国产自产21区,亚洲97,免费毛片网,国产啪视频,青青青国产在线观看,国产毛片一区二区三区精品

一種腸炎寧制劑的檢測方法
【專利摘要】本發明公開了一種腸炎寧制劑的檢測方法，該方法包括采用高效液相色譜法測定煙花苷含量的方法。
【專利說明】一種腸炎寧制劑的檢測方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及中藥領域，特別涉及一種腸炎寧制劑的檢測方法。
【背景技術】
[0002]收載于2010年版《中華人民共和國藥典》的腸炎寧糖漿和腸炎寧片具有清熱利濕、行氣的功效，用于急、慢性胃腸炎，腹灣，細菌性痢疾，小兒消化不良等，臨床應用廣泛、療效確切。近幾年，國家食品藥品監督管理局又新批準了腸炎寧丸、腸炎寧顆粒、腸炎寧膠囊、腸炎寧咀嚼片等劑型。目前已有報道中，腸炎寧制劑質量檢測指標成分為東莨菪內酯、沒食子酸和雞屎藤苷甲酯，而腸炎寧制劑中含量較高的黃酮類成分沒有明確的檢測指標成分。現代藥理研究表明黃酮類成分具有很強的包括抗炎等生理活性，對腸炎寧制劑中的黃酮類成分進行檢測，有助于進一步提高腸炎寧制劑的質量和療效。

