一種高通量微孔板的制作方法
【專利摘要】本實用新型公開了一種高通量微孔板，微孔板包括多個微孔組，微孔組至少包括第一微孔和第二微孔，微孔組還包括用于連通所述第一微孔和所述第二微孔的氣體擴散通道。利用本實用新型提供的高通量微孔板，能夠高通量的實現酶抑制劑的篩選，檢測靈敏度高，結果準確可靠。
【專利說明】一種高通量微孔板
【技術領域】
[0001]本實用新型涉及一種生化檢測裝置，尤其涉及一種微孔板。
【背景技術】
[0002]微孔板，也常稱作多孔樣品盤，用于容納多個(如6，12，24，48，96，384或更多)樣品。能夠通過放射自顯影、液體閃爍計數、發光測量法等多種技術進行檢定這些樣品。
[0003]多孔微孔板主要用在化學、生物、藥學領域中的檢測方面，對液體標本進行分析和/或研究。標準微孔板裝置通常包括具有多個開放式孔的微孔板和用于對孔進行封閉的可選擇閉合裝置。通常微孔板一般包括單一的模制結構，該模制結構包括用于容納按矩形陣列排列的多個開放式孔的剛性框架。微孔板的尺寸多種多樣；孔的尺寸大到可以容納五毫升液體，小到僅能容納少許液體。此外，微孔板的材料也多種多樣，如聚苯乙烯、聚碳酸脂、聚丙稀、特氟鄉侖、玻璃、陶資和石英。多種常見的傳統微孔板包括開放式孔按8X12矩形陣列排列的96孔板，微孔數量更多的有16X24矩形陣列排列的384孔板和32X48矩形陣列排列的1536孔板。
[0004]在高通量檢測過程中，如果能夠在反應體系中直接檢測目標物質，則這種檢測是比較容易實現的，比如反應過后直接用酶標儀檢測目標物質，(中國發明專利申請“一種快速篩選、評價抗菌生物活性物質的方法”，申請號:201010154968.1)。如果反應后的目標物質無法直接檢測，例如，需要在反應后的反應體系中加入檢測試劑，目標物質與檢測試劑反應后才能使用儀器進行檢測，則這種情況在一定程度上阻礙了高通量檢測的進度。技術人員在高通量檢測過程中常遇到的一個更大的困難是，生物和/或化學反應和目標物質檢測根本無法在同一個系統中進行。造成這種困難的原因，包括檢測試劑會干擾生物和/或化學反應的進行，或者，生物和/或化學反應中的其他物質會干擾檢測的準確性和靈敏度。這些困難導致了此類反應無法使用高通量的手段進行檢測，極大的阻礙了研發的進度。
[0005]特別是涉及到酶催化的反應，由于酶的催化活性，及易受到環境的影響，對酶催化產物的檢測一般很難直接在酶催化體系中進行檢測。例如，H2S是一個重要的氣體信號分子，其具有廣泛的生理功能。H2S在人體內主要通過Cystathionine β -synthase (CBS)和Cystathionine y -lyase (CSE)維生素B6依賴酶催化產生。到現在為止，還沒有報道對CBS或CSE的高效和選擇性的抑制劑的高通量檢測方法。如何高通量的檢測CBS或CSE催化產生H2S氣體，是高通量檢測CBS或CSE活力以及開發其活性調節劑的長期存在的一個研究瓶頸。無法高通量的檢測CBS或CSE催化產生H2S氣體的原因為，如果將用于檢測H2S氣體的Ellman試劑[5，5’ -二硫代二(2-硝基苯甲酸；DTNB]加入酶催化體系中會干擾酶反應，且反應體系中的其他成分會干擾檢測的特異性、準確性和靈敏度。
[0006]因此，本領域的技術人員致力于開發一種適用于高通量檢測的，生物和/或化學反應和目標物質檢測互不干擾的技術方案，特別是開發出一種能夠高通量的篩選酶活性調節劑的技術方案。實用新型內容
[0007]有鑒于現有技術的上述缺陷，本實用新型所要解決的技術問題是如何高通量檢測生化反應中的產物，且能夠避免生化學反應和目標物質檢測的相互干擾。
[0008]為實現上述目的，本實用新型提供了一種高通量微孔板，所述微孔板包括多個微孔組，所述微孔組至少包括第一微孔和第二微孔，所述微孔組還包括用于連通所述第一微孔和所述第二微孔的氣體擴散通道。本實用新型中，高通量微孔板是指能夠高通量的對待測樣品進行檢測的微孔板。
