一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法
【專利摘要】本發明公開了一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，包括如下步驟：(1)樣品制備：準確稱取5.0g蜂蜜樣品于燒杯中，加入7.5mL酶解緩沖液和10mL的蒸餾水，攪拌樣品完全溶解，然后移入25mL容量瓶中，定容至刻度，搖勻；(2)酶解：準確吸取2.5mL制備好的樣品溶液于盛有12.5mL淀粉溶液的試管中混勻，在常溫下酶解10min或20min；(3)顯色：吸取酶解液于盛有顯色液和蒸餾水的比色管中，常溫下顯色5min；(4)檢測：把顯色液顏色與多色比色卡對比，確定蜂蜜中淀粉酶值。本發明的特點是使淀粉酶在常溫下與淀粉作用，并配合比色卡法進行檢測。具有操作簡便、條件簡單、快速等優點。
【專利說明】一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法
【技術領域】
[0001]本發明具體涉及一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，屬于食品質量安全檢測【技術領域】。
【背景技術】
[0002]淀粉酶值的高低是衡量蜂蜜生物活性、成熟度和新鮮度的重要質量指標之一。目前測定蜂蜜中的淀粉酶值的方法主要有分光光度計法、試管目測法、標準參考比色板法和試劑盒法等。第一種方法是國際通用的方法，此法準確、快速，但需分光光度計等設備，對檢測人員的技術要求較高，不適于現場快速檢測；第二種方法檢測步驟復雜，且耗時；第三種方法是在第一種方法的基礎上研究出來的比色卡，較為方便，但只有一種顏色，對于酶值低的樣品，需檢測一個小時以上，第四種方法實質上也是分光光度計法。此外，以上所有方法還都不能在常溫下進行檢測(需要在40°C水浴下酶解)。本發明在前人對蜂蜜中淀粉酶值研究的基礎上，通過常溫下酶解與酶值的關系，制作出多種顏色和對應酶值的比色卡，建立了一種能在常溫下對蜂蜜中的淀粉酶值進行快速測定的檢測方法。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是在于提供一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，能夠現場完成對蜂蜜中淀粉酶值的快速測定，具有操作簡便、條件簡單、快速等優點。
[0004]為實現上述目的，本發明的技術方案為：
(1)樣品的制備：準確稱取5.O g蜂蜜樣液于燒杯中，加入7. 5 mL酶解緩沖液和10 mL的蒸餾水，攪拌使樣品完全溶解，然后移入25 mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度，搖勻；
(2)酶解：準確吸取2.5 mL制備好的樣品溶液于盛有12. 5 mL淀粉溶液的試管中混勻；在常溫下酶解10 min或20 min ；
(3)顯色：吸取上述酶解液5.O mL于盛有2.5 mL顯色液和6.6 mL蒸餾水的比色管中，常溫下顯色5 min ；
(4)檢測：通過顯色后溶液的顏色與比色卡的顏色對比，確定蜂蜜中的淀粉酶值。
[0005]上述步驟（I)中所述的酶解緩沖液，其組成為乙酸鈉（0.43 moL/L)、氯化鈉（O. ImoL/L)和冰醋酸（O. 7wt. %);上述步驟（2)中所述的淀粉溶液濃度為O. 04wt. % ;上述步驟
(3)中所述的顯色液，其組成為碘化鉀（4.04wt.%)和碘（O. OlSwt. % );上述步驟（3)所述比色管為25mL具塞比色管（管徑2cm，管長15cm);上述（4)中所述的比色卡的制作及范圍如下：在常溫下，將一系列已知酶值的蜂蜜按I中所述步驟制備、酶解和顯色，根據所獲顏色，制成多色比色卡，對應的淀粉酶值分別為：
(1)0-24: O, 6，12，18，24 (顯色時間 10 分鐘）；
(2)0-14.5 : O, 2，4，7.5，14. 5 (顯色時間 20 分鐘）。
[0006]本發明的有益效果：本發明建立的采用多色比色卡法快速檢測蜂蜜中淀粉酶值的方法。其顯著特點是可以在常溫下進行測定，不需要分光光度計、便攜式儀器和水浴加熱等儀器設備，具有操作簡便、條件簡單、快速等優點。因此該方法適合應用到工商、質檢、超市和家庭等現場快速檢測蜂蜜中的淀粉酶值，對蜂蜜產品的質量水平作出快速判斷，以維護人們的經濟利益和保證人們的食用安全。
[0007]【具體實施方式】：
實施例I:
比色卡的制作方法
(I)樣品的制備：取已知酶值大于24的蜂蜜用蒸餾水稀釋成酶值分別為6，12，18和24的蜂蜜樣品；準確稱取5. Og上述蜂蜜樣液于燒杯中，加入7. 5 mL酶解緩沖液和約10 mL的蒸餾水，攪拌使樣品完全溶解，然后移入25mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度并搖勻；以蒸餾水代替蜂蜜，作為酶值為O的樣品。
[0008](2)酶解：準確吸取2. 5mL上述溶液于盛有12. 5mL淀粉溶液的試管中混勻，在常溫下酶解IOmin。
[0009](3)顯色：吸取上述酶解液5. OmL于盛有2. 5mL顯色液和6. 6mL蒸餾水的比色管中顯色，根據所獲顏色，制成比色卡，比色卡對應的酶值范圍為0-24。
[0010]實際樣品測定
