一種人工模擬的豬胃和小腸消化液及其制備方法與應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種人工模擬的豬胃和小腸消化液及其制備方法與應用。該制備方法包括如下步驟:將豬配合飼料和人工胃液按1g:3~3.5mL的配比混合,調pH至1.5~2.0,39±1℃振蕩1~2h,冷卻至4±1℃,8000~9000g 4±1℃離心5~10min,取上清液為人工模擬豬胃消化液;向離心所得沉淀中加入所述沉淀3倍體積的人工小腸液,調pH為6.8±0.2,39±1℃振蕩1~2h,冷卻至4±1℃,18000~20000g 4℃離心5~10min,取上清液為人工模擬豬小腸消化液。本發明人工模擬豬胃和小腸消化液,不但pH值、溫度等條件與豬消化道一致,而且通過對特定飼料的消化引入了飼料中的可溶性成分,與實際生產中豬消化液成分比較一致。本發明可對霉菌毒素吸附劑應用于豬的吸附率進行科學、客觀、準確的體外評價,方法簡單、快速。
【專利說明】一種人工模擬的豬胃和小腸消化液及其制備方法與應用
【技術領域】
[0001]本發明屬于生物【技術領域】,涉及一種人工模擬的豬胃和小腸消化液及其制備方法 與應用。
【背景技術】
[0002]霉菌毒素吸附劑是一類具有吸附霉菌毒素能力的飼料添加劑,能夠在動物消化道 內與飼料中的霉菌毒素相結合,從而達到減少動物胃腸道對霉菌毒素吸收,增加霉菌毒素 通過糞便排出的目的。其中,對特定霉菌毒素的吸附率是評價霉菌毒素吸附劑質量優劣的 重要指標。
[0003]目前,霉菌毒素吸附劑吸附率的評價主要有體外法和體內法兩種。體外法一般以 不同pH值的磷酸緩沖液為介質,測定吸附劑對某種霉菌毒素的吸附能力。這種方法比較簡 單快速,但是緩沖液體系與動物消化道環境相差甚遠,沒有考慮飼料中其他成分影響,導致 評價結果可靠性差,只適用于吸附劑初步評價和吸附潛力篩選。體內法通常采用動物生產 性能或生物標記物等間接指標來評價吸附劑效果,因為很多因素和試驗條件都可影響最終 結果,導致即使采用相同的評價方法,也常常產生不同的結果。而且,體內法評價耗時長,費 用高,一般僅用于實用效果的驗證,不能得出確切的吸附率。此外,直接采用動物消化液如 胃液和小腸液進行吸附劑評價是一個比較理想的方法。但是,由于動物消化液難以獲取,而 且獲得的量非常有限,因此實際應用中的可行性很差。
【發明內容】
[0004]本發明的第一個目的是提供一種人工模擬的豬胃和小腸消化液的制備方法。
[0005]本發明所提供的制備人工模擬豬胃消化液的方法,具體可包括如下步驟:將 豬配合飼料和人工胃液按照lg :3?3· 5mL(如lg :3mL)的配比混合,并調節pH值至 1_5?2.0,39±1°C振蕩孵育1?2小時(如1小時),冷卻至4±rC,6000?9000g(如 9000g)4土1°C (如4? )離心5?10分鐘(如10分鐘),移取上清液即為人工模擬豬胃消 化液;
[0006]所述人工胃液的溶劑為水,溶質及濃度為:NaCl 2g/L ;胃蛋白酶12160U/L ; HC10.084mol/L〇 ,
[0007]在所述方法中,所述調節pH值具體可為采用鹽酸進行pH調節;所述震蕩的速度具 體為220rpra ;在所述冷卻至4±rC前還可包括靜置lmin的步驟。
[0008]在所述方法中,所述豬配合飼料是根據豬的飼養標準(營養需要),將多種飼料 (包括添加劑)按一定比例和規定的加工工藝配制成的均勻一致、營養價值完全的飼料產 品。在本發明的一個實施例中,所述豬配合飼料為生豬育肥豬 (25?6〇kg)階段配合飼 料。具體的,其原料組成為:玉米67_ 6%、豆柏lg· 6%、魚粉1 %、小麥麩4%、棉籽柏4%、 食鹽0_ 4%、磷酸氫鈣L 4%、石粉〇· 75%、賴氨酸〇· 25%、復合預混料1% (各百分含量均 為質量百分含量)。其中,每千克所述復合預混料的組成為:維生素 Α3· 3χ 1〇5ιυ,維生素 D 3_3X104IU,維生素 E 2.4X103IU,維生素 K 3〇75mg,維生素 BJSOmg,維生素 B2525mg,維 生素 Bs225mg,維生素 B123mg,泛酸15〇〇mg,尼克酸2250mg,生物素8mg,葉酸45mg,錳6g,鐵 15g,鋅 15g,Cu 900mg,碘 21mg,硒 45mg。
