一種測定黃體酮生產母液中主要成分含量的方法
【專利摘要】本發明提供一種測定黃體酮生產母液中主要成分含量的方法，其為高效液相色譜法，包括將母液樣品定量稀釋，配制濃度相當的孕烯醇酮和黃體酮對照品外標溶液，設置高效液相色譜儀參數，樣品含量計算等過程。該方法具有較高好的選擇性、靈敏度和準確度極高，且操作簡便，測定快速，簡單易行。為生產回收工藝提供了準確的數據支持，為反確定應物及溶劑用量提供了數據支持，從而將黃體酮生產母液中的黃體酮回收，提高了產品經濟效益；另一方面，降低了危險廢棄物的排放量。
【專利說明】一種測定黃體酮生產母液中主要成分含量的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于化學制藥的儀器分析領域，具體涉及一種測定黃體酮生產母液中主要成分孕烯醇酮和黃體酮含量的方法。
【背景技術】
[0002]黃體酮生產過程中產生的生產母液的回收是提高產品收率及減少危險廢棄物排放的重要環節，準確測定母液中主要成分孕烯醇酮和黃體酮含量對整個生產母液的回收至關重要。由于母液中成分復雜，孕烯醇酮和黃體酮含量不高，因此，要用一種選擇性好、靈敏度高的測定方法才能保證測定結果準確可靠，同時要考慮操作簡易快速。在該項目上，至今沒有明確的簡單易行的方法。目前國內外沒有公開報道的黃體酮生產母液中測定的黃體酮和孕烯醇酮的分析方法。
[0003]現有技術中，測量某一種液體中某一成分的含量，主要有以下幾種方法，化學滴定法、儀器分析方法(包括高效液相色譜法、氣相色譜法、紫外測定法)等，具體選擇哪種方法，不僅需要對母液的進行分析，還要綜合考慮很多因素。以液相色譜法為例，在使用該方法的進行含量測定的過程中，需要根據母液的具體情況選擇色譜條件，而色譜條件的選擇對測定結果的準確性影響非常關鍵，需要投入大量的時間、精力以及資金進行摸索驗證。
【發明內容】
[0004]本發明提供一種測定黃體酮生產母液中主要成分含量的方法，解決如何從成分復雜的黃體酮生產母液中高效、快捷、準確測定孕烯醇酮和黃體酮含量以便于提高產品收率、減少環境危害的問題。
[0005]本發明的技術解決方案是:
[0006]一種測定黃體酮生產母液中主要成分含量的方法，其特殊之處在于，包括以下步驟:用液相色譜法測定黃體酮生產母液中孕烯醇酮和黃體酮含量，選擇高效液相色譜儀作為檢測儀器，流動相為乙腈和水，檢測波長為210nm-220nm。
[0007]上述流動相中乙腈的體積百分含量為30-40%。優選的，乙腈的體積百分含量為40%。
[0008]上述檢測波長為215nm，是黃體酮在紫外可見光區的最大吸收波長。
[0009]上述液相色譜法中，色譜柱為島津VP-ODS C18柱，150X4.6mm，5iim粒徑。
[0010]分析時間為20-40分鐘，20分鐘為最短分析時間，能有效提高檢測效率。
[0011]采用外標法計算孕烯醇酮和黃體酮含量；進樣量為20 ii I ;流速為1.0ml/min ;柱
溫為室溫。
[0012]在液相色譜法中，配制標準溶液的過程是:精密稱取孕烯醇酮對照品50.0±0.5mg和黃體酮對照品100.0±0.5mg,同置于一個IOOml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻
度，搖勻，備用。
[0013]在液相色譜法中，配制樣品溶液的過程是:精密稱取黃體酮母液樣品1.00±0.05g，精密稱定，置100ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。
[0014]一種從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法，其特殊之處在于，包括以下步驟:
[0015]I】母液預處理:
[0016]1.1】對黃體酮生產母液進行蒸餾，將黃體酮生產母液中的溶劑蒸出，記錄殘留物重量Ml ;所述母液是由孕烯醇酮氧化為黃體酮的生產過程中所產生的母液；
[0017]1.2】用溶劑將步驟1.1】得到的殘留物進行溶解，使其全溶；
[0018]2】除去部分雜質:用稀酸溶液對步驟1.2】中得到的溶液進行洗滌，然后水洗至PH> 6 ；
