一種制備產后逐瘀膠囊的檢測方法
【專利摘要】本發明涉及一種制備產后逐瘀膠囊的檢測方法，該方法涉及川芎、當歸、益母草的薄層色譜鑒別，阿魏酸酸的高效液相色譜含量測定及其限度。
【專利說明】一種制備產后逐瘀膠囊的檢測方法【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種制備產后逐瘀膠囊的檢測方法。
【背景技術】
[0002]產婦分娩后的產后淤血主要是子宮內遺留的余血和濁液，是由氣血運行失常，血瘀氣滯引起，是婦產科臨床常見病之一。
[0003]中醫認為，本病病理主要是氣血運行失常，血瘀氣滯。西醫認為，其病因主要是子宮復原不全，當部分胎盤、胎膜殘留或感染而影響子宮收縮和復原；或產婦如患有慢性疾病、失血過多、過度疲倦、體質未能恢復，或子宮過度膨脹、子宮肌瘤等局部因素，均可影響子宮復原不全。其次，剖宮產術后，子宮壁切口裂開、手術時止血不徹底或因術后感染，影響子宮復原而導致流血不止。
[0004]因此，目前對婦女產后淤血，西醫一般采用加速宮縮以止血，及補血，繼以抗生素控制感染等，經過治療雖能緩解癥狀，但有一定的不良反應，治療效果不甚理想，在治療該病時雖然能達到立竿見影的效果，但西藥治療婦女產后子宮淤血、毒副作用比較大，容易反復發作，而且不能從根本上徹底治愈該病。我國傳統醫學利用中藥治療婦女產后子宮淤血，不但能達到迅速止血的作用，更重要的是還能對人體進行雙向調理，從而達到陰陽平衡，使氣血正常運行，達到止血的目的。
[0005]目前，國內已經有相關專利申請例如2013107103201中即公開了一種產后逐瘀顆粒及其制備方法，但是該專利公開的制備方法并不完備，也缺乏保證產品質量的有效檢測方法。而眾所周知的，中藥成份相輔相克，對制備工藝的要求非常高，否則很難達到預期的治療效果。因此，目前現有技術中相關產品的制備方法都無法滿足實際生產的需要。
【發明內容】
[0006]本發明正是從現有技術出發，提供了一種制備產后逐瘀膠囊的檢測方法，其適于廣泛應用實際生產過程中。
[0007]本發明提供的制備產后逐瘀膠囊的檢測方法，其中所述產后逐瘀膠囊由益母草、當歸、川芎、炮姜制成，所述產后逐瘀膠囊采用如下制備方法獲得:
[0008]益母草1248g當歸156g川芎178g炮姜78g
[0009]以上四味，取益母草、當歸、川芎各20g粉碎成細粉，備用，剩余當歸、川芎和炮姜加10倍量水蒸餾提取3小時，收集揮發油，藥渣與剩余益母草分別加10倍量、8倍量水煎煮二次，每一次2小時，第二次I小時，濾過，濾液合并，濃縮至相對密度在50°C測定為1.35的稠膏，加入上述細粉，混勻，烘干，制顆粒，再烘干，加入當歸等揮發油，混勻，裝膠囊，制成本品1000粒，即得；
[0010]制備所述產后逐瘀膠囊的檢測方法為:
[0011](I)取本品10粒，傾出內容物，研細，加無水乙醇IOml超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液，另取當歸、川芎對照藥材各0.5g，分別加無水乙醇10ml，同法制成對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液10 μ 1，對照品溶液5 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9: I)為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；
[0012](2)取本品5粒，傾出內容物，研細，加無水乙醇30ml回流提取I小時,濾過,濾液加活性炭0.5g，超聲處理10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取益母草對照藥材lg，加無水乙醇30ml回流提取I小時，濾過，濾液加活性炭0.5g，超聲處理10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為對照藥材溶液，再取鹽酸水蘇堿對照品加甲醇制成每Iml含Img的對照品溶液，照薄層色譜法試驗，分別吸取上述溶液各10 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-無水乙醇-鹽酸(10: 6: I)為展開齊U，展開，取出，晾干，置105°C加熱5分鐘，噴以稀碘化鉍鉀試液，在日光下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；
[0013](3)含量測定
[0014]色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-1%冰醋酸溶液(19: 81)為流動相；檢測波長為323nm;柱溫40°C;流速0.8ml/min，理論板數按阿魏酸峰計算應不低于3000，
[0015]對照品溶液的制備取阿魏酸對照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每Iml含IOyg的溶液，即得，
[0016]供試品溶液的制備取本品30粒，研細，傾出內容物，精密稱定，研細，取約4g，精密稱定，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理50分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液15ml，置25ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得，
[0017]測定法分別精密吸取對照溶液與供試品溶液各20 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
[0018]優選的，每粒所述產后逐瘀膠囊含當歸和川芎以阿魏酸(CltlHltlO4)計，不少于30 μ g0
[0019]優選的，含量測定過程中超聲處理的功率為120W，頻率為59KHz。
[0020]本發明通過大量的創造性勞動發現，處方中當歸、川芎具有補血活血，調經止前之功效，均主含阿魏酸。因此，本發明采用高效液相色譜法對制劑中阿魏酸進行了定量，方法簡便、靈敏，可作為控制和考察本品質量的核心要素。
[0021]另一方面，在制備產后逐瘀膠囊實際生產制備過程中，采用本發明的檢測方法簡便、靈敏，在有效控制生產成本的同時還能實現精確控制產品的質量，適于廣泛應用實際生產過程中。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0022]圖1當歸、川芎的TLC圖譜的色譜圖
[0023]圖2益母草的TLC圖譜
【具體實施方式】
[0024]下面，給出本發明產后逐瘀膠囊的檢測方法的具體實施例。
