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一種穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供了一種穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒；由試劑R1及試劑R2組成，所述試劑R1的各組分為：緩沖液，乙二胺四乙酸二鈉，乙酸鎂四水，蔗糖，除干擾劑，色原，穩(wěn)定劑，防腐劑，所述試劑R2的各組分為：緩沖液，乙二胺四乙酸二鈉，4-氨基安替比林，過(guò)氧化物酶，尿酸酶，穩(wěn)定劑，防腐劑。本發(fā)明利用尿酸酶還原尿酸的比色法來(lái)測(cè)定血尿酸含量，此法特異性強(qiáng)，靈敏度明顯高于化學(xué)法，可以用于全自動(dòng)生化儀，更適合臨床使用。本發(fā)明在試劑中加入了除干擾劑，有效的去除了血清中抗壞血酸的干擾，使得結(jié)果更為準(zhǔn)確。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)免疫體外診斷領(lǐng)域，具體地，涉及一種穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒。

【背景技術(shù)】
[0002]生物細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)DNA (脫氧核糖核酸)和細(xì)胞質(zhì)中RNA (核糖核酸)由幾十萬(wàn)、幾百萬(wàn)甚至幾千萬(wàn)個(gè)核苷酸組成。反過(guò)來(lái)當(dāng)核酸氧化分解后的產(chǎn)物之一就是嘌呤，所以說(shuō)嘌呤是細(xì)胞的組成成分。體內(nèi)的老舊細(xì)胞，還有食物，尤其是富含嘌呤的食物(如動(dòng)物內(nèi)臟、海鮮等)在體內(nèi)新陳代謝過(guò)程中，其核酸氧化分解產(chǎn)物就有嘌呤(這種內(nèi)源性的嘌呤占總嘌呤的80%)。體內(nèi)產(chǎn)生嘌呤后,會(huì)在肝臟中再次氧化為(2,6,8—三氧嘌呤)又稱(chēng)為尿酸。2/3尿酸經(jīng)腎臟隨尿液排出體外，1/3通過(guò)糞便和汗液排出。可見(jiàn)，嘌呤是核酸的氧化分解的代謝產(chǎn)物，而尿酸是嘌呤的代謝最終產(chǎn)物，其中的嘌呤環(huán)沒(méi)有解開(kāi)。
[0003]正常情況下，體內(nèi)的尿酸大約有1200毫克，每天新生成約600毫克，同時(shí)排泄掉600毫克，處于平衡的狀態(tài)。但如果體內(nèi)產(chǎn)生過(guò)多來(lái)不及排泄或者尿酸排泄機(jī)制退化，則體內(nèi)尿酸滯留過(guò)多，當(dāng)血液尿酸濃度大于7毫克/分升，導(dǎo)致人體體液變酸，影響人體細(xì)胞的正常功能，長(zhǎng)期置之不理將會(huì)引發(fā)痛風(fēng)。另外過(guò)于疲勞或是休息不足亦可導(dǎo)致代謝相對(duì)遲緩導(dǎo)致痛風(fēng)發(fā)病。
[0004]血中尿酸全部從腎小球?yàn)V過(guò)，其中98%在近曲小管中段又被分泌到腎小球腔內(nèi)，然后50%重吸收的尿酸在近曲小管中段又被分泌到腎小管腔內(nèi)，在近曲小管直段又有40%?44%被重吸收，只有6%?10%尿酸排出。正常人體內(nèi)尿酸的生成與排泄速度較恒定。體液中尿酸含量變化，可以充分反映出人體內(nèi)代謝、免疫等機(jī)能的狀況。
[0005]診斷方法:經(jīng)典的血尿酸測(cè)定方法是化學(xué)法，即利用磷鎢酸能被尿酸鹽還原為藍(lán)色的磷鎢酸復(fù)合物這一原理，通過(guò)光電比色結(jié)果，來(lái)判斷血尿酸含量。此法沿用已久，但特異性差，靈敏度欠佳。目前較為先進(jìn)的血尿酸測(cè)定法是高壓液相層析(HPL.C)和質(zhì)譜法，此法靈敏度最高，特異性強(qiáng)，所得數(shù)值精確，但此法需要使用獨(dú)立的儀器，操作較為繁瑣。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒。本發(fā)明利用尿酸酶還原尿酸的比色法來(lái)測(cè)定血尿酸含量，此法特異性強(qiáng)，靈敏度明顯高于化學(xué)法，可以用于全自動(dòng)生化儀，更適合臨床使用。本發(fā)明在試劑中加入了除干擾劑，有效的去除了血清中抗壞血酸的干擾，使得結(jié)果更為準(zhǔn)確。
[0007]本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
[0008]本發(fā)明涉及一種穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒，由試劑Rl及試劑R2組成，所述試劑Rl的各組分及濃度為:
[0009]緩沖液0.5?100 mmol/L，
乙二胺四乙酸二鈉0.1?10g/L，
乙酸鎂四水I?10g/L，
蔗糖I?10g/L，
除干擾劑O I?10g/L，
色原I?10g/L,
