一種茶樹葉片苦澀味強度的分析方法
【專利摘要】一種茶樹葉片苦澀味強度的分析方法，屬于茶葉滋味客觀分析【技術領域】。其包括以下步驟：配制苦味和澀味標準物質溶液，采用標準物質溶液對電子舌進行測試，建立膠體電極的信號強度數值與標準物質梯度溶液濃度的相關性函數；選取茶樹鮮葉或茶葉加工在制樣品，經研磨，定容得到待測樣品溶液；用電子舌獲取待測樣品溶液的電信號強度數值，再根據步驟1）得到的函數確定待測樣品的苦味和澀味等效濃度強度。與現有技術相比，本發明具有檢測數據客觀性，檢測過程靈敏性、檢測結果重現性等特性，能避免審評員由于個人主觀性產生的誤差，實現茶葉葉片苦澀味強度的量化操作。
【專利說明】-種茶樹葉片苦澀味強度的分析方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于茶葉滋味客觀分析【技術領域】，具體涉及一種茶樹葉片苦澀味強度的分 析方法。
【背景技術】
[0002] 目前，對茶葉感官品質的評價主要依據茶葉感官審評通用方法（NY/T787-2004)及 茶葉感官審評方法（GB/T23776-2009)對成品茶葉的品質、等級等質量問題進行評價。評價 的具體內容包括外形、湯色、香氣、滋味和葉底5項，簡稱"五因子"。各因子所占權重不一， 例如名優綠茶審評中各因子所占比例分別為；外形25%，湯色10%，香氣25%，滋味30%，葉底 10%，其中滋味因子在品質評價中所占的權重最高。
[0003] 苦味和澀味是茶葉最為典型和最具辨識度的兩種滋味類型。在苦澀味定性判別方 面，一種基于茶葉生化成分的綠茶苦澀味判別方法（公布號為；CN 103558311 A)針對未知 茶葉樣本實現了苦味和澀味的區分，但該方法未述及苦味和澀味強度的定量問題。隨著茶 葉生產和貿易的擴大，滋味客觀量化評價在原料收購、加工過程和成品檢測等環節越來越 重要，該對茶葉滋味的評價技術提出了更高要求。現有茶葉感官品質評價方法存在的不足 主要體現在，一是現有的茶葉感官審評標準對茶葉分屬性滋味無法量化評價，對特定滋味 的強度大小難W直接比較。二是，評價對象僅限于成品茶，無法應用于鮮葉原料和在制加工 樣品的評價。
[0004] 針對茶葉苦澀味強度定量分析方面的技術，國內相關研究機構進行了大量探索， 其中綠茶茶湯中主要滋味成分及滋味定量描述分析法(金孝芳等，2012)和茶葉苦澀味非線 性回歸分析法(徐文平等，2010)采用茶葉中自身含有的咖啡堿(苦味）和表沒食子兒茶素 沒食子酸醋（EGCG，澀味）作為標準物質進行方法學研究。其原理是通過建立標準物質特征 曲線，對待測樣本化學成分的含量測定，基于特征曲線方程計算獲得滋味強度值。但上述研 究在運用標準物質梯度溶液建立與苦澀味強度相關的特征曲線時仍需借助審評員配合，無 法完全避免主觀性。
[0005] 電子舌(膠體電極)定量分析技術是近年發展起來的一種滋味客觀檢測技術。與傳 統感官審評相比，具有H個相對比較優勢，一是評價過程不需要審評員的參與，具有相對客 觀性。二是檢測結果穩定性和重現性好，能有效避免審評員在大量樣品評價過程中由口腔 滋味掩蔽效應和協同效應W及環境、精神狀態、視覺也理等因素等引起的誤差。H是檢測靈 敏度高，例如人對咖啡堿的察覺闊值為500ymol/L，而電子舌僅為100ymol/L。本發明正 是基于電子舌上述優勢提出了針對茶樹鮮葉及茶葉加工在制品的苦澀味強度分析方法，實 現茶葉葉片苦澀味強度的量化分析。
【發明內容】
[0006] 針對現有技術存在的問題，本發明的目的在于設計提供一種茶樹葉片苦澀味強度 的分析方法的技術方案。
[0007] 所述的一種茶樹葉片苦澀味強度的分析方法，其特征在于包括W下步驟： 1) 配制苦味和澀味標準物質溶液，采用標準物質溶液對電子舌進行測試，建立膠體電 極的信號強度數值與標準物質梯度溶液濃度的相關性函數； 2) 選取茶樹鮮葉或茶葉加工在制樣品，經研磨，定容得到待測樣品溶液； 3) 用電子舌獲取待測樣品溶液的電信號強度數值，再根據步驟1)得到的函數確定待測 樣品的苦味和澀味等效濃度強度。
