鹽酸氨基葡萄糖原料的含量測定方法
【專利摘要】本發明公開一種鹽酸氨基葡萄糖原料的含量測定方法。該方法采用高效液相-蒸發光散射檢測法，色譜柱：NH2柱，5um，250×4.6um，流動相組成為乙腈：水=（8-6:2.5-3.5），流速為0.8-1.2ml/min，柱溫為30-40℃，檢測器為AlltechELSD2000，漂移管溫度為65-75℃，氮氣壓力為0.6-3.0MPA；吸取對照貯備液、供試品溶液、空白溶劑注入液相色譜儀，記錄色譜圖。計算標準品溶液濃度的值為X與相應峰面積值為Y，進行線性擬合，得出線性回歸方程，線性范圍為0.2-1.2mg/ml。
【專利說明】鹽酸氨基葡萄糖原料的含量測定方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種藥物的質量控制方法，特別涉及鹽酸氨基葡萄糖原料的含量測定方法。
【背景技術】
[0002]鹽酸氨基葡萄糖膠囊原國家標準WSl- (X-090) -2005Z采用紫外可見分光光度法測定，該法是通過測定衍生化反應生成物含量間接測定鹽酸氨基葡萄糖的含量，但測定的重復性較差。樣品處理需衍生化反應，操作較為繁瑣，且樣品溶液的穩定性不高，重復性不強。
專利申請號:201210012194.8鹽酸氨基葡萄糖原料的含量測定方法公示了一種鹽酸氨基葡萄糖原料的測定方法，該方法使用乙腈、水和三氟乙酸為流動相，使用C18為填料的色譜柱。該方法流動相中的三氟乙酸具有腐蝕性，并且色譜圖中峰保留時間較短，分離效果較差，該方法的線性范圍為0.8^1.2mg/ml，測量濃度范圍窄。
[0003]目前鹽酸氨基葡萄糖原料的質量控制方法尚不完善。
【發明內容】
[0004]本發明目的在于提供鹽酸氨基葡萄糖原料的含量測定方法。
[0005]本發明的目的是通過如下技術方案實現。
[0006]本發明鹽酸氨基葡萄糖原料的含量測定方法，該方法包括如下步驟:
色譜柱NH2柱，5um，250X4.6um，流動相組成為乙腈:水=(8-6:2.5-3.5)，流速為
0.8-1.2ml/min，柱溫為 30_40°C，檢測器為 Alltech ELSD 2000，漂移管溫度為 65_75°C，氮氣壓力為0.6-3.0ΜΡΑ。
[0007]供試品溶液的制備:取相當于IOOmg鹽酸氨基葡萄糖的供試品，精密稱定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，制得濃度lmg/ml的溶液，經0.45um的微孔濾膜濾過，精密量取續濾液作為供試品溶液。
[0008]對照溶液的制備:取鹽酸氨基葡萄糖對照品適量，精密稱定，從供試品溶液制備法的濃度1.0mg/ml的溶液作為對照品溶液，2mg/ml對照品溶液作為貯備液備用。
[0009]空白溶劑的制備:以溶解供試品、對照溶液的溶劑作為空白。
[0010]在上述色譜條件下，精密吸取對照溶液20ul、供試品溶液20ul、空白溶劑20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算標準品溶液濃度的值與相應峰面積值的線性回歸方程，相關系數而應不小于0.99;精密吸取供試品溶液20ul注入液相色譜儀，供試品溶液色譜圖中，在與對照品溶液相同保留時間處有相同的峰，峰形對稱，理論塔板數2000以上；陰性輔料樣品溶液色譜圖，無與鹽酸氨基葡萄糖對照品相同的峰出現，即陰性無干擾:本發明供試品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl應為標示量的99%-101%，濃度范圍為0.2-1.2mg/ml。
[0011]本發明鹽酸氨基葡萄糖原料含量測定的優選方法如下:
色譜柱NH2柱,5um, 250X4.6mm,流動相組成為乙腈:水(7:3),流速為1.0ml/min,柱溫為35°C，檢測器為Alltech ELSD 2000，漂移管溫度為70°C，氮氣壓力為1.0ΜΡΑ。
[0012]供試品溶液的制備:取相當于IOOmg鹽酸氨基葡萄糖的供試品，精密稱定，置IOOml容量瓶中，加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，制得濃度lmg/ml的溶液，經0.45um的微孔濾膜濾過，精密量取續濾液作為供試品溶液。
[0013]對照溶液的制備:取鹽酸氨基葡萄糖對照品適量，精密稱定，從供試品溶液制備法的濃度1.0mg/ml的溶液作為對照品溶液。2mg/ml對照品溶液作為貯備液備用。
[0014]空白溶劑的制備:以溶解供試品、對照溶液的溶劑作為空白。