[0019]3】黃體酮純度提高:
[0020]3.1】對步驟2】中水洗后的溶液進行回流分水，至無水分出；
[0021]3.2】從分水后的溶液中取樣，用液相色譜法測定樣品中孕烯醇酮和黃體酮含量，計算分水后的溶液中孕烯醇酮的重量M2、黃體酮的重量M3，然后加入環己酮和異丙醇鋁進行沃氏氧化；
[0022]在液相色譜法中，選擇高效液相色譜儀作為檢測儀器，流動相為乙腈和水，檢測波長為210nm-22 0nm ;上述流動相中乙腈的體積百分含量為30_40%。優選的，乙腈的體積百分含量為40%。檢測波長為215nm，是黃體酮在紫外可見光區的最大吸收波長。色譜柱為島津VP-ODS C18柱，150X4.6mm，5 y m粒徑。分析時間為20-40分鐘，20分鐘為最短分析時間，能有效提高檢測效率。采用外標法計算孕烯醇酮和黃體酮含量；進樣量為20 Ul ;流速為
1.0ml/min ;柱溫為室溫。配制標準溶液的過程是:精密稱取孕烯醇酮對照品50.0±0.5mg和黃體酮對照品100.0±0.5mg,同置于一個100ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。配制樣品溶液的過程是:精密稱取黃體酮母液樣品1.00±0.05g，精密稱定，置100ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。
[0023]4】產品的提取:向步驟3.2】沃氏氧化后的溶液中加酸溶液中和，水洗，蒸出溶劑；
[0024]5】產品析出:加結晶溶劑、活性炭、氧化鋁，熱濾后降溫析晶得黃體酮粗品M4 ；
[0025]6】粗品精制:加精制溶劑經重結晶得黃體酮。
[0026]在從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法中，步驟2】中洗滌所用的稀酸溶液為稀鹽酸、稀硫酸、稀乙酸、稀甲酸中的一種或多種；稀酸溶液的重量為1.0Ml~4.0M1，稀酸溶液的質量百分比濃度為5%~10%。
[0027]在從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法中，步驟1.2】中溶劑為苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷中的一種或多種；有機溶劑的重量為1.0Ml~4.0Ml。
[0028]在從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法中，步驟3.2】中，加入1.0M2~4.0M2重量的環己酮，0.5M2~2.0M2重量的異丙醇鋁。
[0029]在從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法中，步驟4】中酸溶液是質量百分比濃度為5%~10%稀硫酸溶液，所述稀硫酸溶液是由0.75倍異丙醇鋁重量的濃硫酸經水稀釋而來，濃硫酸的質量百分比濃度大于等于95% ;水洗時，水量為1.0Ml~4.0Ml，水洗過程保持溫度30~90°C ;然后減壓蒸餾溶劑至蒸干，降溫至30~90°C。
[0030]在從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法中，步驟5】具體為:加入0.8M1~3.0Ml重量的結晶溶劑、0.05M1~0.15M1重量的活性炭、0.05M1~0.15M1重量的氧化鋁后升溫至回流，保溫回流10~60分鐘，降溫至50~70°C ;熱濾，以0.1Ml~0.4M1重量的結晶溶劑洗滌濾餅；升溫蒸餾，蒸出部分溶劑，剩余溶劑量為1.0 (M2+M3)~3.0 (M2+M3);降溫至-5°C~10°C ;保溫析晶0.5~2小時，離心，得黃體酮粗品M4 ;其中結晶溶劑是甲醇、乙醇、丙酮中的一種。
[0031]在從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法中，步驟6】粗品精制的方法具體為:向黃體酮生產母液回收粗品M4中加0.8M4~4.0M4精制溶劑，精制溶劑包括甲醇、乙醇、丙酮中的一種或多種，攪拌，升溫至回流，保溫回流10~60分鐘；降溫至-5°C~10°C，保溫析晶