[0008] 所述的一種茶樹葉片苦澀味強度的分析方法，其特征在于所述的步驟1)中配制 苦味和澀味標準物質溶液具體為：W純度> 95%的咖啡堿作為苦味標準物質，依據其察覺 闊值0. 097g/L、茶葉中的實際含量范圍2%-4%及正常茶湯中咖啡堿濃度范圍，配制了 6個 梯度濃度的標準溶液，濃度分別為0. 1 g/L、0. 2 g/L、0. 3g/L、0. 5 g/L、0.8 g/L、l g/L;W 純度> 95%的EGCG作為澀味標準物質，依據其察覺闊值0. 087g/L、茶葉中的實際含量范圍 6. 61%及正常茶湯中EGCG濃度范圍，配制了 6個梯度濃度的標準溶液，濃度分別為0 g/L、0. 25g/L、0. 5 g/L、0. 75 g/L、l g/L、1.25 g/L。
[0009] 所述的一種茶樹葉片苦澀味強度的分析方法，其特征在于所述的步驟I)中膠 體電極的信號強度數值與標準物質梯度溶液濃度的相關性函數是：苦味：y = 79. 86X + 1649. 6, y為信號值mV, X為咖啡堿溶液濃度g/L ;澀味；y = -304. 21n(x) + 1307. 7, y為 信號值mV, X為EGCG溶液濃度g/L。
[0010] 所述的一種茶樹葉片苦澀味強度的分析方法，其特征在于所述的步驟2)中茶樹鮮 葉或茶葉加工在制樣品的選取方法為： 1) 茶樹鮮葉樣品的選取方法；采集范圍包括單芽、第一葉、第二葉、第H葉、一芽一葉、 一芽二葉或一芽H葉，其中小葉種鮮葉稱取1. 2g，中葉種1. 5g，大葉種1. Sg ; 2) 茶葉加工在制品樣品的選取方法；針對綠茶在攤放過程、紅茶在萎調過程W及青茶 在做青過程中水分不斷散失的樣品，為避免在制品含水率差異對測試結果造成的誤差，依 據W下函數對在制品的實際稱取量計算后稱取； ^_ (I-Ml)*Gl I-Ml 式中：G ;取樣重量（g) Gi;鮮葉樣品重量（g) Mi ;鮮葉絕對含水率（％) Mg ;過程樣絕對含水率（％)。
[0011] 所述的一種茶樹葉片苦澀味強度的分析方法，其特征在于所述的步驟2)中選取的 樣品放入組織勻漿機中，加入純凈水15mL，100(K)r/min研磨30sec，抽濾后用純凈水定容至 25血，lOOOOr/min離也5min，上清液用于電子舌信號采集。
[0012] 本發明通過電子舌獲取茶葉滋味強度數據，代入苦澀味強度函數，從而得出葉片 苦味和澀味的等效濃度。與現有技術相比，本發明具有檢測數據客觀性，檢測過程靈敏性、 檢測結果重現性等特性，能避免審評員由于個人主觀性產生的誤差，實現茶葉葉片苦澀味 強度的量化操作。
【專利附圖】
【附圖說明】
[001引圖I為EGCG標準溶液曲線圖； 圖2為咖啡堿標準溶液曲線圖； 圖3為不同茶樹品種苦味強度差異比較圖； 圖4為不同茶樹品種澀味強度差異比較圖； 圖5為攤青程度對葉片苦味強度的影響圖； 圖6為攤青程度對葉片苦味強度的影響圖； 圖7為發酵程度對葉片苦味強度的影響圖； 圖8為發酵程度對葉片澀味強度的影響圖。
【具體實施方式】
[0014]本發明結合實施例作進一步描述，實施例是在本發明技術方案前提下實施的，給 出了詳細的實施方式和步驟，但本發明的保護范圍不限于下述的實施例。
[001引 實施例1 15個茶樹品種鮮葉苦澀味強度的比較，具體步驟如下 (1) W咖啡堿(純度>95%)作為苦味標準物質，依據其察覺闊值0.097g/L (Susanne Scharbed等，2005)、茶葉中的實際含量范圍2%-4% (伊奈和夫等，2007)及正常茶湯中咖啡 堿濃度范圍，配制了 6個梯度濃度的標準溶液，濃度分別為0. 1 g/L、0. 2 g/L、0. 3g/L、0. 5 g/L、0. 8 g/L、I g/L ; W EGCG (純度> 95%)作為澀味標準物質，依據其察覺闊值0. 087g/L (Thomas Hoffmann 等,2006)、茶葉中的實際含量范圍 6. 化apczynski 等,2000) 及正常茶湯中EGCG濃度范圍，配制了 6個梯度濃度的標準溶液，濃度分別為0 g/L、0. 25g/ L、0.5 g/L、0.75 g/L、l g/L、1.25 g/L。采用標準物質溶液對電子舌(膠體電極)進行測試， 建立膠體電極的信號強度數值與標準物質梯度溶液濃度的相關性函數建立函數方程：其 中，其中苦味；y = 79. 86x + 1649.6, y為信號值（mV), X為咖啡堿溶液濃度（g/L)，如圖2 所示；澀味巧=-304. 21n(X) + 1307. 7, y為信號值(mV), X為EGCG溶液濃度（g/L)，如圖 1所示。
