杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取及含量測定方法
【專利摘要】本發明公開一種杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取及含量測定方法，其特征在于：將杭白菊烘干，粉碎，以料液比1:150～1:20的料液比將杭白菊放入有機溶劑中提取，重復提取1～5次，將提取液經過過濾減壓濃縮至蒸干，得到芹菜素和葉黃素。所述測量方法采用高效液相色譜法。本發明操作簡單，可以同時提取并測定杭白菊中芹菜素和葉黃素兩種物質含量，減少了分別提取測量的繁瑣，并最大限度的減少了有效物質的損失，為杭白菊相關產品的進一步推廣和深度加工提供理論依據。
【專利說明】杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取及含量測定方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及物質含量測定范疇，具體涉及的是同時提取杭白菊中芹菜素和葉黃素，并進行含量測定的方法。
【背景技術】
[0002]杭白菊，又名甘菊、白菊花、茶菊、藥菊，是甘菊中的佳品。杭白菊主產于浙江桐鄉，為道地藥材“浙江八味”之一，亦為衛生部新批的藥食兩用資源。杭白菊有很高的藥用價值，還有延年益壽的功效。《補農書》載“甘菊性甘溫，久服最有益”，元代《本草衍義補遺》說“菊花能補陰”，李時珍《本草綱目》道“菊能利五脈，調四肢，治頭風熱補”，可見杭白菊的功效。經常飲用，能增強毛細血管抵抗力，抑制毛細血管的通性，起到抗炎強身的作用。
[0003]芹菜素和葉黃素分別是杭白菊中的有效成分。芹菜素屬于黃酮類，分子式C15HltlO5,該物質具有抑制致癌物質的致癌活性，可以作為治療HIV和其它病毒感染的抗病毒藥物、MAP激酶的抑制劑，治療各種炎癥，做抗氧化劑，有鎮靜、安神、降壓功效。葉黃素是類胡蘿卜素之一，屬光和色素，分子式為C4(iH5602。葉黃素有保護視力的作用，缺乏該物質時易引起黃斑退化和視力模糊，進而出現視力退化近視等癥狀。葉黃素有較強的氧化作用，能抑制活性氧自由基的活性，阻止活性氧自由基對正常細胞的破壞，同時其還有降低白內障的發生率延緩動脈硬化及抗癌等作用。
[0004]桐鄉當地對于杭白菊的應用主要是制作菊花茶，將菊花只進行整體初加工，而對于杭白菊中有效成分的研究很少，更沒有將其中的具有保健功能的有效成分進行提取加工做成產品。杭白菊的價值沒有得到更好的利用。
[0005]經對現有的技術文獻檢索發現，專利02128803.8利用乙醇熱回流提取真菊中的芹菜素，專利200510097010.2報道了用柚皮素半合成芹菜素的方法，國家標準(GB/T19427-2003)公布了蜂膠中芹菜素含量的測定方法。專利201310149262.X介紹了萬壽菊葉黃素制備工藝，國家標準(GB/T23209-2008)公布了奶粉中葉黃素的測定。尚沒有文獻報道在同一條件下提取杭白菊中芹菜素和葉黃素兩種物質，并進行含量測定的方法。
【發明內容】
[0006]針對現有技術中存在的上述不足，本發明的目的是提供一種可以同時提取杭白菊中芹菜素和葉黃素兩種物質并進行含量測定的方法。
[0007]根據本發明的一個方面，提供一種可以同時提取芹菜素和葉黃素兩種物質的方法，具體為:將杭白菊烘干，粉碎，以料液比1:150?1:20的料液比將杭白菊放入有機溶劑中提取，重復提取I?5次，將提取液經過過濾減壓濃縮至蒸干，用甲醇定容，用于檢測含量。
[0008]優選地，所述將杭白菊烘干是指:將杭白菊在20?100°C溫箱中烘干。
[0009]優選地，所述有機溶劑為常用溶劑，如甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。
[0010]優選地，所述提取的時間為15?120分鐘。[0011 ] 根據本發明的另一方面，提供一種同時對提取溶液進行芹菜素和葉黃素的含量測定方法，具體為高效液相色譜法:
[0012]色譜條件與系統適用性實驗:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，水-乙腈為流動相，檢測波長為芹菜素328nm，葉黃素444nm ;
[0013]對照品溶液的制備:精密稱取芹菜素和葉黃素對照品適量，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含0.0Olmg?0.200mg的溶液，作為對照品溶液；