0.5~2小時,離心,烘干,得黃體酮產品。
[0032]在從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法中，步驟I】中所述母液包括粗品母液或者精制母液或者兩者以任何比例混合的混合液。
[0033]在從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法中，步驟1.1】中蒸餾的終點溫度為90 ~100。。。
[0034]本發明的優點是:本發明對于黃體酮生產母液中孕烯醇酮重量百分含量0.25%至10%之間，黃體酮重量百分含量0.5%至20%之間的測定均具有較好的選擇性、靈敏度和準確度，且操作簡便，測定快速，簡單易行。
【具體實施方式】
[0035]黃體酮生產母液中的成分復雜，主要為孕烯醇酮和黃體酮，但孕烯醇酮和黃體酮的含量較低，如何對母液中孕烯醇酮和黃體酮的含量進行準確測定，以便進行高效率的黃體酮回收，是本發明的難點。
[0036]本發明采用高效液相色譜法中的標準物質對照方法，配制合適的標準溶液和樣品溶液，并根據母液的待測物質含量具體情`況進行參數選擇，用外標法計算孕烯醇酮和黃體酮的含量。
[0037]一、色譜條件的選擇如下:
[0038]色譜儀:高效液相色譜儀；
[0039]色譜柱:VP-0DS，C18柱，150 X 4.6mm，5 y m 粒徑；
[0040]流動相:乙腈:水的體積比為40:60 ；
[0041]檢測波長:215nm;
[0042]流速:1.0ml/min ；
[0043]進樣量:20ill;
[0044]柱溫:室溫；
[0045]分析時間:20分鐘。
[0046]二、試劑選擇:
[0047]甲醇(HPLC級)；乙腈(HPLC級)；純水(HPLC級)；
[0048]三、溶液配制
[0049]1、樣品溶液配制:(根據生產經驗，母液中孕烯醇酮含量按照5%設定，黃體酮含量按照10%設定)
[0050]精密稱取黃體酮生產母液樣品1.00±0.05g，精密稱定，置100ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。
[0051]2、標準溶液配制:[0052]精密稱取孕烯醇酮對照品50.0±0.5mg和黃體酮對照品100.0±0.5mg,同置于一個100ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。
[0053]計算方法:外標法。
【權利要求】
1.一種測定黃體酮生產母液中主要成分含量的方法，其特征在于，包括以下步驟:用液相色譜法測定黃體酮生產母液中孕烯醇酮和黃體酮含量，選擇高效液相色譜儀作為檢測儀器，流動相為乙腈和水，檢測波長為210nm-220nm。
2.根據權利要求1所述的測定黃體酮生產母液中主要成分含量的方法，其特征在于，流動相中乙腈的體積百分含量為30-40%。
3.根據權利要求2所述的測定黃體酮生產母液中主要成分含量的方法，其特征在于，所述檢測波長為215nm;液相色譜法所選用的色譜柱為島津VP-ODS C18柱，150 X 4.6mm，.5U m粒徑；液相色譜法的分析時間為20-40分鐘；采用外標法計算孕烯醇酮和黃體酮含量；進樣量為20iU ;流速為1.0ml/min ;柱溫為室溫。
4.根據權利要求1-3任一所述的測定黃體酮生產母液中主要成分含量的方法，其特征在于，在液相色譜法中，配制標準溶液的過程是:精密稱取孕烯醇酮對照品50.0±0.5mg和黃體酮對照品100.0±0.5mg,同置于一個100ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。
5.根據權利要求1-3任一所述的測定黃體酮生產母液中主要成分含量的方法，其特征在于，在液相色譜法中，配制樣品溶液的過程是:精密稱取黃體酮母液樣品1.00±0.05g,精密稱定，置100ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。