[0015]在上述色譜條件下，精密吸取對照溶液20ul、供試品溶液20ul、空白溶劑20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算標準品溶液濃度的值與相應峰面積值的線性回歸方程，相關系數而應不小于0.99;精密吸取供試品溶液20ul注入液相色譜儀，供試品溶液色譜圖中，在與對照品溶液相同保留時間處有相同的峰，峰形對稱，理論塔板數2000以上；陰性輔料樣品溶液色譜圖，無與鹽酸氨基葡萄糖對照品相同的峰出現，即陰性無干擾:本發明供試品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl應為標示量的99%-101%，濃度范圍為0.2-1.2mg/ml。
[0016]色譜柱NH2柱，5um,250X4.6mm,流動相組成為乙腈:水(7.5:3),流速為1.2ml/min，柱溫為30°C，檢測器為Alltech ELSD 2000，漂移管溫度為75°C，氮氣壓力為1.2MPA。
[0017]供試品溶液的制備:取相當于IOOmg鹽酸氨基葡萄糖的供試品，精密稱定，置IOOml容量瓶中，加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，制得濃度lmg/ml的溶液，經0.45um的微孔濾膜濾過，精密量取續濾液作為供試品溶液。
[0018]對照溶液的制備:取鹽酸氨基葡萄糖對照品適量，精密稱定，從供試品溶液制備法的濃度1.0mg/ml的溶液作為對照品溶液。2mg/ml對照品溶液作為貯備液備用。
[0019]空白溶劑的制備:以溶解供試品、對照溶液的溶劑作為空白。
[0020]在上述色譜條件下，精密吸取對照溶液20ul、供試品溶液20ul、空白溶劑20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算標準品溶液濃度的值與相應峰面積值的線性回歸方程，相關系數而應不小于0.99;精密吸取供試品溶液20ul注入液相色譜儀，供試品溶液色譜圖中，在與對照品溶液相同保留時間處有相同的峰，峰形對稱，理論塔板數2000以上；陰性輔料樣品溶液色譜圖，無與鹽酸氨基葡萄糖對照品相同的峰出現，即陰性無干擾:本發明供試品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl應為標示量的99%-101%，濃度范圍為0.2-1.2mg/ml。
[0021]色譜柱NH2柱，5um,250X4.6mm,流動相組成為乙腈:水(6.5:3),流速為0.9ml/min，柱溫為40°C，檢測器為Alltech ELSD 2000，漂移管溫度為72°C，氮氣壓力為1.4MPA。
[0022]供試品溶液的制備:取相當于IOOmg鹽酸氨基葡萄糖的供試品，精密稱定，置IOOml容量瓶中，加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，制得濃度lmg/ml的溶液，經0.45um的微孔濾膜濾過，精密量取續濾液作為供試品溶液。
[0023]對照溶液的制備:取鹽酸氨基葡萄糖對照品適量，精密稱定，從供試品溶液制備法的濃度1.0mg/ml的溶液作為對照品溶液。2mg/ml對照品溶液作為貯備液備用。
[0024]空白溶劑的制備:以溶解供試品、對照溶液的溶劑作為空白。
[0025]在上述色譜條件下，精密吸取對照溶液20ul、供試品溶液20ul、空白溶劑20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算標準品溶液濃度的值與相應峰面積值的線性回歸方程，相關系數而應不小于0.99;精密吸取供試品溶液20ul注入液相色譜儀，供試品溶液色譜圖中，在與對照品溶液相同保留時間處有相同的峰，峰形對稱，理論塔板數2000以上；陰性輔料樣品溶液色譜圖，無與鹽酸氨基葡萄糖對照品相同的峰出現，即陰性無干擾:本發明供試品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl應為標示量的99%-101%，濃度范圍為0.2-1.2mg/ml。
[0026]鹽酸氨基葡萄糖原料由如下方法制成:由鹽酸氨基葡萄糖為主藥，微晶纖維素為填充劑，經制粒，總混，原料填充，包裝即得。
[0027]本發明質量控制方法依據試驗結果表明其重復性良好，線性關系良好，精密度良好，溶液穩定性好，回收率良好，線性范圍廣。
[0028]【專利附圖】
【附圖說明】:
系統適用性對照品圖1 ;
系統適用性供試品圖2 ；
系統適用性空白圖3;
線性關系標準曲線圖4。
[0029]以下通過實施例形式再對本發明的內容作進一步詳細說明，但不應就此理解為本發明上述主題范圍內僅限于以下實施例。在不脫離本發明上述技術前提下，根據本領域普通技術知識和慣用手段做出的相應替換或變更的修改，均包括在本發明的范圍內。
[0030]實施例1