[0009]本發明所提供的制備人工模擬豬小腸消化液的方法,具體可包括如下步驟:向權 利要求1所述方法中離心所得的沉淀中加入所述沉淀3?3. 5倍(如3倍)體積的人工小腸 液,并調節pH值為6· 8 ± 0· 2, 39 ± 1 °C振蕩孵育1?2小時(如1小時),冷卻至4 ± 1? (如 4°C ),6000?9000g(如9000g)4±lt;(如4Γ )離心5?10分鐘(如10分鐘),移取上 清液即為人工模擬豬小腸消化液;
[0010]所述人工小腸液的溶劑為水,溶質及濃度為:磷酸二氫鉀6. 8g/L;胰蛋白酶 6000U/L ;胰淀粉酶70000U/L ;胰脂肪酶40000U/L ;豬膽鹽3g/L ;采用氫氧化鈉調節溶液PH 至 6. 8±0. 2。
[0011]所述豬膽鹽含量以膽酸計彡60%,酸值(mg ΚΟΗ/g)彡145. 0。
[0012]在所述方法中,所述震蕩的速度具體為220rpm ;在所述冷卻至4±1? (如4? ) 前還可包括靜置lmin的步驟;用于調節所述人工小腸液ΡΗ的氫氧化鈉具體為〇. m氫氧化 鈉。
[0013]本發明的第二個目的是提供一種人工模擬豬胃消化液和人工模擬豬小腸消化液。
[0014] 本發明所提供的人工模擬豬胃消化液具體為采用如上所述方法制備得到的人工 模擬豬胃消化液。
[0015] 本發明所提供的人工模擬豬小腸消化液具體為采用如上所述方法制備得到的人 工模擬豬小腸消化液。
[0016]本發明的第三個目的是提供所述人工模擬豬胃消化液和/或所述人工模擬豬小 腸消化液的用途。
[0017]本發明所提供的用途具體為所述人工模擬豬胃消化液和/或所述人工模擬豬小 腸消化液在測定霉菌毒素吸附劑對霉菌毒素的吸附率中的應用。
[0018] 本發明的第四個目的是提供一種測定霉菌毒素吸附劑對霉菌毒素的吸附率的方 法。
[0019] 本發明所提供的測定霉菌毒素吸附劑對霉菌毒素的吸附率的方法,具體可包括如 下步驟:
[0020] (1)分別進行如下實驗組和基質校正組:
[0021] 實驗組:按照4mg :5mL的比例取待測霉菌毒素吸附劑和人工模擬豬消化液(所述 人工模擬豬胃消化液或所述人工模擬豬小腸消化液),與霉菌毒素溶液混合,于 39±rc震 蕩孵育1?2小時(如1小時),孵育后冷卻至4±l°c (如4°C );
[0022] 基質校正組:與所述實驗組相比,缺少所述待測霉菌毒素吸附劑,其余均與所述實 驗組相同;
[0023] (2)將經步驟(1)處理后的所述實驗組和所述基質校正組的體系分別進行離心、 取上清液檢測所述霉菌毒素的濃度;
[0024]將所述實驗組的上清液中所述霉菌毒素的濃度記為Ceq ;將所述基質校正組的上 清液中所述霉菌毒素的濃度記為C。;
[0025] (3)按照如下公式計算所述霉菌毒素吸附劑在所述人工模擬豬消化液環境下對所 述霉菌毒素的吸附率:
[0026] Y =(卜Ceq/C。)X 100°%,式中Y即為所述霉菌毒素吸附劑在所述人工模擬豬消化 液環境下對所述霉菌毒素的吸附率。
[0027]在所述方法的步驟(1)中,所述待測霉菌毒素吸附劑、所述人工模擬豬消化液和 所述霉菌毒素的配比具體可為4mg :5mL :8〇Ong ;所述震蕩的速度具體為220rpm。
[0028]在所述方法的步驟⑵中,所述離心具體為18000?20000g(如 18928g)4±rC (如 4。(:)離心 5 ?lOmin(如 5min)。
