国产自产21区,亚洲97,免费毛片网,国产啪视频,青青青国产在线观看,国产毛片一区二区三区精品

一種測定中藥材中二氧化硫殘留量的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種測定中藥材中二氧化硫殘留量的方法，它包括如下操作步驟：（1）取待測中藥材，制備供試品溶液；（2）取亞硫酸鹽為對照品，制備對照品溶液；（3）分別取供試品溶液、對照品溶液，在緩沖液中，加入鄰苯二甲醛溶液和銨鹽溶液反應，待反應結束后，終止反應后，靜置，再采用熒光衍生法測定中藥材中二氧化硫殘留量。本發(fā)明對中藥二氧化硫殘留量的測定方法，能夠準確、快速測定中藥材中二氧化硫的殘留量，與藥典方法準確度相當，但反應方法更為簡便，實用性更好。
【專利說明】一種測定中藥材中二氧化硫殘留量的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種測定中藥材中二氧化硫殘留量的方法。
【背景技術】
[0002]硫磺是一種古老的用于中藥防蟲的藥物，不少中藥材產(chǎn)地加工時都會硫熏，利用硫磺加熱產(chǎn)生的二氧化硫達到漂白藥材及殺菌防霉防蟲的目的，由于硫磺熏蒸后中藥材的性狀及化學成分多有改變，且熏蒸后的中藥材中殘留的二氧化硫對人體有很大傷害，《中國藥典》2005年版取消了藥材的“硫磺熏蒸養(yǎng)護法”，并在《中國藥典》2010年版附錄中增加了基于蒸餾法的二氧化硫殘留量測定法，由于該法要求專門的全玻璃蒸餾儀器，推廣很慢，其他測定中藥二氧化硫殘留量的方法尚有鹽酸副玫瑰苯胺法、高效液相色譜法、氣相色譜法和離子色譜法等，但鹽酸副玫瑰苯胺法操作過程中需使用有毒的四氯汞鈉溶液，幾種色譜法需要相應的設備及填充柱等，檢測成本較高。
[0003]目前還未見將熒光衍生法用于中藥材二氧化硫殘留量的測定。

【發(fā)明內容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種測定中藥材中二氧化硫殘留量的方法。
[0005]本發(fā)明提供了一種測定中藥材中二氧化硫殘留量的方法，它包括如下操作步驟:
[0006](I)取待測中藥材，制備供試品溶液；
[0007]( 2)取亞硫酸鹽為對照品，制備對照品溶液；
[0008](3)分別取供試品溶液、對照品溶液，在緩沖液中，加入鄰苯二甲醛溶液和銨鹽溶液反應，待反應結束后，終止反應后，靜置，再采用熒光衍生法測定中藥材中二氧化硫殘留量。
[0009]其中，步驟(1)中，供試品溶液的制備方法如下:
[0010]取待測中藥材，粉碎后，加入無機堿溶液，提取，濾過，取濾液，稀釋，即得。
[0011]進一步地，供試品溶液的制備方法如下:
[0012]取待測中藥材，粉碎成細粉，加入中藥材20~50倍v/w量的氫氧化鈉溶液，振蕩提取，濾過，取濾液稀釋20~30倍，即得。
[0013]更進一步地，步驟(1)中，制備供試品溶液的方法如下:
[0014]取待測中藥材，粉碎成細粉，加入中藥材20-30倍v/w量的0.5%w/v氫氧化鈉溶液，在40°C下，200r.rniiT1振蕩提取，濾過，取濾液稀釋25倍，即得。
[0015]其中，步驟(2)中，所述亞硫酸鹽為亞硫酸鈉。
[0016]其中，步驟(3)中，所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液，緩沖液pH值為6.37~6.47 ;鄰苯二甲醛溶液的濃度為1mmoL.L—1，用量為2~3mL ;所述銨鹽溶液為4~6mmoL.L-1的乙酸銨溶液，用量為1.5~3mL ;反應溫度為45-60°C水浴，反應時間為3min以上；
