法,包括以下步驟在一個單獨的稱作稀釋和分析的容器中形成一種分析溶液,其包含所述血樣、稀釋劑和至少一種用于溶解紅細胞的化合物,至少一種生色復合體形式的用于穩定血紅蛋白的化合物;在所述容器中在紅細胞溶解之后對所述分析溶液通過分光光度測量法測量血紅蛋白水平;并且引出所述容器中的適量所述分析溶液,對其通過光學裝置執行白細胞鑒別。本發明特征在于分析溶液進一步包含至少一種化合物,以保護白細胞,以便能夠鑒別出至少四種主要的白細胞亞種群。本發明還涉及一種用于執行所述方法的血液學設備。文檔編號G01N33/72GK101185001SQ200680019048公開日2008年5月21日申請日期2006年3月22日優先權日2005年3月31日發明者H·錢普賽克斯,J·吉勞德申請人:C2診斷公司