[0029]在所述方法的步驟(2)中,檢測所述上清液中霉菌毒素的濃度是利用液相色 譜-串聯質譜儀進行檢測的。
[0030]其中,色譜條件為:C18色譜柱;流動相由流動相A和流動相B組成;流動相A為 0. 2mM乙酸銨水溶液,流動相b為0· 1%甲酸-甲醇(含有〇· 1%體積分數甲酸的甲醇溶 液)。洗脫方式為梯度洗脫;所述梯度洗脫具體為:〇?〇· 5min,90% A ;0. 5?1. 5min,70% Α ;1· 5 ?2. 5min,40% Α ;2· 5 ?3· 5min,30% Α ;3· 5 ?4. 0min,20% Α ;4· 0 ?4· 2min,90% A ;4. 2?5· 0min,90% Α(梯度洗脫中各百分含量均為體積百分含量)。另外,柱溫40°C、進 樣量 5 μ L 流速 0. 40mL/min。
[0031]質譜條件為:電噴霧離子源(ESI),離子源溫度為15(TC,脫溶劑溫度為45(TC,脫 溶劑氣和錐孔氣均為N2,脫溶劑氣流速為9〇OL/h,錐孔氣流速為20L/h。AFBi和DON采用正 離子監測,ZEA采用負離子監測方式,毛細管電壓為〇.75kV。采用MRM多反應監測方式檢 測,定量監測離子317. 22 > 175· 06 (錐孔電壓38V,碰撞能量26eV),定量監測離子317. 22 > 187· 12 (錐孔電壓38V,碰撞能量22eV)。
[0032] 本發明的第五個目的是提供一種用于測定霉菌毒素吸附劑對霉菌毒素的吸附率 的廣品。
[0033]本發明所提供的用于測定霉菌毒素吸附劑對霉菌毒素的吸附率的產品,包含所述 人工模擬豬胃消化液和/或所述人工模擬豬小腸消化液。
[0034] 在如上所述的應用、方法或產品中,所述霉菌毒素均具體可為玉米赤霉烯酮;所述 霉菌毒素吸附劑均可為蒙脫石類霉菌毒素吸附劑或酵母細胞壁類霉菌毒素吸附劑。
[0035]本發明的第六個目的是提供人工胃液和人工小腸液。
[0036]本發明所提供的人工胃液,溶劑為水,溶質及濃度為:NaCl 2g/L;胃蛋白酶 12160U/L ;HC1 0.084mol/L〇
[0037]本發明所提供的人工小腸液,溶劑為水,溶質及濃度為:磷酸二氫鉀6. 8g/L ;胰蛋 白酶6000U/L ;胰淀粉酶70000U/L ;胰脂肪酶40000U/L ;豬膽鹽3g/L ;采用氫氧化鈉(如 0. 1M氫氧化鈉)調節溶液pH至6. 8 ±0. 2。
[0038]所述人工胃液在制備所述人工模擬豬胃消化液中的應用也屬于本發明的保護范 圍。
[0039] 所述人工小腸液在制備所述人工模擬豬小腸消化液中的應用也屬于本發明的保 護范圍。
[0040]實驗證明,本發明所提供的人工模擬豬胃消化液和人工模擬豬小腸消化液用于評 價霉菌毒素吸附的吸附率,不但pH值、溫度等條件與豬消化道一致,而且通過對特定飼料 的消化引入了飼料中的可溶性成分,與實際生產中豬消化液成分比較一致,遠遠超過磷酸 鹽緩沖體系對豬消化道的模擬水平。在霉菌毒素吸附劑評價時,只需向人工模擬豬胃消化 液和小腸液中按相應比例分別添加霉菌毒素吸附劑和目標霉菌毒素,經振蕩、孵育、離心 后,測定上清液中霉菌毒素濃度與初始濃度,g卩可計算出霉菌毒素吸附劑對特定霉菌毒素 的吸附率,從而對霉菌毒素吸附劑的效果做出評價。本發明可以對霉菌毒素吸附劑應用于 豬的吸附率進行科學、客觀、準確的體外評價,方法簡單、快速。 '、
【具體實施方式】
[0041] 下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明,均為常規方法。
[0042] 下述實施例中所用的材料、試劑等,如無特殊說明,均可從商業途徑得到。
[0043]胃蛋白酶:國藥集團化學試劑有限公司產品,Cas號:9001-75-6。其酶活為3800U/ g°