[0017]所述熒光衍生法的條件如下:以試劑空白為參比，激發(fā)波長為321±5nm，發(fā)射波長為 384 土 5nm。[0018]進一步地，步驟(3)中，所述緩沖液為Na2HPO4-KH2PO4緩沖液系統(tǒng)，pH值為6.44 ;鄰苯二甲醛溶液的濃度為1mmoL.Ι^，用量為2.5mL ;乙酸銨溶液的濃度為5mmoL.L—1，用量為1.5mL ;反應溫度為50°C水浴，反應時間為5min以上；
[0019]所述熒光衍生法的條件如下:以空白為參比，激發(fā)波長為321nm，發(fā)射波長為384nm。
[0020]更進一步地,步驟(3)中，反應時間為5~lOmin。
[0021]其中，步驟(3)中，靜置的時間為30~50min ;優(yōu)選為40min。
[0022]優(yōu)選地，它包括如下操作步驟:
[0023] (I)取待測中藥材細粉lg，加入0.5%w/v氫氧化鈉溶液25~30mL，40°C下，200r.mirT1振蕩提取30min,濾過,取1.0mL濾液稀釋至25mL,即得供試品溶液；
[0024](2)取亞硫酸鹽為對照品，制備濃度為I X 10_3mmol.L—1~18X 10_3mmol.L—1對照品溶液；
[0025](3)分別取供試品溶液、對照品溶液于IOml容量瓶中，先加入2.0mLpH=6.44的Na2HPO4-KH2PO4緩沖溶液，再依次加入2.5mLImmoL.L(-1)鄰苯二甲醛溶液及1.5mL5mmoL.L(-1)乙酸銨溶液，混勻，用水定容，于50°C水浴中恒溫5min，取出，立即放入冰水中冷卻，終止反應，靜置40min，以試劑空白為參比，在激發(fā)波長為321nm、發(fā)射波長為384nm時測定樣品和對照品的相對熒光強度，計算待測中藥材中的二氧化硫殘留量。
[0026]其中，所述待測中藥材為百合、葛根、黨參、山藥、白芍、薏苡仁、黃芪、麥冬、枸杞子、當歸中的一種或兩種以上的組合。
[0027]本發(fā)明對中藥二氧化硫殘留量的測定方法，能夠準確、快速測定中藥材中二氧化硫的殘留量，反應方法更為簡便，無需使用昂貴試驗儀器或有毒試劑，檢測成本更低，操作更安全，更適用于中藥材二氧化硫殘留量的快速測定。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0028]圖1激發(fā)與發(fā)射光譜
[0029]圖2pH對衍生物熒光強度的影響
[0030]圖3緩沖液用量對熒光強度的影響
[0031]圖4鄰苯二甲醛溶液用量對熒光強度的影響
[0032]圖5乙酸銨濃度對熒光強度的影響
[0033]圖6乙酸銨用量對熒光強度的影響
[0034]圖7加熱溫度對熒光強度的影響
[0035]圖8反應時間對熒光強度的影響
[0036]圖9靜置時間對熒光強度的影響
[0037]圖1ONaOH溶液濃度對二氧化硫含量的影響
[0038]圖11振蕩速度對二氧化硫含量的影響
[0039]圖12溫度對二氧化硫含量的影響
[0040]圖13提取時間對二氧化硫含量的影響
【具體實施方式】[0041]實施例1本發(fā)明對中藥材中二氧化硫的快速檢測方法的建立
[0042](I)取待測中藥材細粉lg，加入0.5%w/v氫氧化鈉溶液25mL，40°C下，200r.mirT1振蕩提取30min，濾過，取1.0mL濾液稀釋至25mL，即得供試品溶液；
[0043](2)取亞硫酸鹽為對照品，制備濃度為l、3、7、12、15、18X10_3mmol.L1的對照品溶液；