系統適用性實驗
色譜柱NH2柱,5um, 250X4.6mm,流動相組成為乙腈:水(7:3),流速為1.0ml/min,柱溫為35°C，檢測器為Alltech ELSD 2000，漂移管溫度為70°C，氮氣壓力為1.0MPA。
[0031]供試品溶液的制備:取相當于IOOmg鹽酸氨基葡萄糖的供試品，精密稱定，置IOOml容量瓶中，加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，制得濃度lmg/ml的溶液，經0.45um的微孔濾膜濾過，精密量取續濾液作為供試品溶液。
[0032]對照溶液的制備:取鹽酸氨基葡萄糖對照品適量，精密稱定，從供試品溶液制備法的濃度1.0mg/ml的溶液作為對照品溶液。2mg/ml對照品溶液作為貯備液備用。
[0033]空白溶劑的制備:以溶解供試品、對照溶液的溶劑作為空白。
[0034]在上述色譜條件下，精密吸取對照溶液20ul、供試品溶液20ul、空白溶劑20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
[0035]結果表明:供試品溶液色譜圖中，在與對照品溶液色譜相同保留時間處，有相同的峰，峰形對稱，理論塔板數為2000以上，空白溶劑色譜中，無與鹽酸氨基葡萄糖對照品相同的峰出現，即空白無干擾。結果見圖1、圖2、圖3。
[0036]實施例2 線性關系實驗
取對照品忙備液(2mg/ml),分別加水稀釋成0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.6mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml、1.2mg/ml不同濃度的對照品溶液，分別吸取各對照溶液20ul，注入液相色譜儀。計算濃度值與峰面積值的線性方程及回歸系數，結果見表I見圖4。
[0037]表I線性關系實驗數據表
【權利要求】
1.一種鹽酸氨基葡萄糖原料的質量檢測方法，其特征在于該方法包括如下步驟: 本發明鹽酸氨基葡萄糖原料的含量測定方法，該方法包括如下步驟: 1)色譜柱NH2柱，5um，250X4.6um，流動相組成為乙腈:水=(8-6:2.5-3.5)，流速為0.8-1.2ml/min，柱溫為 30_40°C，檢測器為 Alltech ELSD 2000，漂移管溫度為 65_75°C，氮氣壓力為0.6-3.0MPA ； 2)供試品溶液的制備:取相當于IOOmg鹽酸氨基葡萄糖的供試品，精密稱定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，制得濃度lmg/ml的溶液，經0.45um的微孔濾膜濾過，精密量取續濾液作為供試品溶液； 3)對照溶液的制備:取鹽酸氨基葡萄糖對照品適量，精密稱定，從供試品溶液制備法的濃度1.0mg/ml的溶液作為對照品溶液，2mg/ml對照品溶液作為貯備液備用； 4)空白溶劑的制備:以溶解供試品溶液、對照溶液的溶劑作為空白； 5)在上述色譜條件下，精密吸取對照溶液20ul、供試品溶液20ul、空白溶劑20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算標準品溶液濃度的值與相應峰面積值的線性回歸方程，相關系數而應不小于0.99;精密吸取供試品溶液20ul注入液相色譜儀，供試品溶液色譜圖中，在與對照品溶液相同保留時間處有相同的峰，峰形對稱，理論塔板數2000以上；空白溶劑溶液色譜圖，無與鹽酸氨基葡萄糖對照品相同的峰出現，即陰性無干擾:本發明供試品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl應為標示量的99%-101%，濃度范圍為0.2-1.2mg/ml ； 6)所述鹽酸氨基葡萄糖原料由如下方法制成:由鹽酸氨基葡萄糖為主藥，微晶纖維素為填充劑，經制粒，總混，壓原料，包裝即得。
2.權利要求1.所述的鹽酸氨基葡萄糖原料的質量檢測方法，其特征在于該方法包括如下步驟: 1)色譜柱NH2柱,5um,``250X4.6mm,流動相組成為乙腈:水(7:3),流速為1.0ml/min,柱溫為35°C，檢測器為Alltech ELSD 2000，漂移管溫度為70°C，氮氣壓力為1.0MPA ； 2)供試品溶液的制備:取相當于IOOmg鹽酸氨基葡萄糖的供試品，精密稱定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，制得濃度lmg/ml的溶液，經0.45um的微孔濾膜濾過，精密量取續濾液作為供試品溶液； 3)對照溶液的制備:取鹽酸氨基葡萄糖對照品適量，精密稱定，從供試品溶液制備法的濃度1.0mg/ml的溶液作為對照品溶液，2mg/ml對照品溶液作為貯備液備用； 