[0044]胰酶:國藥集團化學試劑有限公司公司產品,Cas號:8049-47-6。其酶活為胰蛋白 酶600U/g ;胰淀粉酶7000U/g ;胰脂肪酶4000U/g。
[0045]豬膽鹽:國藥集團化學試劑有限公司公司產品,Cas號:8008-63-7。含量彡60.0% (以膽酸計);酸值彡145· 0(K0Hmg/g);灼燒殘渣彡20. 0%。
[0046]豬配合飼料:根據國家標準《仔豬、生長肥育豬配合詞料》(GB/T 5915-2008)自行 配制,配方為:玉米67. 6%、豆粕19. 6%、魚粉1 %、小麥麩4%、棉籽柏4%、食鹽0· 4%、磷 酸氫鈣1· 4%、石粉0. 75%、賴氨酸0· 25%、復合預混料1% (各百分含量均為質量百分含 量)。其中,每千克所述復合預混料的組成為:維生素 A 3. 3X105IU,維生素 D 3.3X104IU, 維生素 Ε 2·4Χ103?υ,維生素 K 3075mg,維生素 BJSOmg,維生素 B2525mg,維生素 B6225mg, 維生素 B123mg,泛酸1500mg,尼克酸2250mg,生物素8mg,葉酸45mg,錳6g,鐵15g,鋅15g,Cu 900mg,碘 21mg,硒 45mg。
[0047] 實施例1、人工模擬豬胃消化液和人工模擬豬小腸消化液的制備
[0048] 一、人工胃液和人工小腸液的配制
[0049] 1、人工胃液的配制
[0050] 稱取氯化鈉2§,胃蛋白酶3_28(相當于121601]),量取質量分數為36.5%濃鹽酸 (摩爾濃度相當于12mol/L)7mL,加蒸餾水至lOOOmL,混勻,制得所需溶液,4°C保存。
[0051] 2、人工小腸液的配制
[0052] 稱取磷酸二氫鉀6. 8g,加蒸餾水500mL使溶解,用0· lmol/L氫氧化鈉溶液調節pH 至6. 8,稱取胰酶10g (相當于胰蛋白酶6000U/L ;胰淀粉酶70000U/L ;胰脂肪酶40000U/L), 加蒸餾水使溶解,將兩液混合后,另加3g豬膽鹽,加蒸餾水稀釋至lOOOmL,制得所需溶液, 4°C保存。
[0053] 二、人工模擬豬胃消化液和人工模擬豬小腸消化液的配制
[0054] 1、人工模擬豬胃消化液的配制
[0055] l〇g豬配合飼料中添加30ml步驟一配制的人工胃液,用稀鹽酸調節pH值至1.5? 2. 0,置于39 土 1°C恒溫振蕩器中220rpm孵育lh,靜置lmin并迅速冷卻至4土 1?,轉移上清 液并10000rpm(相當于9000g)4°C離心lOmin,收集上清液(即為人工模擬豬胃消化液)于 1000mL試劑瓶,4 °C保存待用。
[0056] 2、人工模擬豬小腸消化液的配制
[0057]向以上步驟1制備人工模擬豬胃消化液所得的沉淀中加入3〇ml步驟一配制的人 工小腸液,置于39土 1°C恒溫振蕩器中22〇rpm孵育lh,靜置lmin并迅速冷卻至4±1?,轉 移上清液并10000rpm(相當于9000g)4t:離心lOmin,收集上清液(即為人工模擬豬小腸消 化液)于lOOOmL試劑瓶,4°C保存待用。
[0058]實施例2、人工模擬豬胃和小腸消化液評價霉菌毒素吸附劑對霉菌毒素的體外吸 附率
[0059] 供試霉菌毒素:玉米赤霉烯酮,CAS號:17924-92_4,純度彡99 %,以色列 FERMENTEK 公司。
[0060]供試霉菌毒素吸附劑:市售8種蒙脫石類霉菌毒素吸附劑(表1和表2中的蒙脫 石1#至蒙脫石8#)和5種酵母細胞壁類霉菌毒素吸附劑(表!和表2中的酵母細胞壁1# 至酵母細胞壁5#),其中8種蒙脫石類霉菌毒素吸附劑購自浙江三鼎科技有限公司、攀枝花 興加環保技術有限公司、赤峰和正美化工有限公司、赤峰市物華天寶礦物材料有限公司、浙 江豐虹新材料股份有限公司、壽光中聯精細蒙脫石有限公司、內蒙古天源蒙脫石開發有限 公司、內蒙古潤隆化工有限責任公司; 5種酵母細胞壁類霉菌毒素吸附劑購自廣東江門生 物技術開發中心有限公司、北京優利保生物科技與技術有限責任公司、巴西ICC公司、上海 滬鼎生物科技有限公司、安琪酵母股份有限公司。