[0009]優選地，所述氣體擴散通道設置于所述第一微孔和所述第二微孔間的微孔壁上。本實用新型中所述的微孔壁是指微孔板中微孔之間的部分，即，用于隔開不同微孔使每個微孔形成獨立空間的框架。
[0010]進一步地，所述第一微孔為反應孔，所述第二微孔為檢測孔，所述氣體擴散通道允許所述第一微孔中的至少一種反應產物經所述氣體擴散通道進入所述第二微孔。
[0011]優選地，所述氣體擴散通道為圓形、方形或矩形管狀的通道。
[0012]優選地，所述氣體擴散通道上邊緣距離所述微孔壁頂部的距離小于所述第一微孔深度的三分之二。
[0013]優選地，所述氣體擴散通道中設有具有選擇性通透作用的膜。具有選擇性通透作用的膜是指對不同粒子的通過具有選擇性的薄膜，即，一種只給某種或某類分子或粒子擴散進出的薄膜。
[0014]優選地，所述微孔板上的微孔程矩形陣列排列，所述第一微孔和所述第二微孔間隔排列。
[0015]進一步地，為了適用于高通量檢測生化反應中產生的氣體目標物質，本實用新型提供了一種簡單的氣體擴散通道設置方式，即，所述氣體擴散通道為在所述微孔壁頂部設置的凹槽。這種設置方式，加工簡單方便，使用效果也很好。
[0016]優選地，所述凹槽深度小于所述第一微孔深度的三分之二。
[0017]更優選地，所述凹槽深度小于或等于所述第一微孔深度的二分之一。本實用新型中，關于凹槽的設置深度，只要保證第一微孔或第二微孔中的液體不會漫過凹槽進入另一偵牝就能夠達到本實用新型的效果。
[0018]進一步地，本實用新型提供的用于高通量檢測的微孔板，其中所述微孔組還包括三微孔，所述第三微孔和所述第一微孔之間設有第二通道，所述第二通道中設有具有選擇性通透作用的膜。
[0019]優選地，所述第三微孔為物料孔，所述第三微孔中的反應原料經所述第二通道進入所述第一微孔中，反應后產物經所述氣體擴散通道進入所述第二微孔。
[0020]本實用新型設置第三微孔的目的在于，在一些實施方式中，能夠在第一微孔中培養細胞或微生物，第三微孔可以通過第二通道為這些生命體提供新鮮的營養物質，滿足第一微孔中生命體的代謝需要。第一微孔中生命體代謝產生的代謝產物，能夠通過氣體擴散通道，進入第二微孔中，被定性或定量的檢測出來。
[0021]優選地，本實用新型提供的微孔板，還包括密封所述微孔的密封裝置，如封板膜。
[0022]技術效果
[0023]利用本實用新型提供的高通量微孔板，高通量的實現酶抑制劑的篩選，檢測靈敏度高，結果準確可靠。通過篩選約7200個小分子化合物，最終篩選得到了 9個CBS酶抑制劑，其Κ5(ι〈50μΜ，為高效CBS抑制劑。
[0024]以下將結合附圖對本實用新型的構思、具體結構及產生的技術效果作進一步說明，以充分地了解本實用新型的目的、特征和效果。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0025]圖1是本實用新型的一個較佳實施例的圓形孔微孔板的立體圖
[0026]圖2是圖1中的A-A剖視圖
[0027]圖3是設有選擇性通透作用的膜的微孔板結構
[0028]圖4是本實用新型的具有凹槽通道的微孔板
[0029]圖5是圖4中A-A剖視圖
[0030]圖6本實用新型的具有凹槽通道的方形孔微孔板
【具體實施方式】
[0031]實施例1
[0032]如圖1和圖2所示，本實施例提供了一種用于高通量檢測的微孔板，為8X12矩形陣列排列的96孔板，包括具有48個微孔組的基板I ;每個微孔組包括第一微孔11和第二微孔12,第一微孔和第二微孔之間設有氣體擴散通道111。微孔為一端開放式孔,開口于基板I的一個表面；
[0033]氣體擴散通道111設置于第一微孔11和第二微孔12間的微孔壁110上。
[0034]第一微孔為反應孔，第二微孔為檢測孔，在實際使用過程中，氣體擴散通道允許第一微孔中的至少一種氣體反應產物經所述氣體擴散通道進入所述第二微孔。