[0014]供試品溶液的制備:將提取液濃縮蒸干后，用甲醇定容至10?IOOOmL,得到供試品溶液；
[0015]測定法:分別精密吸取不同濃度對照品溶液，得到兩種物質標準曲線。精密吸取等量供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，所得色譜中，找出與對照品色譜保留時間相同的色譜圖，通過峰面積與標準曲線，計算其含量。
[0016]與現有技術相比，本發明具有以下有益效果:
[0017]本發明方法操作簡單，可以同時提取并測定杭白菊中芹菜素和葉黃素兩種物質含量，減少了分別提取測量的繁瑣，并最大限度的減少了有效物質的損失，為杭白菊相關產品的進一步推廣和深度加工提供理論依據。
【具體實施方式】
[0018]下面結合具體實施例對本發明進行詳細說明。以下實施例將有助于本領域的技術人員進一步理解本發明，但不以任何形式限制本發明。應當指出的是，對本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干變形和改進。這些都屬于本發明的保護范圍。以下實施例中沒有詳細說明的部分均可以采用現有技術實現。
[0019]實施例1
[0020]將杭白菊在20°C溫箱中烘干，粉碎，取Ig杭白菊在50mL95%酒精中提取120分鐘，重復提取3次，將提取液經過過濾減壓濃縮至蒸干，用甲醇定容至10mL，使用HPLC檢測。
[0021]色譜條件與系統適用性實驗:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水-乙腈為流動相，檢測波長為芹菜素328nm，葉黃素444nm ；
[0022]對照品溶液的制備:精密稱取芹菜素和葉黃素對照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含IOug的溶液，作為對照品溶液；
[0023]供試品溶液的制備:將提取液濃縮蒸干后，用甲醇定容至10mL，得到供試品溶液；
[0024]測定法:分別精密吸取不同濃度對照品溶液，得到兩種物質標準曲線，精密吸取5ul供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，所得色譜中，找出與對照品色譜保留時間相同的色譜圖，通過峰面積與標準曲線，計算其含量，得到Ig干菊花中含芹菜素為3.4mg，葉黃素
0.07mgo
[0025]實施例2
[0026]將杭白菊在100°C溫箱中烘干，粉碎，取2g杭白菊在50mL丙酮中提取30分鐘，重復提取2次，將提取液經過過濾減壓濃縮至蒸干，用甲醇定容至IOOmL,使用HPLC檢測。
[0027]色譜條件與系統適用性實驗:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水-乙腈為流動相，檢測波長為芹菜素328nm，葉黃素444nm ；
[0028]對照品溶液的制備:精密稱取芹菜素和葉黃素對照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含20ug的溶液，作為對照品溶液；
[0029]供試品溶液的制備:將提取液濃縮蒸干后，用甲醇定容至50mL，得到供試品溶液；
[0030]測定法:分別精密吸取不同濃度對照品溶液，得到兩種物質標準曲線，精密吸取IOul供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，所得色譜中，找出與對照品色譜保留時間相同的色譜圖，通過峰面積與標準曲線，計算其含量，得到Ig干菊花中含芹菜素為5.2mg，葉黃素
0.04mgo
[0031]實施例3
[0032]將杭白菊在50°C溫箱中烘干，粉碎，取Ig杭白菊在30mL丙酮中提取60分鐘，重復提取I次，將提取液經過過濾減壓濃縮至蒸干，用甲醇定容至10mL，使用HPLC檢測。
[0033]色譜條件與系統適用性實驗:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水-乙腈為流動相，檢測波長為芹菜素328nm，葉黃素444nm ；
[0034]對照品溶液的制備:精密稱取芹菜素和葉黃素對照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含50ug的溶液，作為對照品溶液；
[0035]供試品溶液的制備:將提取液濃縮蒸干后，用甲醇定容至25mL，得到供試品溶液；
