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專(zhuān)利名稱(chēng)：心肌鈣蛋白快速檢測(cè)試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種心肌鈣蛋白快速檢測(cè)試劑盒。
背景技術(shù)：
免疫膠體金技術(shù)是上世紀(jì)90年代發(fā)展起來(lái)的一種簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)技術(shù)， 其原理與雙夾心ELISA相似，不同的是使用膠體金結(jié)合蛋白質(zhì)形成的復(fù)合物作為探針，且 所使用的試劑事先都被固定在具有微孔的硝酸纖維素膜上。使用時(shí)將一端置于檢測(cè)液中， 硝酸纖維素膜可被液體穿過(guò)，若檢測(cè)液中含有相關(guān)的抗原或抗體。在檢測(cè)區(qū)就會(huì)出現(xiàn)淡紅 色線(xiàn)條。否則為陰性。該技術(shù)問(wèn)世以來(lái)已在臨床上不斷被采用，該方法不依賴(lài)于精密的儀 器、不依賴(lài)于熟練的技術(shù)人員、操作步驟簡(jiǎn)捷，比起目前常用的酶聯(lián)免疫法具有更大的優(yōu) 點(diǎn)。整個(gè)反應(yīng)過(guò)程約在20分鐘內(nèi)就可以完成。因而需要的樣品量少，檢測(cè)更為敏感和準(zhǔn)確。 建立上述快速、簡(jiǎn)便、特異的免疫分析方法。在病毒和細(xì)菌等病原生物引起的傳染病中，實(shí)驗(yàn)室診斷有著極重要的價(jià)值。實(shí)驗(yàn) 室診斷分為病原學(xué)診斷和血清學(xué)(即免疫學(xué))診斷。前者雖具有確診感染和疾病的優(yōu)點(diǎn)， 但檢出效果很不理想。因此，免疫學(xué)診斷已成為許多傳染病的主要檢測(cè)手段。當(dāng)前國(guó)內(nèi)外使用最廣泛的血清學(xué)診斷方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，檢測(cè)的 目標(biāo)物可為抗體、亦可為可溶性循環(huán)抗原。與既往使用的血清學(xué)診斷方法(如間接血凝試 驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、免疫熒光法和放射免疫試驗(yàn)等)相比較、該類(lèi)方法具有敏感性強(qiáng)、特異 性高、操作相對(duì)簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。但該法操作步驟多、技術(shù)要求高、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)達(dá)2 3小時(shí)，結(jié) 果需借助儀器判讀且結(jié)果無(wú)法保存。這些缺點(diǎn)限制了其在基層和現(xiàn)場(chǎng)的應(yīng)用和推廣，更無(wú) 法直接進(jìn)入家庭。

發(fā)明內(nèi)容
急性心肌梗塞(Acute Myocardial Infarction，AMI)病情兇險(xiǎn)，死亡率高，是一 種較為危險(xiǎn)的疾病，AMI致死的一個(gè)重要原因就是不能早期診斷，延誤了治療時(shí)機(jī)。所以近 年來(lái)，對(duì)于A(yíng)MI標(biāo)志物的研究十分活躍。AMI的生化標(biāo)志物包括有肌紅蛋白(Myoglobin， Mb)、心肌肌鈣蛋白 T 和心肌肌鈣蛋白 I(cardiac Troponin Τ, cTnT, cardiac Troponin I， cTnl)、肌酸激酶(Myoglobin，MB)同工酶(Cytokinase-Myoglobin，CK-MB)、糖原磷酸化酶 同工酶(GPBB)等。目前市場(chǎng)上現(xiàn)有的同類(lèi)產(chǎn)品有羅氏公司(Roche)生產(chǎn)的cTnT金標(biāo)檢測(cè)條，福建三 明藍(lán)波生物技術(shù)研究所研制的血清Mb金標(biāo)免疫斑點(diǎn)法等。這些產(chǎn)品具有下列缺點(diǎn)1、只能氮素檢測(cè)血液中的某個(gè)心梗指標(biāo)。2、單個(gè)項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果的靈敏度和特異性稍遜。3、如果要得到兩項(xiàng)或多項(xiàng)結(jié)果則需操作兩次以上，較為麻煩。4、兩個(gè)或多個(gè)獨(dú)立試劑盒的生產(chǎn)成本要高于一個(gè)復(fù)合試劑盒。5、這些試劑盒的組成均適用于醫(yī)院診斷，而不適用于家庭，因?yàn)樵噭┖邪b內(nèi)無(wú)采血針、小吸管及真空包裝酒精棉球。本發(fā)明的目的是提供一種心肌鈣蛋白的快速檢測(cè)試劑盒，通過(guò)一次檢測(cè)即可同時(shí)獲得兩個(gè)以上心肌梗塞的檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果。