[0044](3)分別取適量供試品溶液、對照品溶液于IOml容量瓶中，先加入2.0mLpH=6.44的Na2HPO4-KH2PO4緩沖溶液，再依次加入2.5mLImmoL.L—1鄰苯二甲醛溶液及1.5mL5mmoL *L_1乙酸銨溶液,混勻,用水定容,于50°C水浴中恒溫5min,取出，立即放入冰水中冷卻，終止反應，靜置40min，以試劑空白為參比，在激發(fā)波長為321nm、發(fā)射波長為384nm時測定樣品和對照品的相對熒光強度，計算待測中藥材中的二氧化硫殘留量。
[0045]實施例2本發(fā)明檢測方法的優(yōu)化
[0046](一)突光衍生反應方法的條件篩選
[0047]I實驗部分
[0048]1.1 儀器
[0049]RF_5301 (PC)S熒光分光光度計(日本島津公司)；電子分析天平BP211D (1/10萬，德國Sartorius公司),電子分析天平BP121S (1/1萬,德國Sartorius公司);pHS_3C型酸度計(上海雷磁儀器廠)；WHY-2水浴恒溫振蕩器(江蘇金壇市金城國勝實驗儀器廠)；恒溫水浴鍋W201B (北京國華醫(yī)療器械廠)。
[0050]1.2 試劑
[0051]亞硫酸鈉(成都科龍化工試劑廠，批號:20110906，純度≥97%);鄰苯二甲醛(日本TCI公司，批號:120324，純度> 98%);其他試劑均為分析純，實驗用水為重蒸餾水；中藥材樣品購于荷花池中藥材市場。
[0052]亞硫酸鈉儲備液:精密稱取亞硫酸鈉適量，加水溶解制成ImmoL -L-1的亞硫酸鈉儲備液，避光冷藏，使用時用水稀釋至所需濃度。
[0053]鄰苯二甲醒溶液:lmmoL.L'準確稱取0.1341g鄰苯二甲醒,無水乙醇溶解后定容至IOOmL棕色容量瓶中作為儲備液，避光冷藏，使用時移取10.0mL定容至IOOmL配成ImmoL.L—1的鄰苯二甲醒工作液。
[0054]乙酸銨溶液:5mmoL.L-1。準確稱取7.7080g乙酸銨(AR)，用水溶解后定容至1000mL棕色容量瓶中作為儲備液，避光冷藏，使用時移取5.0mL定容至IOOmL配成5mmoL.L-1的乙酸銨工作液。
[0055]磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖溶液:將濃度為0.3moL.L-1的Na2HPO4和KH2PO4溶液按照不同體積比混合，配成一系列不同PH值的緩沖溶液。
[0056]1.3實驗方法
[0057]準確移取2.0mL Na2HPO4-KH2PO4緩沖溶液(pH=6.44)，適量樣品溶液(因為樣品含硫量不同，所以具體的加入量可隨含硫量變化，只要保證符合檢測限即可)于IOmL容量瓶中，依次加入2.5mLImmoL.L-1鄰苯二甲醒溶液及1.5mL5mmoL.L-1乙酸銨溶液,混勻,用水定容，于50°C水浴中恒溫5min，取出，立即放入冰水中冷卻，終止反應，靜置40min，以試劑空白為參比，于Icm的石英比色皿中測定激發(fā)波長為321nm，發(fā)射波長為384nm時樣品的相對熒光強度。CN 103529008 A4/7頁[0058]2方法與結果[0059]2. 1激發(fā)光譜和發(fā)射光譜[0060]按實驗方法配制溶液，然后在熒光分光光度計上分別掃描其激發(fā)光譜和發(fā)射光譜，由圖1可知體系的最佳激發(fā)波長為321nm,發(fā)射波長為384nm。[0061]2. 2試驗條件的選擇[0062]2. 2. 1緩沖液pH及其用量的影響[0063]試驗考察了不同pH Na2HP04-KH2P04緩沖溶液對體系熒光強度的影響，結果示于圖