6.一種從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法，其特征在于，包括以下步驟: I】母液預處理: . 1.1】對黃體酮生產母液進行蒸餾，將黃體酮生產母液中的溶劑蒸出，記錄殘留物重量Ml ;所述母液是由孕烯醇酮氧化為黃體酮的生產過程中所產生的母液；. 1.2】用溶劑將步驟1.1】得到的殘留物進行溶解，使其全溶；. 2】除去部分雜質:用稀酸溶液對步驟1.2】中得到的溶液進行洗滌，然后水洗至PH >.6； . 3】黃體酮純度提高:. 3.1】對步驟2】中水洗后的溶液進行回流分水，至無水分出； . 3.2】從分水后的溶液中取樣，用權利要求1的方法測定樣品中孕烯醇酮和黃體酮的重量百分含量，根據重量百分含量計算分水后的溶液中孕烯醇酮的重量M2、黃體酮的重量M3，然后加入環己酮和異丙醇鋁進行沃氏氧化；. 4】產品的提取:向步驟3.2】沃氏氧化后的溶液中加酸溶液中和，水洗，蒸出溶劑；. 5】產品析出:加結晶溶劑、活性炭、氧化鋁，熱濾后降溫析晶得黃體酮粗品M4 ；. 6】粗品精制:加精制溶劑經重結晶得黃體酮。
7.根據權利要求6所述的從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法，其特征在于，步驟.2】中洗滌所用的稀酸溶液為稀鹽酸、稀硫酸、稀乙酸、稀甲酸中的一種或多種；稀酸溶液的重量為1.0Ml~4.0Ml，稀酸溶液的質量百分比濃度為5%~10%。
8.根據權利要求6或7所述的從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法，其特征在于，步驟1.2】中溶劑為苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷中的一種或多種；有機溶劑的重量為1.0M1~.4.0Ml。
9.根據權利要求8所述的從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法，其特征在于，在從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法中，步驟3.2】中，加入1.0M2~4.0M2重量的環己酮，.0.5M2~2.0M2重量的異丙醇鋁。
10.根據權利要求9所述的從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法，其特征在于，在從黃體酮生產母液中回收黃體酮的方法中，步驟4】中酸溶液是質量百分比濃度為5%~10%稀硫酸溶液，所述稀硫酸溶液是由0.75倍異丙醇鋁重量的濃硫酸經水稀釋而來，濃硫酸的質量百分比濃度大于等于95% ;水洗時，水量為1.0Ml~4.0Ml，水洗過程保持溫度30~90°C ；然后減壓蒸餾溶劑至蒸干，降溫至30~90°C ; 步驟5】具體為:加入0.8M1~3.0Ml重量的結晶溶劑、0.05M1~0.15M1重量的活性炭、 .0.05M1~0.15M1重量的氧化鋁后升溫至回流，保溫回流10~60分鐘，降溫至50~70°C;熱濾，以0.1Ml~0.4M1重量的結晶溶劑洗滌濾餅；升溫蒸餾，蒸出部分溶劑，剩余溶劑量為1.0 (M2+M3)~3.0 (M2+M3);降溫至_5°C~10°C ;保溫析晶0.5~2小時，離心，得黃體酮粗品M4 ;其中結晶溶劑是甲醇、乙醇、丙酮中的一種； 步驟6】粗品精制的方法具體為:向黃體酮生產母液回收粗品M4中加0.8M4~4.0M4精制溶劑，精制溶劑包括甲醇、乙醇、丙酮中的一種或多種，攪拌，升溫至回流，保溫回流10~60分鐘；降溫至-5V~10°C，保溫析晶0.5~2小時，離心，烘干，得黃體酮產品。
【文檔編號】G01N30/02GK103776935SQ201410060544
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2014年2月21日 優先權日:2014年2月21日
【發明者】陳峙, 張妮, 張佳, 燕國武, 唐耀光 申請人:陜西漢江藥業集團股份有限公司
專業數控銑床產品供應商
20年生產經驗，實力工廠，精工品質，質量有保障
