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一種光甘草定含量的測(cè)定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種光甘草定含量的測(cè)定方法，包括（1）設(shè)定高效液相色譜條件；（2）制備對(duì)照品溶液；（3）制備供試品溶液；（4）利用高效液相色譜法，且通過(guò)梯度洗脫的方式進(jìn)行含量測(cè)定。本發(fā)明所述的方法具有專一性，能夠準(zhǔn)確的測(cè)定光甘草定的含量，而采用梯度洗脫進(jìn)行分析，具有很好的分離效果，能夠有效縮短分析時(shí)間，因此，具有所測(cè)成分分離度、線性關(guān)系、重現(xiàn)性、精密度、穩(wěn)定性、回收率均較好的優(yōu)勢(shì)，能夠準(zhǔn)確，簡(jiǎn)便，快捷的得到光甘草定的含量。
【專利說(shuō)明】一種光甘草定含量的測(cè)定方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種光甘草定含量的測(cè)定方法，屬于含量檢測(cè)方法【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]甘草為豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.、脹果甘草 G.1nf IataBat.或光果甘草G.glabraL.的干燥根及根莖，具有補(bǔ)脾益氣，清熱解毒，祛痰止咳，緩急止痛，調(diào)和諸藥的功能。光果甘草中還含有特有的黃酮類成分光甘草定，它具有較強(qiáng)的抗炎，抗氧化和抗菌作用，應(yīng)用前景廣闊。
[0003]光甘草定能深入皮膚內(nèi)部并保持高活性，美白并高效抗氧化。有效抑制黑色素生成過(guò)程中多種酶的活性，特別是抑制酪胺酸酵素活性。同時(shí)還具有防止皮膚粗糙和抗炎、抗菌的功效。光甘草定是目前療效好、功能全面的美白成分。光甘草經(jīng)過(guò)多年來(lái)的使用，作用明顯，安全性好。是目前國(guó)際上高檔美白化妝品的主要功效成分。
[0004]在專利號(hào)為201110230297.7的專利《香草醛-硫酸比色法測(cè)定光甘草定含量的方法》一文中采用香草醛-硫酸顯色后，利用比色法來(lái)測(cè)定光甘草定的含量，但是香草醛-硫酸是一種通用顯色劑，針對(duì)光甘草定不具有專一性，可見(jiàn)用來(lái)測(cè)定待測(cè)物種一類化合物的含量，比如說(shuō)甘草中總黃酮的含量，其包括但不僅僅是光甘草定的含量。
[0005]而在《高效液相色譜法測(cè)定光果甘草中光甘草定的含量》等相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)中，采用等度洗脫的方式，但光甘草定分離度不佳。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為了克服現(xiàn)有技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種簡(jiǎn)便、快捷、重復(fù)性好的光甘草定含量的測(cè)定方法。
[0007]為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為:
一種光甘草定含量的測(cè)定方法，其特征在于，包括以下步驟:
(O設(shè)定高效液相色譜條件:溫度為室溫，相對(duì)濕度為25~40%，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈為流動(dòng)相A，以濃度為1%冰醋酸溶液為流動(dòng)相B，洗脫方式為梯度洗脫，流速為0.8~1.2ml/min，柱溫為25~40°C，檢測(cè)波長(zhǎng)為278~282nm ；
(2)制備對(duì)照品溶液:將光甘草定對(duì)照品用有機(jī)溶劑溶解，形成對(duì)照品溶液，且所述的對(duì)照品溶液中，光甘草定對(duì)照品的濃度為0.1 "0.5mg/ml ；
(3)制備供試品溶液:將光甘草定粗提物用有機(jī)溶劑利用超聲溶解5~20min，然后，冷卻至室溫，得到供試品溶液，且所述的供試品溶液中光甘草定粗提物的濃度為0.2^2mg/ml ；
(4)含量測(cè)定:分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μ 1，注入液相色譜儀，進(jìn)行高效液相色譜儀的操作，并記錄色譜圖，然后，利用色譜圖計(jì)算光甘草定粗提物中光甘草定的含量。
[0008]進(jìn)一步，步驟(1)中，所述的室溫的溫度優(yōu)選為20°C，相對(duì)濕度優(yōu)選為35%，洗脫時(shí)的流速優(yōu)選為lml/min,柱溫優(yōu)選為30°C,檢測(cè)波長(zhǎng)優(yōu)選為280nm。
[0009]此外，步驟(1)中，所述的梯度洗脫中流動(dòng)相A和流動(dòng)相B在不同的時(shí)間段的濃度關(guān)系如下表所示:

【權(quán)利要求】
1.一種光甘草定含量的測(cè)定方法，其特征在于，包括以下步驟: (O設(shè)定高效液相色譜條件:溫度為室溫，相對(duì)濕度為25~40%，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈為流動(dòng)相A，以濃度為1%冰醋酸溶液為流動(dòng)相B，洗脫方式為梯度洗脫，流速為0.8~1.2ml/min，柱溫為25~40°C，檢測(cè)波長(zhǎng)為278~282nm ； (2)制備對(duì)照品溶液:將光甘草定對(duì)照品用有機(jī)溶劑溶解，形成對(duì)照品溶液，且所述的對(duì)照品溶液中，光甘草定對(duì)照品的濃度為0.1 ~0.5mg/ml ； (3)制備供試品溶液:將光甘草定粗提物用有機(jī)溶劑利用超聲溶解5~20min，然后，冷卻至室溫，得到供試品溶液，且所述的供試品溶液中光甘草定粗提物的濃度為0.2~2mg/ml ； (4)含量測(cè)定:分別取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20μ 1，注入液相色譜儀，進(jìn)行高效液相色譜儀的操作，并記錄色譜圖，然后，利用色譜圖計(jì)算光甘草定粗提物中光甘草定的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種光甘草定含量的測(cè)定方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的室溫的溫度為20°C，相對(duì)濕度為35%，洗脫時(shí)的流速為lml/min，柱溫為30°C，檢測(cè)波長(zhǎng)為 280nm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種光甘草定含量的測(cè)定方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的梯度洗脫中流動(dòng)相A和流動(dòng)相B在不同的時(shí)間段的濃度關(guān)系如下表所示:
4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的一種光甘草定含量的測(cè)定方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的梯度洗脫中流動(dòng)相A和流動(dòng)相B在不同的時(shí)間段的濃度關(guān)系如下表所示:
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種光甘草定含量的測(cè)定方法，其特征在于，步驟(2)和步驟(3)中所述的有機(jī)溶劑為濃度為30-60%的甲醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種光甘草定含量的測(cè)定方法，其特征在于，步驟(2)和步驟(3)中所述的有機(jī)溶劑為濃度為40%的甲醇。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種光甘草定含量的測(cè)定方法，其特征在于，步驟(2)中，所述的對(duì)照品溶液中，光甘草定對(duì)照品的濃度為0.2mg/mlo
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種光甘草定含量的測(cè)定方法，其特征在于，步驟(3)中，所述的供試品溶液中光甘草定粗提物的濃度為lmg/ml。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種光甘草定含量的測(cè)定方法，其特征在于，步驟(3)中，超聲溶解的時(shí)間為15min。
【文檔編號(hào)】G01N30/74GK104076110SQ201410346494
【公開(kāi)日】2014年10月1日 申請(qǐng)日期:2014年7月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月21日
【發(fā)明者】易銘, 鐘慧, 楊永安, 湯文建 申請(qǐng)人:江蘇天晟藥業(yè)有限公司