一種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，以紫外分光光度法測定藥材中總聯(lián)芐含量，步驟包括：以聯(lián)芐類化合物為對照品，用外標法在270-290nm進行總聯(lián)芐的含量測定。該方法簡便、易行、重復性好，能夠確切反映鐵皮石斛藥材質量，進一步完善了鐵皮石斛藥材的質量標準，彌補了鐵皮石斛質量評價中缺乏對以聯(lián)芐為代表的脂溶性特征成分的檢測方法的不足，使鐵皮石斛藥材的質量檢測技術更科學、合理。采用本發(fā)明所述檢測方法可有效控制鐵皮石斛藥材的質量，從而確保其臨床應用的安全性、穩(wěn)定性和有效性。
【專利說明】一種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥【技術領域】，具體是一種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法。
【背景技術】
[0002] 鐵皮石斛是蘭科石斛屬多年生草本植物，其主要藥用部位是新鮮或干燥莖，主要 分布于安徽、浙江、廣西、湖南、云南、貴州等地，是傳統(tǒng)名貴中藥材。鐵皮石斛具有益胃生 津，滋陰清熱之功效，用于陰傷津虧，口干煩渴，胃陰不足，食少干嘔，病后虛熱不退，陰虛火 旺，骨蒸勞熱，目暗不明，筋骨痿軟等癥。《神農本草經》將其列為上品，道家養(yǎng)生經典《道藏》 將它譽為"中華九大仙草"之首。
[0003] 鐵皮石斛中主要含有水溶性的多糖、脂溶性的聯(lián)芐類，還含有少量的水溶性的氨 基酸、水溶性的微量元素、水溶性的酚酸類，以及微量的偏脂溶性的石斛生物堿、脂溶性的 石斛倍半萜、偏脂溶性的芴酮類化合物、偏脂溶性的木脂素、水溶性的酚類、偏脂溶性的黃 酮、脂溶性的留體等，其中聯(lián)芐類具有抗腫瘤、抗氧化等重要藥理活性作用。
[0004] 然而目前的質量控制方法仍然落后，2005年版《中國藥典》以性狀和顯微特征作 為鑒別石斛的唯一手段，2010年版《中國藥典》有所改進，雖然將鐵皮石斛從石斛藥材中 單列出來，增加了水分、浸出物等項目檢查，同時，對鐵皮石斛多糖和甘露糖進行含量測定。 但多糖和甘露糖在植物中的存在較普遍，對其特征性的次生代謝產物仍沒有進行科學的控 制。目前，以性狀鑒別鐵皮石斛原料和以粗多糖為主要指標鑒別產品的做法，既難以辨別是 否含有鐵皮石斛特征成分，又難以測定鐵皮石斛特征有效成分的含量，特別是以聯(lián)芐為代 表的脂溶性特征成分。因此，迫切需要提供一種科學、全面反映鐵皮石斛藥材質量的檢測方 法。
【發(fā)明內容】
[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，可有效控制鐵皮石斛 藥材的質量，從而確保其臨床應用的安全性、穩(wěn)定性和有效性。
[0006] 為實現上述目的，本發(fā)明提供如下技術方案：
[0007] -種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，采用紫外分光光度法，以聯(lián)芐類化合物為對 照品，用外標法對鐵皮石斛中的總聯(lián)芐進行含量測定。
[0008] 所述的鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，具體檢測步驟如下：
[0009] 1)供試品溶液的制備：取鐵皮石斛藥材，粉碎，過40-60目篩，精密稱取0. 5-1. 0g， 以重量/體積比為30-70倍量的高濃度醇水系統(tǒng)或中極性有機溶劑提取2-3次，提取液轉 移至容量瓶中并定容，搖勻，取l_5mL離心10-20min，轉速為10000r/min，精密量取上清液 用甲醇稀釋，即得供試品溶液；
[0010] 2)對照品溶液的制備：精密稱取聯(lián)芐類化合物對照品，加甲醇溶解制成溶液；
[0011] 3)測定法：以甲醇為空白參比溶劑；采用紫外分光光度法，測試在270-290nm波長 處的吸光度，空白溶液無干擾；用標準曲線法計算含量。
[0012] 作為本發(fā)明進一步的方案：具體檢測步驟如下：
[0013] 1)供試品溶液的制備：取鐵皮石斛藥材，粉碎，過50目篩，精密稱取lg，置IOOml 圓底燒瓶中，加入50%乙醇70ml水浴回流提取3次，每次3小時，合并提取液，取其中的4ml 離心15min，轉速為10000r/min，精密量取上清液Iml用甲醇稀釋10倍，即得供試品溶液；
[0014] 2)對照品溶液的制備：精密稱取毛蘭素對照品25. Omg，置于25ml容量瓶中，力口 甲醇溶解，定容，精密量取毛蘭素標準溶液〇. 5、0. 6、0. 7、0. 8、0. 9、1. 0、1. 1、1. 2、1. 3、1. 4、 1. 5、I. 6ml，分別置于25ml容量瓶中定容，即得對照品溶液；
[0015] 3)測定法：以甲醇為空白參比溶劑；按照紫外分光光度法在280nm波長處測吸光 度，空白溶液無干擾；用標準曲線法計算含量，以吸光度為縱坐標Y，毛蘭素濃度為橫坐標X 進行線性回歸，求得回歸方程式為A = 11.002C+0. 018,線性范圍為0. 02mg/ml-0. 064mg/ ml,相關系數r = 0. 9997,線性關系良好。
[0016] 作為本發(fā)明進一步的方案：所述對照品包括但不限于毛蘭素和二氫白藜蘆醇。
[0017] 作為本發(fā)明進一步的方案：所述中極性有機溶劑包括但不限于二氯甲烷、乙酸乙 酯、氯仿和丙酮，所述高濃度醇水系統(tǒng)包括但不限于濃度為50% -95%的甲醇水溶液體系、 乙醇水溶液體系和異丙醇水溶液體系。
[0018] 作為本發(fā)明進一步的方案：所述鐵皮石斛藥材中的總聯(lián)芐的含量不低于5%。