[0016] (2)鮮葉樣品選取：在中國農業科學院茶葉研究所資源圃中，隨機選取15個茶樹 品種，分別編號為 LJ43, MX，JBH，Z肥 108, ZHYQ，XCH-5, WN-95, FY-6, FZ-2, GYQ，ECH-1，YMX, ZH，LZH-2,服Y，采摘標準為一芽二葉。
[0017] (3)稱取待測樣品1. 2g放入組織勻漿機中，加入純凈水15血，lOOOOr/min研磨 30sec，抽濾后用純凈水定容至25血，lOOOOr/min離也5min，上清液用于電子舌信號采集。
[0018] (4)將電子舌膠體電極獲取的苦味信號數值代入函數y = 79. 86x + 1649. 6中，其 中y為信號值(mV), X為鮮葉苦味等效濃度（g/L);將電子舌膠體電極獲取的澀味信號數值 代入函數y = -304. 21n (X) + 1307. 7中，其中y為信號值(mV), X為鮮葉澀味等效濃度（g/ L)。得出各茶樹品種鮮葉的苦澀味等效濃度強度，結果如圖3和圖4所示。
[001引 實施例2 不同攤青程度的茶樹葉片苦澀味強度的比較，具體步驟如下： (1)配制不同濃度的 EGCG 溶液（Og/L、0. 25g/L、0. 5 g/L、0. 75 g/L、l g/L、1.25 g/L) 和咖啡堿溶液（0. I g/L、0. 2 g/L、0. 3g/L、0. 5 g/L、0.8 g/L、l g/L)，建立函數方程；其中， 其中苦味；y = 79. 86x + 1649. 6, y為信號值（mV), X為咖啡堿溶液濃度（g/L);澀味；y = -304. 21n(X) + 1307. 7, y 為信號值(mV), X 為 EGCG 溶液濃度（g/L)。
[0020] (2)取茶樹鮮葉800g (編號為ECH-I)進行攤青試驗，攤放厚度為0. 5cm。從化起 至3化止，每間隔化取樣一次，共取樣10次。首次取樣重量為1. 2g，其余各次取樣重量依 據W下函數計算后稱取。 廣 1 一 (1-Afll* Gl
[0021] G=、 I-M 2 式中：G ;取樣重量（g) Gi;鮮葉樣品重量（g) Mi ;鮮葉絕對含水率（％) ;過程樣絕對含水率（％)。
[0022] (3)稱取待測樣品放入組織勻漿機中，加入純凈水15血，lOOOOr/min研磨30sec， 抽濾后用純凈水定容至25血，lOOOOr/min離也5min，上清液用于電子舌信號采集。
[0023] (4)將電子舌膠體電極獲取的苦味信號數值代入函數y = 79. 86x + 1649. 6中，其 中y為信號值(mV), X為葉片苦味等效濃度（g/L);將電子舌膠體電極獲取的澀味信號數值 代入函數y = -304. 21n(X) + 1307. 7中，其中y為信號值(mV),X為葉片澀味等效濃度（g/ L)。得出不同攤青程度葉片苦澀味的等效濃度強度，結果如圖5和圖6所示。
[0024] 實施例3 不同發酵程度的茶樹葉片苦澀味強度的比較，具體步驟如下： (1)配制不同濃度的 EGCG 溶液（Og/L、0. 25g/L、0. 5 g/L、0. 75 g/L、l g/L、1.25 g/L) 和咖啡堿溶液（0. I g/L、0. 2 g/L、0. 3g/L、0. 5 g/L、0.8 g/L、l g/L)，建立函數方程；其中， 其中苦味；y = 79. 86x + 1649. 6, y為信號值（mV), X為咖啡堿溶液濃度（g/L);澀味；y = -304. 21n(X) + 1307. 7, y 為信號值(mV), X 為 EGCG 溶液濃度（g/L)。
[002引 （2)茶樹品種鮮葉IlOOg (編號為ECH-1)，攤青1化，揉搶IOmin后進行發酵，在發 酵過程中，從化起至1化止，每化取樣一次，共取樣9次。首次取樣重量為1. 2g，其余各次 取樣重量依據W下函數計算后稱取。 廣 1 。 fl-Afl)* Gl