[0036]測定法:分別精密吸取不同濃度對照品溶液，得到兩種物質標準曲線，精密吸取5ul供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，所得色譜中，找出與對照品色譜保留時間相同的色譜圖，通過峰面積與標準曲線，計算其含量，得到Ig干菊花中含芹菜素為3.9mg，葉黃素
0.05mgo
[0037]實施例4
[0038]將杭白菊在100°C溫箱中烘干，粉碎，取5g杭白菊在150mL甲醇中提取15分鐘，重復提取3次，將提取液經過過濾減壓濃縮至蒸干，用甲醇定容至10mL，使用HPLC檢測。
[0039]色譜條件與系統適用性實驗:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水-乙腈為流動相，檢測波長為芹菜素328nm，葉黃素444nm ；
[0040]對照品溶液的制備:精密稱取芹菜素和葉黃素對照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含50ug的溶液，作為對照品溶液；
[0041]供試品溶液的制備:將提取液濃縮蒸干后，用甲醇定容至IOOmL,得到供試品溶液；
[0042]測定法:分別精密吸取不同濃度對照品溶液，得到兩種物質標準曲線，精密吸取20ul供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，所得色譜中，找出與對照品色譜保留時間相同的色譜圖，通過峰面積與標準曲線，計算其含量，得到Ig干菊花中含芹菜素為6.7mg，葉黃素
0.06mgo
[0043]以上對本發明的具體實施例進行了描述。需要理解的是，本發明并不局限于上述特定實施方式，本領域技術人員可以在權利要求的范圍內做出各種變形或修改，這并不影響本發明的實質內容。
【權利要求】
1.一種杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取方法，其特征在于:將杭白菊烘干，粉碎，以1:150?1:20的料液比將杭白菊放入有機溶劑中提取，重復提取I?5次，將提取液經過過濾減壓濃縮至蒸干，得到芹菜素和葉黃素。
2.根據權利要求1所述的杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取方法，其特征在于，所述將杭白菊烘干是指:將杭白菊在20?100°C溫箱中烘干。
3.根據權利要求1所述的杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取方法，其特征在于，所述有機溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯中一種。
4.根據權利要求1-3任一項所述的杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取方法，其特征在于，所述提取的時間為15?120分鐘。
5.—種權利要求1-4任一項所述方法提取得到的杭白菊中芹菜素和葉黃素的測量方法，其特征在于，所述測量方法采用高效液相色譜法，具體為: 色譜條件與系統適用性實驗:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水-乙腈為流動相，檢測波長為:芹菜素328nm，葉黃素444nm ； 對照品溶液的制備:精密稱取芹菜素和葉黃素對照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含0.0Olmg?0.200mg的溶液,作為對照品溶液； 供試品溶液的制備:將提取液濃縮蒸干后，用甲醇定容至10?IOOOmL,得到供試品溶液； 測定法:分別精密吸取不同濃度對照品溶液，得到兩種物質標準曲線，精密吸取等量供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，所得色譜中，找出與對照品色譜保留時間相同的色譜圖，通過峰面積與標準曲線，計算其含量。
【文檔編號】G01N30/06GK103940927SQ201410175271
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年4月28日 優先權日:2014年4月28日
【發明者】代光輝, 王艷艷, 桂娟, 王新華, 陳義娟, 龐倩茹, 郭松, 朱慧郅, 姚琳琳, 周潔 申請人:上海交通大學
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