[0061] -、人工模擬豬胃消化液評價霉菌毒素吸附劑對玉米赤霉烯酮的體外吸附率
[0062]移取玉米赤霉烯酮的乙腈溶液(2〇yg/mL)40yL于旋蓋塑料離心管中,4(TC 氮氣吹干,加入5mL實施例1配制的人工模擬豬胃消化液復溶,再向其中準確加入供試 霉菌毒素吸附劑4mg,渦旋混勻lmin,迅速水浴加熱至39±rC,然后置于恒溫振蕩器中 39±l°C,220rpm震蕩孵育lh,立即取出冷卻靜置至4°C。取lmL上清液至1. 5mL離心管中, 13000rpm (相當于18928g) 4°C離心5min,取50 μ L上清液與450 μ L進樣液(水-乙腈-甲 酸,95:4. 9:0. 1,V/V/V)渦旋混勻,應用液相色譜-串聯質譜儀測定平衡后體系中游離玉米 赤霉烯酮的濃度。
[^63]其中,應用液相色譜-串聯質譜儀測定平衡后體系中游離玉米赤霉烯酮的濃度時 采用的是外標法。具體的色譜和質譜條件如下:色譜條件為Acquity UPLC BEH C18色譜 柱(2. lmmX 100mm,1. 7 μ m,美國 Waters 公司);柱溫 40°C,流速 0. 40mL/min,進樣量 5 μ L。 流動相Α為0· 2mM乙酸銨水溶液,流動相Β為〇. 1 %甲酸-甲醇(即甲酸和甲醇的體積比 為 0· 1:99. 9)。梯度洗脫:〇 ?〇. 5min,90% A ;0. 5 ?1. 5min,70% Α ;1· 5 ?2. 5min,40% Α ;2· 5 ?3. 5min,30% A ;3. 5 ?4. Omin,20% A ;4. 0 ?4. 2min,90% Α ;4· 2 ?5. Omin,90% A(梯度洗脫中各百分含量均為體積百分含量)。質譜條件為:電噴霧離子源(ESI),離子源 溫度為150°C,脫溶劑溫度為45(TC,脫溶劑氣和錐孔氣均為N 2,脫溶劑氣流速為900L/h,錐 孔氣流速$ 20L/h。AFBi和DON采用正離子監測,ZEA采用負離子監測方式,毛細管電壓為 0· 75kV。采用MRM多反應監測方式檢測,定量監測離子317. 22 > 175. 06 (錐孔電壓38V,碰 撞能量26eV),定量監測離子317. 22 > 187. 12(錐孔電壓38V,碰撞能量22eV)。
[0064] 每種吸附劑5個平行,并設不添加霉菌毒素吸附劑的基質校正組(其余操作參見 上文)。
[0065] 吸附率(% )的計算公式為:
[0066] Y = α-Ceq/C。)X 100%,式中Y為吸附率,c。為毒素初始(即基質校正組)濃度, Ceq為平衡后體系中游離毒素的濃度。
[0067]實驗同時設置以等量取自飼喂所述豬配合飼料的真正的豬胃消化液替代上述方 法中實施例1配制的人工模擬豬胃消化液的對照試驗,以便本發明所提供的人工模擬豬胃 消化液進行驗證。
[0068] 結果顯示:應用實施例1配制的人工模擬豬胃消化液對市售8種蒙脫石類吸附劑 和5種酵母細胞壁類霉菌毒素吸附劑進行評價,2類產品在人工模擬豬胃消化液中的玉米 赤霉烯酮吸附率分別為13. 67%?29· 97%和18· 56%?38. 96% (表1)。該評價結果與采 用豬實際豬胃消化液測得的吸附率基本一致,沒有統計學意義上的顯著差異,表明實施例i 配制的人工模擬豬胃消化液適于霉菌毒素吸附劑吸附率的評價。
[0069] 表1霉菌毒素吸附劑在人工模擬和實際豬胃液中對玉米赤霉烯酮的吸附率(n二 5)
[0070]
【權利要求】