[0026] G=、 J I-M 2 式中：G ;取樣重量（g) Gi;鮮葉樣品重量（g) Mi ;鮮葉絕對含水率（％) ;過程樣絕對含水率（％)。
[0027] (3)稱取待測樣品放入組織勻漿機中，加入純凈水15血，lOOOOr/min研磨30sec， 抽濾后用純凈水定容至25血，lOOOOr/min離也5min，上清液用于電子舌信號采集。
[0028] (4)將電子舌膠體電極獲取的苦味信號數值代入函數y = 79. 86x + 1649. 6中，其 中y為信號值(mV), X為葉片苦味等效濃度（g/L);將電子舌膠體電極獲取的澀味信號數值 代入函數y = -304. 21n(X) + 1307. 7中，其中y為信號值(mV),X為葉片澀味等效濃度（g/ L)。得出不同發酵程度葉片苦澀味的等效濃度強度，結果如圖7和圖8所示。
【權利要求】
1. 一種茶樹葉片苦澀味強度的分析方法，其特征在于包括以下步驟： 1) 配制苦味和澀味標準物質溶液，采用標準物質溶液對電子舌進行測試，建立膠體電 極的信號強度數值與標準物質梯度溶液濃度的相關性函數； 2) 選取茶樹鮮葉或茶葉加工在制樣品，經研磨，定容得到待測樣品溶液； 3) 用電子舌獲取待測樣品溶液的電信號強度數值，再根據步驟1)得到的函數確定待測 樣品的苦味和澀味等效濃度強度。
2. 如權利要求1所述的一種茶樹葉片苦澀味強度的分析方法，其特征在于所述的步驟 1)中配制苦味和澀味標準物質溶液具體為：以純度>95%的咖啡堿作為苦味標準物質，依 據其察覺閾值〇.〇97g/L、茶葉中的實際含量范圍2%-4%及正常茶湯中咖啡堿濃度范圍，配 制了6個梯度濃度的標準溶液，濃度分別為0. I g/L、0. 2 g/L、0. 3g/L、0. 5 g/L、0. 8 g/L、l g/L ;以純度>95%的EGCG作為澀味標準物質，依據其察覺閾值0. 087g/L、茶葉中的實際含 量范圍6.1%-11. 61%及正常茶湯中EGCG濃度范圍，配制了 6個梯度濃度的標準溶液，濃度 分別為〇g/L、0.25g/L、0.5 g/L、0.75 g/L、l g/L、1.25 g/L。
3. 如權利要求I所述的一種茶樹葉片苦澀味強度的分析方法，其特征在于所述的步 驟1)中膠體電極的信號強度數值與標準物質梯度溶液濃度的相關性函數是：苦味：y= 79. 86x+ 1649. 6，y為信號值mV，x為咖啡堿溶液濃度g/L;澀味：y= -304. 21n(x) + 1307. 7,y為信號值mV，X為EGCG溶液濃度g/L。
4. 如權利要求1所述的一種茶樹葉片苦澀味強度的分析方法，其特征在于所述的步驟 2) 中茶樹鮮葉或茶葉加工在制樣品的選取方法為： 1) 茶樹鮮葉樣品的選取方法：采集范圍包括單芽、第一葉、第二葉、第三葉、一芽一葉、 一芽二葉或一芽三葉，其中小葉種鮮葉稱取I. 2g，中葉種I. 5g，大葉種I. 8g; 2) 茶葉加工在制品樣品的選取方法：針對綠茶在攤放過程、紅茶在萎凋過程以及青茶 在做青過程中水分不斷散失的樣品，為避免在制品含水率差異對測試結果造成的誤差，依 據以下函數對在制品的實際稱取量計算后稱取； (I-Ml)*Gl1-M2 式中：G:取樣重量（g) G1:鮮葉樣品重量（g) M1 :鮮葉絕對含水率（％) M2 :過程樣絕對含水率（％)。
5.如權利要求1所述的一種茶樹葉片苦澀味強度的分析方法，其特征在于所述的步驟 2)中選取的樣品放入組織勻楽機中，加入純凈水15mL，10000r/min研磨30sec，抽濾后用純 凈水定容至25mL，10000r/min離心5min，上清液用于電子舌信號采集。
【文檔編號】G01N27/26GK104237335SQ201410416281
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年8月22日 優先權日:2014年8月22日
【發明者】譚俊峰, 林 智, 張悅, 郭麗, 呂海鵬, 劉亞芹 申請人:中國農業科學院茶葉研究所
專業數控銑床產品供應商
20年生產經驗，實力工廠，精工品質，質量有保障