【發明內容】

[0003]本發明的目的在于提供一種腸炎寧制劑的檢測方法，本發明提供的檢測方法有助于進一步提聞腸炎寧制劑的質量和療效。
[0004]本發明提供的檢測方法包括采用高效液相色譜法測定煙花苷含量的方法。
[0005]本發明采用高效液相色譜法測定腸炎寧制劑中煙花苷含量所選用的色譜條件為:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈一用酸調PH值至2-4的水溶液或甲醇一用酸調PH值至2-4的水溶液為流動相；柱溫為20?40°C ;檢測波長為260?275nm或330?360nmo
[0006]本發明采用高效液相色譜法測定腸炎寧制劑中煙花苷含量優選的色譜條件為:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比例為81:19?79:21的乙腈一0.3%冰醋酸水溶液為流動相；柱溫為20?40°C ;檢測波長為260?275nm或330?360nm。
[0007]本發明所述的腸炎寧制劑為腸炎寧口服液、腸炎寧糖漿、腸炎寧膠囊、腸炎寧顆粒、腸炎寧片、腸炎寧咀嚼片或腸炎寧丸中的任意一種。
[0008]本發明創新之處在于:通過對腸炎寧制劑黃酮類成分的研究，從中分離得到并鑒定其中I個黃酮類化合物為煙花苷；在此基礎上，建立了專屬性強的采用高效液相色譜法測定腸炎寧制劑中煙花苷含量的方法，能夠更好的控制制劑的質量，有助于提高其臨床療效。
[0009]下面將通過一些實驗例對本發明作進一步說明。
[0010]實驗例I腸炎寧制劑黃酮類成分的研究
[0011] 申請人:前期采用HPLC法，以槲皮素、山奈酚和蘆丁等3種常見的黃酮類成分作為對照品，對腸炎寧制劑進行了色譜分析，發現由于藥材是采用水提，所以腸炎寧制劑中槲皮素和山奈酚的含量較低；腸炎寧制劑色譜圖中與蘆丁對照品色譜峰保留時間相同的地方有色譜峰，但分離度較差，而且峰純度檢測顯示該色譜峰中包含了其它成分。因此，槲皮素、山奈酚和蘆丁都不適宜作為腸炎寧制劑的檢測指標成分，需要尋找其它的黃酮類成分作為檢測成分。
[0012]1、腸炎寧制劑中黃酮類檢測成分的篩選
[0013](I)色譜條件:DikmaC18色譜柱(250mmX4.6mm, 5 μ m);流動相:0.3%冰醋酸水溶液一乙腈(梯度洗脫，Omin比例為85:15,60min比例為65:35);檢測波長為350nm。
[0014](2)供試品溶液的制備:取腸炎寧顆粒粉末約4.0g，加入60%甲醇100ml，超聲(功率250W，頻率33KHz)處理30分鐘，放冷，過濾，濾液濃縮至約30ml，過濾，經聚酰胺柱吸附，依次用水和60%乙醇洗脫，收集60%乙醇洗脫液，濃縮至適量，濾過，取續濾液，即得。
[0015](3)檢測及結果:取供試品溶液20μ 1，按⑴項下色譜條件進樣分析，經過對峰高較高且分離度較好的色譜峰進行光譜分析和峰純度檢測，初步確定出峰時間為18分鐘左右的黃酮類成分為檢測成分。
[0016]2、提取分離
[0017]取生產上用于生產腸炎寧顆粒的稠膏1kg，加30%乙醇10L，超聲，靜置，過濾，濾液濃縮至5L，過濾，經聚酰胺柱吸附，依次用水、30%乙醇和60%乙醇洗脫，經HPLC分析，待分離成分主要存在于30%乙醇洗脫部分，30%乙醇洗脫部分回收乙醇并減壓濃縮至1L，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，經HPLC分析，待分離成分主要存在于正丁醇萃取液中，正丁醇萃取液濃縮至500ml，用5 %碳酸鈉溶液萃取，經HPLC分析，待分離成分主要存在于水層部分，水層部分用酸調PH值至4?5，適當濃縮，經聚酰胺柱吸附，依次用水和30%乙醇洗脫，收集30%乙醇洗脫部分，濃縮至乙醇含量少于10%，經自制YMGC18H3柱吸附，依次用10%甲醇、30%甲醇和50%甲醇洗脫，經HPLC分析，待分離成分主要存在于30%甲醇洗脫部分，30%甲醇洗脫部分減壓濃縮后，用少量35%甲醇溶解，再經制備HPLC，甲醇-水(35:65)洗脫，得目標成分。
[0018]3、結構鑒定
[0019]目標成分:黃色針狀結晶，鹽酸鎂粉反應及Molish反應均呈陽性。UV(MeOH)nm:329，268。1H-Mffi(DMSO-Cl6JOOMHz)S:7.97 (2H, d, J = 8.7Hz，H_2 '，6 ')，
6.87(2H, d, J = 8.7Hz，H-3 ' ,5' ),6.40(1H, brs, H_8)，6.19(1H, brs, H_6)，5.30(1H,d，J = 7.4Hz，H — I ' ' ),5.24(1H, brs, H-1 ; ' ' )。13C-NMR(100MHzDMS0_d6) δ:177.9 (C-4)，164.2 (C_7) , 161.3 (C_5)，159.9 (C_4 ' )，156.9 (C-2,9)，133.3 (C_3)，131.0(02'，6' )，120.9(C-r ),115.2(03' ,5' ), 104.0(C-1O), 101.4(C-1;')，100.8 (C-1 ' ' ' ) ,98.8(C-6) ,93.8(C-8) ,76.4(C-5 ' ' ), 75.8 (C_3 ''),74.2(C-2' ' ) ,71.4(C-4; ' ' ),70.6(03' ' ' ),70.4(02' ' ' ),70.0(04'')，68.3(C-5' ' ' )，66.9(C-6' ' )，17.8(C_6''')。根據以上數據確定目標成分為煙花苷。
[0020]實驗例2腸炎寧顆粒中煙花苷含量測定研究
[0021]1、儀器與試藥
[0022]安捷倫1200液相色譜儀(美國安捷倫公司)。煙花苷對照品(自制，純度大于98% );腸炎寧顆粒(江西天施康中藥股份有限公司，批號:20140301、20140302、20140303);乙腈為色譜純；水為超純水，其它試劑均為分析純。
[0023]2、色譜條件
[0024]DikmaC18色譜柱(250_X 4.6mm, 5 μ m);流動相:0.3 %冰醋酸水溶液一乙腈(80:20);流速:1.0ml/min ;檢測波長:350nm;柱溫:25°C ;理論板數按煙花苷計不低于3000。
[0025]3、對照品溶液的制備取煙花苷對照品適量，精密稱定，加60%甲醇制成每1ml含
0.01mg的溶液，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
[0026]4、供試品溶液的制備取腸炎寧顆粒，研細，取約4.0g，精密稱定，加入60%甲醇100ml，超聲(功率250W，頻率33KHz)處理30分鐘，放冷，過濾，濾液濃縮至適量，放冷，轉移至IOml量瓶中，加60%甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
[0027]5、系統適應性試驗
[0028]煙花苷在波長260nm和350nm附近均有較強的紫外吸收，本方法選擇350nm作為檢測波長。按2項下色譜條件測定，比較煙花苷對照品溶液、供試品溶液的色譜圖，結果煙花苷色譜峰無拖尾，分離度良好。
[0029]6、線性關系考察
[0030]精密稱取煙花苷對照品10.23mg,置50ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，取上述母液5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，作為對照品溶液，按2項下色譜條件，分別注入高效液相色譜儀I μ 1，3 μ 1，5 μ 1，10 μ 1，20 μ 1，測定峰面積。以進樣量(Ug)為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線并進行回歸分析，結果見表1。
[0031 ] 表1煙花苷線性關系考察結果
[0032]
【權利要求】
1.一種腸炎寧制劑的檢測方法，所述腸炎寧制劑是由下列重量份的原料制成的:地錦草660份、黃毛耳草900份、樟樹根660份、香薷330份、楓樹葉330份，其特征在于該方法包括采用高效液相色譜法測定煙花苷含量的方法。
2.如權利要求1所述的一種腸炎寧制劑的檢測方法，其特征在于采用高效液相色譜法測定煙花苷含量的色譜條件為:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈一用酸調PH值至2-4的水溶液或甲醇一用酸調PH值至2-4的水溶液為流動相；柱溫為2(T40°C ;檢測波長為 260?275nm 或 330?360nm。
3.如權利要求1所述的一種腸炎寧制劑的檢測方法，其特征在于采用高效液相色譜法測定煙花苷含量的色譜條件為:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比例為81:19?79:21的乙腈一 0.3%冰醋酸水溶液為流動相；柱溫為2(T40°C ;檢測波長為260?275nm 或 330?360nm。
4.如權利要求1-3任一所述的一種腸炎寧制劑的檢測方法，其特征在于所述的腸炎寧制劑為腸炎寧口服液、腸炎寧糖漿、腸炎寧膠囊、腸炎寧顆粒、腸炎寧片、腸炎寧咀嚼片或腸炎寧丸中的一種。
【文檔編號】G01N30/88GK103940942SQ201410191776
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年5月8日 優先權日:2014年5月8日
【發明者】吳孔松, 吳朝陽, 吳安明, 支永英 申請人:江西天施康中藥股份有限公司