1. 一種制備人工模擬豬胃消化液的方法,包括如下步驟:將豬配合飼料和人工胃液按 照lg :3?3. 5mL的配比混合,并調節pH值至1. 5?2. 0,39±1°C振蕩孵育1?2小時,冷 卻至4± 1 °C,8000-9000g 4± 1 °C離心5?10分鐘,移取上清液即為人工模擬豬胃消化液; 所述人工胃液的溶劑為水,溶質及濃度為:NaCl 2g/L ;胃蛋白酶12160U/L ; HC10. 084mol/L。
2. -種制備人工模擬豬小腸消化液的方法,包括如下步驟:向權利要求1所述方法中 離心所得的沉淀中加入所述沉淀3?3. 5倍體積的人工小腸液,并調節pH值為6. 8±0. 2, 39 ± 1 °C振蕩孵育1?2小時,冷卻至4± 1 °C,8000-9000g 4± 1 °C離心5?10分鐘,移取上 清液即為人工模擬豬小腸消化液; 所述人工小腸液的溶劑為水,溶質及濃度為:磷酸二氫鉀6. 8g/L ;胰蛋白酶6000U/ L ;胰淀粉酶70000U/L ;胰脂肪酶40000U/L ;豬膽鹽3g/L ;采用氫氧化鈉調節溶液pH至 6. 8±0. 2。
3. 利用權利要求1所述方法制備得到的人工模擬豬胃消化液。
4. 利用權利要求2所述方法制備得到的人工模擬豬小腸消化液。
5. 權利要求3所述的人工模擬豬胃消化液和/或權利要求4所述的人工模擬豬小腸消 化液在測定霉菌毒素吸附劑對霉菌毒素的吸附率中的應用。
6. -種測定霉菌毒素吸附劑對霉菌毒素的吸附率的方法,包括如下步驟: (1) 分別進行如下實驗組和基質校正組: 實驗組:按照4mg :5mL的比例取待測霉菌毒素吸附劑和人工模擬豬消化液,與霉菌毒 素溶液混合,于39±1°C震蕩孵育1?2小時,孵育后冷卻至4±1°C ; 基質校正組:與所述實驗組相比,缺少所述待測霉菌毒素吸附劑,其余均與所述實驗組 相同; 所述人工模擬豬消化液為權利要求3所述的人工模擬豬胃消化液或權利要求4所述的 人工模擬豬小腸消化液; (2) 將經步驟(1)處理后的所述實驗組和所述基質校正組的體系分別進行離心、取上 清液檢測所述霉菌毒素的濃度; 將所述實驗組的上清液中所述霉菌毒素的濃度記為Ceq ;將所述基質校正組的上清液 中所述霉菌毒素的濃度記為Q; (3) 按照如下公式計算所述霉菌毒素吸附劑對所述霉菌毒素的吸附率: Y = (l-Ceq/Q) X100%,式中Y即為所述霉菌毒素吸附劑對所述霉菌毒素的吸附。
7. -種用于測定霉菌毒素吸附劑對霉菌毒素的吸附率的產品,包含權利要求3所述的 人工模擬豬胃消化液和/或權利要求4所述的人工模擬豬小腸消化液。
8. 根據權利要求5-7中任一所述的應用、方法或產品,其特征在于:所述霉菌毒素為玉 米赤霉烯酮。
9. 人工胃液,其特征在于:所述人工胃液的溶劑為水,溶質及濃度為:NaCl 2g/L;胃蛋 白酶 12160U/L;HC1 0.084mol/L;或 人工小腸液,其特征在于:所述人工小腸液的溶劑為水,溶質及濃度為:磷酸二氫鉀 6. 8g/L ;胰蛋白酶6000U/L ;胰淀粉酶70000U/L ;胰脂肪酶40000U/L ;豬膽鹽3g/L ;采用氫 氧化鈉調節溶液pH至6. 8 ±0. 2。
10.權利要求9所述的人工胃液在制備權利要求3所述的人工模擬豬胃消化液中的應 用;或 權利要求10所述的人工小腸液在制備權利要求4所述的人工模擬豬小腸消化液中的 應用。
【文檔編號】G01N30/02GK104297372SQ201410524274
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年10月8日 優先權日:2014年10月8日
【發明者】王瑞國, 蘇曉鷗, 樊霞, 王培龍, 張維, 高忠武, 張瑜 申請人:中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所