本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種心肌鈣蛋白的快速檢測(cè)試劑盒，它包括底板，在底板下端設(shè)置的樣品墊，在底 板上端設(shè)置的吸水紙，以及在底板的位于樣品墊上方處貼置的固定有金標(biāo)抗體的玻璃纖維 膜，所述底板的位于玻璃纖維膜與上端吸水紙之間的區(qū)域內(nèi)分別噴有抗A抗體II條帶、鏈 霉親和素條帶和抗抗體條帶；所述玻璃纖維膜包被的金標(biāo)抗體包含金標(biāo)抗A抗體I和金標(biāo) 抗B抗體I，玻璃纖維膜還包被聯(lián)結(jié)了生物素的抗B抗體II.本發(fā)明將測(cè)心肌梗塞標(biāo)志物的兩個(gè)或多個(gè)單獨(dú)的免疫反應(yīng)系統(tǒng)組合到心肌梗塞 的一個(gè)檢測(cè)試劑盒中，運(yùn)用于金標(biāo)檢測(cè)板或檢測(cè)條，其檢測(cè)的檢出率、靈敏度指標(biāo)符合臨床 檢測(cè)要求，提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性。使用本發(fā)明時(shí)，可將兩個(gè)或多個(gè)心肌梗塞檢測(cè)項(xiàng)目放在一塊檢測(cè)板上，一次檢測(cè) 即可同時(shí)獲得兩個(gè)或多個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果，快速而又簡(jiǎn)便，提高了效率。通過(guò)多個(gè)項(xiàng)目的聯(lián)合 檢測(cè)，增加了檢測(cè)的特異性，提高了檢測(cè)的靈敏度，準(zhǔn)確、可靠，更有助于作出準(zhǔn)確的診斷。本發(fā)明的產(chǎn)品由于省卻了重復(fù)操作的材料，所以其生產(chǎn)成本低于各單項(xiàng)檢測(cè)板相 加之和的成本。
權(quán)利要求
一種心肌鈣蛋白快速檢測(cè)試劑盒，包括底板，在底板下端設(shè)置有樣品墊，在底板上端設(shè)置的吸水紙，以及在底板的位于樣品墊上方處貼置的固定有金標(biāo)抗體的玻璃纖維膜，其特征在于，所述底板的位于玻璃纖維膜與上端吸水紙之間的區(qū)域內(nèi)分別噴有抗A抗體II帶、鏈霉親和素條帶和抗抗體條帶所述玻璃纖維膜包被的金標(biāo)抗體包含金標(biāo)抗A抗體I和金標(biāo)抗B抗體I，玻璃纖維膜上還包被聯(lián)結(jié)了生物素的抗B抗體II.
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的心肌鈣蛋白快速檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述抗A抗體II 條帶包被了 Mb抗體β。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的心肌鈣蛋白快速檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述抗抗體帶包 被了羊抗鼠二抗。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的心肌鈣蛋白快速檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述金標(biāo)抗A抗體 I是抗Mb抗體α .
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的心肌鈣蛋白快速檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述金標(biāo)抗B抗體 I是抗cTnT抗體a.
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的心肌鈣蛋白快速檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述聯(lián)結(jié)了生物 素的抗B抗體II是聯(lián)結(jié)了生物素的抗cTnT抗體b。
全文摘要
一種心肌鈣蛋白檢測(cè)試劑盒，它包括底板，樣品墊，吸水紙，以及固定有金標(biāo)抗體的玻璃纖維膜。底板的位于玻璃纖維膜與上端吸水紙之間的區(qū)域內(nèi)分別噴有抗A抗體II條帶、鏈霉親和素條帶和抗抗體條帶。玻璃纖維膜包被的金標(biāo)抗體包含金標(biāo)抗A抗體I和金標(biāo)抗B抗體I，玻璃纖維膜還包被聯(lián)結(jié)了生物素的抗B抗體II。本發(fā)明將測(cè)心肌梗塞標(biāo)志物的兩個(gè)或多個(gè)單獨(dú)的免疫反應(yīng)系統(tǒng)組合到心肌梗塞的一個(gè)檢測(cè)試劑盒中，通過(guò)一次檢測(cè)即可同時(shí)獲得兩個(gè)以上心肌梗塞的檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果，具有檢測(cè)靈敏度、準(zhǔn)確性和可靠性。
文檔編號(hào)G01N33/558GK101957371SQ200910059959
公開(kāi)日2011年1月26日 申請(qǐng)日期2009年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月13日
發(fā)明者陳潔 申請(qǐng)人:陳潔