2和圖3，發(fā)現(xiàn)pH值在6. 37?6. 47時，衍生物的相對熒光強度大且穩(wěn)定。當pH為6. 44時， 產(chǎn)物的相對熒光強度最大，故選擇pH=6. 44的Na2HP04-KH2P04緩沖溶液作為測定的酸度條 件，其加入量2. OmL較為適宜。
[0064]2. 2. 2鄰苯二甲醛用量的影響
[0065]取適量的亞硫酸鈉分別加入不同體積的ImmoL ? L—1鄰苯二甲醛溶液，經(jīng)衍生后測 定產(chǎn)物的相對熒光強度，結果示于圖4，表明隨著鄰苯二甲醛溶液用量的增大，產(chǎn)物的熒光 強度先增大后降低，當其用量為2. 5mL時，熒光強度最大，繼續(xù)增加用量產(chǎn)物熒光強度反而 降低，故本實驗選擇加入ImmoL ? L—1鄰苯二甲醒溶液2. 5mL。
[0066]2. 2. 3乙酸銨濃度及用量的影響
[0067]試驗考察了不同濃度乙酸銨對衍生物熒光強度的影響，結果示于圖5和圖6，表 明，隨著乙酸銨濃度的增大，衍生物的熒光強度先增大后降低，當乙酸銨濃度為5mmoL ? L—1 時，熒光強度達到最大，故本實驗選擇5mmoL ? L—1乙酸銨溶液，其加入量1. 5mL較為適宜。
[0068]2. 2. 4反應溫度和反應時間的影響
[0069]按實驗方法，分別在不同溫度和反應時間下進行衍生反應，然后測定產(chǎn)物的相對 熒光強度，結果示于圖7和圖8，表明50°C水浴中反應5min最佳，然后立即冰水浴冷卻，終 止反應。
[0070]2. 2. 5靜置時間的影響
[0071]按實驗方法對對照品試樣衍生化處理后，靜置一定時間后測定其相對熒光強度， 結果示于圖9，表明，隨靜置時間延長產(chǎn)物相對熒光強度有所降低，當靜置在30?50min范 圍內衍生物相對熒光強度趨于穩(wěn)定，故本實驗選擇反應完成后靜置40min測定產(chǎn)物的相對 熒光強度。
[0072]綜上，本發(fā)明的最佳衍生反應條件為：精密量取pH=6. 44的磷酸氫二鈉-磷酸二氫 鉀緩沖液2. OmL和適量樣品于10mL量瓶中，然后分別依次精密加入1. OmmoL噸―1鄰苯二甲 醛溶液2. 5mL及5. OmmoL ? L—1乙酸銨溶液1. 5mL,搖勻，水定容至刻度，于50°C水浴中衍生 反應5min后，立即取出，放入冰水中冷卻使反應終止，靜置40min，在激發(fā)波長321nm、發(fā)射 波長384nm處測定體系的相對熒光強度。
[0073](二）樣品處理(供試品溶液制備）方法的優(yōu)化
[0074]目前中藥材二氧化硫殘留量測定過程中，樣品的前處理多采用酸蒸餾，需 特制的全玻璃蒸餾裝置，且操作過程繁瑣。若以水作溶劑僅能提取出游離態(tài)的亞 硫酸鹽，而可逆結合的亞硫酸鹽在酸性條件下穩(wěn)定，在pH>7時則分離成亞硫酸根
【權利要求】
1.一種測定中藥材中二氧化硫殘留量的方法，其特征在于:它包括如下操作步驟: (1)取待測中藥材，制備供試品溶液； (2)取亞硫酸鹽為對照品，制備對照品溶液； (3)分別取供試品溶液、對照品溶液，在緩沖液中，加入鄰苯二甲醛溶液和銨鹽溶液反應，待反應結束后，終止反應后，靜置，再采用熒光衍生法測定中藥材中二氧化硫殘留量。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(1)中，供試品溶液的制備方法如下: 取待測中藥材，粉碎后，加入無機堿溶液，提取，濾過，取濾液，稀釋，即得。