4)空白溶劑的制備:以溶解供試品、對照溶液的溶劑作為空白； 5)在上述色譜條件下，精密吸取對照溶液20ul、供試品溶液20ul、空白溶劑20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算標準品溶液濃度的值與相應峰面積值的線性回歸方程，相關系數而應不小于0.99;精密吸取供試品溶液20ul注入液相色譜儀，供試品溶液色譜圖中，在與對照品溶液相同保留時間處有相同的峰，峰形對稱，理論塔板數2000以上；陰性輔料樣品溶液色譜圖，無與鹽酸氨基葡萄糖對照品相同的峰出現，即溶劑無干擾:本發明供試品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl應為標示量的99.0%-101.0%，濃度范圍為0.2-1.2mg/ml。
3.權利要求1.所述的鹽酸氨基葡萄糖原料的質量檢測方法，其特征在于該方法包括如下步驟: I)色譜柱NH2柱,5um, 250X4.6mm,流動相組成為乙腈:水(7.5:3),流速為1.2ml/min,柱溫為30°C，檢測器為Alltech ELSD 2000，漂移管溫度為75°C，氮氣壓力為1.2MPA ；2)供試品溶液的制備:取相當于1OOmg鹽酸氨基葡萄糖的供試品，精密稱定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，制得濃度lmg/ml的溶液，經0.45um的微孔濾膜濾過，精密量取續濾液作為供試品溶液； 3)對照溶液的制備:取鹽酸氨基葡萄糖對照品適量，精密稱定，從供試品溶液制備法的濃度1.0mg/ml的溶液作為對照品溶液，2mg/ml對照品溶液作為貯備液備用； 4)空白溶劑的制備:以溶解供試品、對照溶液的溶劑作為空白； 5)在上述色譜條件下，精密吸取對照溶液20ul、供試品溶液20ul、空白溶劑20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算標準品溶液濃度的值與相應峰面積值的線性回歸方程，相關系數而應不小于0.99;精密吸取供試品溶液20ul注入液相色譜儀，供試品溶液色譜圖中，在與對照品溶液相同保留時間處有相同的峰，峰形對稱，理論塔板數2000以上；陰性輔料樣品溶液色譜圖，無與鹽酸氨基葡萄糖對照品相同的峰出現，即陰性無干擾:本發明供試品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl應為標示量的99%-101%，濃度范圍為0.2-1.2mg/ml。
4.權利要求1.所述的鹽酸氨基葡萄糖原料的質量檢測方法，其特征在于該方法包括如下步驟: 1)色譜柱NH2柱,5um,250X4.6mm,流動相組成為乙腈:水(6.5:3),流速為0.9ml/min,柱溫為40°C，檢測器為Alltech ELSD 2000，漂移管溫度為72°C，氮氣壓力為1.4MPA ； 2)供試品溶液的制備:取相當于1OOmg鹽酸氨基葡萄糖的供試品，精密稱定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀釋至刻度，搖勻，制得濃度lmg/ml的溶液，經0.45um的微孔濾膜濾過，精密量取續濾液作為供試品溶液； 3)對照溶液的制備:取鹽酸氨基葡萄糖對照品適量，精密稱定，從供試品溶液制備法的濃度1.0mg/ml的溶液作為對照品溶液，2mg/ml對照品溶液作為貯備液備用； 4)空白溶劑的制備:以溶解供試品、對照溶液的溶劑作為空白； 5)在上述色譜條件下，精密吸取對照溶液20ul、供試品溶液20ul、空白溶劑20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算標準品溶液濃度的值與相應峰面積值的線性回歸方程，相關系數而應不小于0.99;精密吸取供試品溶液20ul注入液相色譜儀，供試品溶液色譜圖中，在與對照品溶液相同保留時間處有相同的峰，峰形對稱，理論塔板數2000以上；陰性輔料樣品溶液色譜圖，無與鹽酸氨基葡萄糖對照品相同的峰出現，即陰性無干擾:本發明供試品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl應為標示量的99%-101%，濃度范圍為0.2-1.2mg/ml。
【文檔編號】G01N30/06GK103760275SQ201310569620
【公開日】2014年4月30日 申請日期:2013年11月13日 優先權日:2013年11月13日
【發明者】陳文靜, 王崇益, 張欣 申請人:江蘇正大清江制藥有限公司
專業數控銑床產品供應商
20年生產經驗，實力工廠，精工品質，質量有保障