穩(wěn)定劑0.1?10 g/L，
防腐劑0.1?10 g/L,
[0010]所述試劑R2的各組分及濃度為:
[0011]
緩沖液0.5?1U0 mmol/L,
乙二胺四乙酸二鈉U I?10g/L，
4-氨基安替比林I?10g/L，
過(guò)氧化物酶0.1?5KU/L，
尿酸酶0.1?5KU/L，
穩(wěn)定劑0.1?10 g/L,
防腐劑0.1?10 g/L ο
[0012]優(yōu)選地，所述Rl試劑的pH為6.0-8.0。
[0013]優(yōu)選地，所述試劑Rl中的緩沖液為甘氨酸緩沖液、Tris緩沖液、甘氨酸-NaOH緩沖液、HEPES緩沖液、Good’ s緩沖液中的一種或幾種。
[0014]優(yōu)選地，所述試劑Rl中的除干擾劑為抗壞血酸鈉氧化酶、亞鐵氰化鉀、磷鑰酸銨或乙二胺中的一種或幾種。
[0015]優(yōu)選地，所述試劑Rl中的色原為T(mén)00S、MEHA、TBHB中的一種或幾種。
[0016]優(yōu)選地，所述試劑Rl中的穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖或螯合劑中的一種。
[0017]優(yōu)選地，所述試劑Rl中的防腐劑為疊氮鈉或proclin 300。
[0018]優(yōu)選地，所述試劑R2中的緩沖液PH為6.0-8.0，所述試劑R2中的緩沖液為甘氨酸緩沖液、Tris緩沖液、甘氨酸-NaOH緩沖液、HEPES緩沖液或Good’ s緩沖液中的一種或幾種，
[0019]優(yōu)選地，所述試劑R2中的穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖或螯合劑中的一種。
[0020]優(yōu)選地，所述試劑R2中的防腐劑為疊氮鈉或proclin 300。
[0021]本發(fā)明試劑盒檢測(cè)尿酸的反應(yīng)原理為:第一反應(yīng):首先在除干擾劑的作用下，除去樣本中的抗壞血酸；第二反應(yīng):然后尿酸在尿酸酶的作用下，生成過(guò)氧化氫；同時(shí)過(guò)氧化氫、4-氨基安替比林和色原在過(guò)氧化物酶的作用下，生成醌系有色素，最后通過(guò)比色測(cè)定尿酸的含量。
[0022][第一反應(yīng)]
[0023]

【權(quán)利要求】
1.一種穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒，其特征在于，由試劑Rl及試劑R2組成，所述試劑Rl的各組分及濃度為:
所述試劑R2的各組分及濃度為:
2.如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述Rl試劑的PH為6.0_8.0 ο
3.如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑Rl中的緩沖液為甘氨酸緩沖液、Tris緩沖液、甘氨酸-NaOH緩沖液、HEPES緩沖液、Good’ s緩沖液中的一種或幾種。
4.如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑Rl中的除干擾劑為抗壞血酸鈉氧化酶、亞鐵氰化鉀、磷鑰酸銨或乙二胺中的一種或幾種。
5.如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑Rl中的色原為T(mén)OOS、MEHA、TBHB中的一種或幾種。
6.如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑Rl中的穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖或螯合劑中的一種。
7.如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑Rl中的防腐劑為疊氮鈉或proclin 300。
8.如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑R2中的緩沖液PH為6.0-8.0，所述試劑R2中的緩沖液為甘氨酸緩沖液、Tris緩沖液、甘氨酸-NaOH緩沖液、HEPES緩沖液或Good’ s緩沖液中的一種或幾種。
9.如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑R2中的穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖或螯合劑中的一種。
10.如權(quán)利要求1所述的穩(wěn)定的尿酸檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑R2中的防腐劑為疊氮鈉或proclin 300。
【文檔編號(hào)】G01N21/78GK104198473SQ201410401474
【公開(kāi)日】2014年12月10日 申請(qǐng)日期:2014年8月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月14日
【發(fā)明者】李偉奇, 李 杰, 房君江, 張秀文, 林清玉 申請(qǐng)人:上海睿康生物科技有限公司