[0019] 與現有技術相比，本發(fā)明的有益效果是：簡便、易行、重復性好，能夠確切反映鐵皮 石斛藥材質量，進一步完善了鐵皮石斛藥材的質量標準，彌補了鐵皮石斛質量評價中缺乏 對以聯(lián)芐為代表的脂溶性特征成分的檢測方法的不足，使鐵皮石斛藥材的質量檢測技術更 科學、合理；可有效控制鐵皮石斛藥材的質量，從而確保其臨床應用的安全性、穩(wěn)定性和有 效性。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0020] 圖1是聯(lián)芐提取率與乙醇濃度的關系；
[0021] 圖2是聯(lián)芐提取率與提取溫度的關系；
[0022] 圖3是聯(lián)芐提取率與提取時間的關系；
[0023] 圖4是聯(lián)芐提取率與液料比的關系；
[0024] 圖5是聯(lián)芐提取率與提取次數的關系；
[0025] 圖6是毛蘭素標準曲線圖。
【具體實施方式】
[0026] 下面將結合本發(fā)明實施例，對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述， 顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發(fā)明中的 實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都 屬于本發(fā)明保護的范圍。
[0027] 實施例1 :提取方法考察
[0028] 1.稱取Ig過50目篩的鐵皮石斛粉末，共4份，分別記為A、B、C、D ;
[0029] A、50ml乙酸乙酯超聲提取20min ;B、50ml80%的乙醇熱提2h ;C、40ml丙酮超聲提 取30min ;D、60ml甲醇熱提lh。
[0030] 各取4ml提取液離心lOmin，轉速為10000r/min，取上清液稀釋一定倍數，測定其 總聯(lián)芐含量，各個提取方法中總聯(lián)芐提取率如表1所示：這些溶劑都可以將聯(lián)芐類化合物 提取出來，優(yōu)選乙醇熱提法。
[0031] 表1不同提取方法的總聯(lián)芐提取率
[0032]
【權利要求】
1. 一種鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，其特征在于，采用紫外分光光度法，以聯(lián)芐類 化合物為對照品，用外標法對鐵皮石斛中的總聯(lián)芐進行含量測定。
2. 根據權利要求1所述的鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，其特征在于，具體檢測步驟 如下： 1) 供試品溶液的制備：取鐵皮石斛藥材，粉碎，過40-60目篩，精密稱取0. 5-1. Og，以重 量/體積比為30-70倍量的高濃度醇水系統(tǒng)或中極性有機溶劑提取2-3次，提取液轉移至 容量瓶中并定容，搖勻，取l_5mL離心10-20min，轉速為10000r/min，精密量取上清液用甲 醇稀釋，即得供試品溶液； 2) 對照品溶液的制備：精密稱取聯(lián)芐類化合物對照品，加甲醇溶解制成溶液； 3) 測定法：以甲醇為空白參比溶劑；采用紫外分光光度法，測試在270-290nm波長處的 吸光度，空白溶液無干擾；用標準曲線法計算含量。
3. 根據權利要求2所述的鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，其特征在于，具體檢測步驟 如下： 1) 供試品溶液的制備：取鐵皮石斛藥材，粉碎，過50目篩，精密稱取lg，置100ml圓底 燒瓶中，加入70ml 50%的乙醇，水浴回流提取3次，每次3小時，合并提取液，取其中的4ml 離心15min，轉速為10000r/min，精密量取上清液lml用甲醇稀釋10倍，即得供試品溶液； 2) 對照品溶液的制備：精密稱取毛蘭素對照品25. Omg，置于25ml容量瓶中，加甲醇 溶解，定容，精密量取毛蘭素標準溶液 〇. 5、0. 6、0. 7、0. 8、0. 9、1. 0、1. 1、1. 2、1. 3、1. 4、1. 5、 1. 6ml，分別置于25ml容量瓶中定容，即得對照品溶液； 3) 測定法：以甲醇為空白參比溶劑；按照紫外分光光度法在280nm波長處測吸光度，空 白溶液無干擾；用標準曲線法計算含量，以吸光度為縱坐標Y，毛蘭素濃度為橫坐標X進行 線性回歸，求得回歸方程式為A = 11. 002C+0. 018,線性范圍為0. 02mg/ml-0. 064mg/ml，相 關系數r = 0. 9997,線性關系良好。
4. 根據權利要求1-2任一所述的鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，其特征在于，所述對 照品包括但不限于毛蘭素和二氫白藜蘆醇。
5. 根據權利要求2所述的鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，其特征在于，所述中極性有 機溶劑包括但不限于二氯甲烷、乙酸乙酯、氯仿和丙酮，所述高濃度醇水系統(tǒng)包括但不限于 濃度為50% -95%的甲醇水溶液體系、乙醇水溶液體系和異丙醇水溶液體系。
6. 根據權利要求1-2任一所述的鐵皮石斛藥材的質量檢測方法，其特征在于，所述鐵 皮石斛藥材中的總聯(lián)節(jié)的含量不低于5%。
【文檔編號】G01N21/33GK104237151SQ201410542575
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年10月14日 優(yōu)先權日:2014年10月14日
【發(fā)明者】陳賢良 申請人:寧波楓康生物科技有限公司
專業(yè)數控銑床產品供應商
20年生產經驗，實力工廠，精工品質，質量有保障