[0035]氣體擴散通道可以設置為圓形、方形或矩形管狀的通道。
[0036]氣體擴散通道上邊緣距離所述微孔壁頂部的距離小于所述第一微孔深度的三分之二。
[0037]實施例2
[0038]本實施例中的微孔板與實施例1中的結構基本一致，不同之處僅為，氣體擴散通道111中設有具有選擇性通透作用的膜1111。
[0039]實施例3
[0040]為了適用于高通量檢測生化反應中產生的氣體目標物質，本實施例提供的微孔板，為8X12矩形陣列排列的96孔板，包含48個微孔組，本實施例提供了一種簡單的氣體擴散通道設置方式，如圖4和圖5所示，氣體擴散通道為在所述微孔壁頂部設置的凹槽1112。本實施例中所述凹槽深度為第一微孔11深度的二分之一。在其他的實施方式中，可以根據具體情況設置凹槽深度，如根據生化反應體系和檢測體系中的液體體積選擇適宜的凹槽深度，既保證兩個體系中的液體不會通過凹槽混合，又能滿足第一微孔中反應生成的氣體能夠及時擴散入第二微孔中。
[0041]實施例4
[0042]本實施例提供了一種方形孔的微孔板，圖6所示，除微孔形狀與實施3中不同外，微孔板的結構與實施例3中完全相同。[0043]以上詳細描述了本實用新型的較佳具體實施例。應當理解，本領域的普通技術人員無需創造性勞動就可以根據本實用新型的構思作出諸多修改和變化。因此，凡本【技術領域】中技術人員依本實用新型的構思在現有技術的基礎上通過邏輯分析、推理或者有限的實驗可以得到的技術方案，皆應在由權利要求書所確定的保護范圍內。
【權利要求】
1.一種高通量微孔板，其特征在于，所述微孔板包括多個微孔組，所述微孔組至少包括第一微孔和第二微孔，所述微孔組還包括用于連通所述第一微孔和所述第二微孔的氣體擴散通道。
2.如權利要求1所述的微孔板，其特征在于，所述氣體擴散通道設置于所述第一微孔和所述第二微孔間的微孔壁上。
3.如權利要求2所述的微孔板，其特征在于，所述第一微孔為反應孔，所述第二微孔為檢測孔，所述氣體擴散通道允許所述第一微孔中的至少一種氣體反應產物經所述氣體擴散通道進入所述第二微孔。
4.如權利要求2所述的微孔板，其特征在于，所述氣體擴散通道為圓形、方形或矩形管狀的通道。
5.如權利要求4所述的微孔板，其特征在于，所述氣體擴散通道上邊緣距離所述微孔壁頂部的距離小于所述第一微孔深度的三分之二。
6.如權利要求2所述的微孔板，其特征在于，所述氣體擴散通道中設有具有選擇性通透作用的膜。
7.如權利要求2所述的微孔板，其特征在于，所述氣體擴散通道為在所述微孔壁頂部設置的凹槽。
8.如權利要求7所述的微孔板，其特征在于，所述凹槽深度小于所述第一微孔深度的三分之二。
9.如權利要求7所述的微孔板，其特征在于，所述凹槽深度小于或等于所述第一微孔深度的二分之一。
10.如權利要求1所述的微孔板，其特征在于，所述微孔組還包括第三微孔，所述第三微孔和所述第一微孔之間設有第二通道，所述第二通道中設有具有選擇性通透作用的膜。
11.如權利要求10所述的微孔板，其特征在于，所述第三微孔為物料孔，所述第三微孔中的反應原料經所述第二通道進入所述第一微孔中，反應后氣體產物經所述氣體擴散通道進入所述第二微孔。
12.如上述任一權利要求所述的微孔板，其特征在于，所述微孔板還包括密封所述微孔的密封裝置。
13.如權利要求12所述的微孔板，其特征在于，所述微孔密封裝置為封板膜。
【文檔編號】G01N33/00GK203551540SQ201320620517
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2013年10月9日 優先權日:2013年10月9日
【發明者】吳方, 周越洋, 于晶 申請人:上海交通大學
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