3.根據(jù)權利要求2所述的方法，其特征在于:供試品溶液的制備方法如下: 取待測中藥材，粉碎成細粉，加入中藥材20~50倍v/w量的氫氧化鈉溶液，振蕩提取，濾過，取濾液稀釋20~30倍，即得； 優(yōu)選地，制備供試品溶液的方法如下: 取待測中藥材，粉碎成細粉，加入中藥材20~30倍v/w量的0.5%w/v氫氧化鈉溶液，在40°C下，200r.rniiT1振蕩提取，濾過，取濾液稀釋25倍，即得。
4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(2)中，所述亞硫酸鹽為亞硫酸鈉。
5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(3)中，所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液，緩沖液PH值為6.37~6.47 ;鄰苯二甲醛溶液的濃度為1mmoL.L—1，用量為2_3mL ;所述銨鹽溶液為4~6mmoL -L-1的乙酸銨溶液，用量為1.5~3mL ;反應溫度為45_60°C水浴，反應時間為3min以上； 所述熒光衍生法的條件如下:以試劑空白為參比，激發(fā)波長為321 ±5nm，發(fā)射波長為384±5nm。
6.根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征在于:步驟(3)中，所述緩沖液為Na2HPO4-KH2PO4緩沖液系統(tǒng)，PH值為6.44 ;鄰苯二甲醛溶液的濃度為1mmoL.L—1，用量為2.5mL ;乙酸銨溶液的濃度為5mmoL.L—1，用量為1.5mL ;反應溫度為50°C水浴，反應時間為5min以上； 所述熒光衍生法的條件如下:以空白為參比，激發(fā)波長為321nm，發(fā)射波長為384nm。
7.根據(jù)權利要求6所述的方法，其特征在于:步驟(3)中，反應時間為5-10min。
8.根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(3)中，靜置的時間為30~50min；優(yōu)選為40min。
9.根據(jù)權利要求1-8任意一項所述的方法，其特征在于:它包括如下操作步驟: (1)取待測中藥材細粉lg，加入0.5%w/v氫氧化鈉溶液25~30mL，40°C下，200r.mirT1振蕩提取30min，濾過，取1.0mL濾液稀釋至25mL，即得供試品溶液； (2)取亞硫酸鹽為對照品，制備濃度為IX 10_3mmol.L—1~18X 10_3mmol.L—1對照品溶液； (3 )分別取供試品溶液、對照品溶液于IOml容量瓶中，先加入2.0mLpH=6.44的Na2HPO4-KH2PO4緩沖溶液，再依次加入2.5mLImmoL.L-1鄰苯二甲醛溶液及1.5mL5mmoL.L-1乙酸銨溶液，混勻，用水定容，于50°C水浴中恒溫5min，取出，立即放入冰水中冷卻，終止反應，靜置40min，以試劑空白為參比，在激發(fā)波長為321nm、發(fā)射波長為384nm時測定樣品和對照品的相對熒光強度，計算待測中藥材中的二氧化硫殘留量。
10.根據(jù)權利要求1~9任意一項所述的方法，其特征在于:所述待測中藥材為百合、葛根、黨參、山藥、白芍、 薏苡仁、黃芪、麥冬、枸杞子、當歸中的一種或兩種以上的組合。
【文檔編號】G01N21/64GK103529008SQ201310504090
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年10月23日 優(yōu)先權日:2012年10月26日
【發(fā)明者】劉友平, 陳鴻平, 彭月, 陳林, 銀玲, 韋正, 樊丹青, 劉榮 申請人:成都中醫(yī)藥大學