(1)樣品的制備：準確稱取5.Og蜂蜜樣液于燒杯中，加入7. 5 mL酶解緩沖液和約10mL的蒸餾水，攪拌使樣品完全溶解。然后移入25mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度并搖勻；
(2)酶解：準確吸取2.5mL制備好的樣品溶液于盛有12. 5mL淀粉溶液的試管中混勻，在常溫下酶解10 min。
[0011](3)顯色：吸取上述酶解液5. OmL于盛有2. 5mL顯色液和6. 6mL蒸餾水的比色管中，常溫下顯色5 min。
[0012](4)檢測：通過顯色液與比色卡的顏色對比，其顏色與酶值為24的色澤最為接近，故確定蜂蜜樣品中的淀粉酶值為24。
[0013]實施例2:
比色卡的制作方法
(O樣品的制備：取已知酶值大于15的蜂蜜用蒸餾水稀釋成酶值分別為2，4，7. 5和14. 5的蜂蜜樣品，準確稱取5. Og上述蜂蜜樣液于燒杯中，加入7. 5 mL酶解緩沖液和約10mL的蒸餾水，攪拌使樣品完全溶解，然后移入25mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度并搖勻；以蒸餾水代替蜂蜜，作為酶值為O的樣品。
[0014](2)酶解：準確吸取2. 5mL上述溶液于盛有12. 5mL淀粉溶液的試管中混勻，在常溫下酶解20 min。
[0015](3)顯色：吸取上述酶解液5. OmL于盛有2. 5mL顯色液和6. 6mL蒸懼水的比色管中顯色，根據所獲顏色，制成比色卡，比色卡對應的酶值范圍為0-14. 5。
[0016]實際樣品測定
(1)樣品的制備：準確稱取5.Og蜂蜜樣液于燒杯中，加入7. 5 mL酶解緩沖液和約10mL的蒸餾水，攪拌使樣品完全溶解。然后移入25mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度并搖勻；
(2)酶解：準確吸取2.5mL制備好的樣品溶液于盛有12. 5mL淀粉溶液的試管中混勻，在常溫下酶解20 min。
[0017](3)顯色：吸取上述酶解液5. OmL于盛有2. 5mL顯色液和6. 6mL蒸餾水的比色管中，常溫下顯色5 min。
[0018](4)檢測：通過顯色液與比色卡的顏色對比，其顏色介于酶值為2和4的色澤之間，故估算蜂蜜樣品中的淀粉酶值為3。
[0019]備注：上文中淀粉酶值的單位均為mL/(g · h)。
[0020]以上所述僅為本發明的較佳實施例，凡依本發明申請專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應屬本發明的涵蓋范圍。
【權利要求】
1.一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于包括以下步驟： (1)樣品的制備：準確稱取5.O g蜂蜜樣液于燒杯中，加入7. 5 mL酶解緩沖液和10 mL的蒸餾水，攪拌使樣品完全溶解，然后移入25 mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度，搖勻； (2)酶解：準確吸取2.5 mL制備好的樣品溶液于盛有12. 5 mL淀粉溶液的試管中混勻；酶解 10 min 或 20 min ； (3)顯色：吸取上述酶解液5.O mL于盛有2.5 mL顯色液和6.6 mL蒸餾水的比色管中，常溫下顯色5 min ； (4)檢測：通過顯色后溶液的顏色與比色卡的顏色對比，確定蜂蜜中的淀粉酶值。
2.根據權利要求I所述的一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于：所述的酶解緩沖液的組成為O. 43 moL/L乙酸鈉、O. I moL/L氯化鈉和O. 7wt. %冰醋酸。
3.根據權利要求I所述的一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于：步驟（2)淀粉溶液的濃度為O. 04wt. %。
4.根據權利要求I所述的一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于：步驟（2)在常溫下酶解。
5.根據權利要求I所述的一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于：步驟（3)中顯色液的組成為4. 04wt. %碘化鉀和O. 018wt. %碘。
6.根據權利要求I所述的一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于：比色管為25mL具塞比色管，管徑2 cm，管高15 cm。
7.根據權利要求I所述的一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于：在常溫下，將一系列已知酶值的蜂蜜按所述步驟制備、酶解和顯色，根據所獲顏色，制成多色比色卡，比色卡對應的酶值范圍分別為0-24和0-14. 5。
【文檔編號】G01N21/78GK104132939SQ201410330025
【公開日】2014年11月5日 申請日期:2014年7月12日 優先權日:2014年7月12日
【發明者】張金彪, 張素平, 周碧青 申請人:福建農林大學
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