[0025]實施例1、[0026]益母草1248g當歸156g川芎178g炮姜78g
[0027]制備方法:
[0028]以上四味，取益母草、當歸、川芎各20g粉碎成細粉，備用，剩余當歸、川芎和炮姜加10倍量水蒸餾提取3小時，收集揮發油，藥渣與剩余益母草分別加10倍量、8倍量水煎煮二次，每一次2小時，第二次I小時，濾過，濾液合并，濃縮至相對密度1.35 (500C )的稠膏，加入上述細粉，混勻，烘干，制顆粒，再烘干，加入當歸等揮發油，混勻，裝膠囊，制成1000粒，即得。
[0029]檢測方法:
[0030](I)取本品10粒，傾出內容物，研細，加無水乙醇IOml超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取當歸、川芎對照藥材各0.5g，分別加無水乙醇10ml，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，吸取上述供試品溶液10μ1，對照品溶液5μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9: I)為展開劑，展開，取出，晾干。在紫外光(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
[0031](2)取本品5粒，傾出內容物，研細，加無水乙醇30ml回流提取I小時,濾過,濾液加活性炭0.5g，超聲處理10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液。另取益母草對照藥材lg，加無水乙醇30ml回流提取I小時，濾過，濾液加活性炭0.5g，超聲處理10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為對照藥材溶液。再取鹽酸水蘇堿對照品加甲醇制成每Iml含Img的對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2010年版一部附錄VI B)試驗，分別吸取上述溶液各10 μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-無水乙醇-鹽酸(10: 6: I)為展開劑，展開，取出，晾干，置105°C加熱5分鐘，噴以稀碘化鉍鉀試液，在日光下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
[0032](3)含量測定
[0033]色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-1%冰醋酸溶液(19: 81)為流動相；檢測波長為323nm。理論板數按阿魏酸峰計算應不低于3000。
[0034]對照品溶液的制備取阿魏酸對照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每Iml含IOyg的溶液，即得。
[0035]供試品溶液的制備取本品30粒，研細，傾出內容物，精密稱定，研細，取約4g，精密稱定，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率120W，頻率59KHz) 50分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液15ml，置25ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0036]測定法分別精密吸取對照溶液與供試品溶液各20 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
[0037]本品每粒含當歸和川芎以阿魏酸(C10H1004)計，不得少于30 μ g。
[0038]實驗例1:當歸、川芎藥材的薄層色譜鑒別
[0039]以當歸、川芎對照藥材為陽性對照(中國藥品生物制品檢定所提供，批號120927-200310，120918-200406)，以正己烷-醋酸乙酯(9: I)為展開為，展開后的斑點365nm檢視，熒光斑點圓整，分離效果好。另取處方中不含當歸、川芎的其它藥材按制備方法制成陰性樣品，再按供試品溶液制備方法制成陰性樣品溶液。經三批樣品及陰性對照試驗，陰性無干擾。
[0040]其中附圖1中，1、當歸對照藥材2、川芎對照藥材3、4、5三批樣品6、陰性樣品。
[0041]實驗例2:益母草藥材的薄層色譜鑒別
[0042]以鹽酸水蘇堿對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號110712-200306)及益母草對照藥材(中國藥品生物制品檢定所，批號1120912-200306)為陽性對照，曾比較了 1:正丁醇-鹽酸-水(4: I: 0.5)，I1:丙酮-無水乙醇-鹽酸(10: 6: I)等展開劑，其中以展開劑II展開后的斑點圓整，分離效果好。另取處方中不含益母草的其它藥材按制備方法制成陰性樣品，再按供試品溶液制備方法制成陰性樣品溶液。經三批樣品及陰性對照試驗，陰性無干擾。
[0043]其中附圖2中，1、鹽酸水蘇堿對照品2、益母草對照藥材3、4、5三批樣品6、陰性樣品。
[0044]實驗例3:阿魏酸含量測定
[0045]本品由益母劃、當歸、川芎、炮姜四味藥組成。處方中當歸、川芎具有補血活血，調經止前之功效，均主含阿魏酸。現采用高效液相色譜法對制劑中阿魏酸進行了定量，方法簡便、靈敏，可作為控制和考察本品內在質量的方法。
[0046](I)儀器與試藥
[0047]LC-1OADvp高效液相色譜儀(島津)，SPD-1OAvp檢測器，阿魏酸對照品(批號0773-9910，由中國藥品生物制品檢定所提供)，乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。
[0048](2)色譜條件
[0049]色譜柱:十八烷基鍵合硅膠柱(0DS)4.6X250nm ;流動相:乙腈-1 %冰醋酸溶液(19: 81);檢測波長:323nm;柱溫40°C ;流速0.8ml/min。在此條件下阿魏酸與其它組分均能達到很好的分離，主峰與最近的雜質峰的分離度大于1.5。理論板數均大于3000。
[0050](3)檢測波長的確定
[0051]取阿魏酸對照品溶液進行紫外外描，得吸收曲線，結果最大吸收峰為323nm，與文獻報道一致，因此選用323nm波長作為檢測波長。
[0052](4)流動相的選擇
[0053]根據資料查找，曾以乙腈-1 %冰醋酸溶液不同比例的多種流動相體系進行試驗，結果制劑中的其它組分與阿魏酸不能有效分離，而乙腈-1%冰醋酸溶液(19: 81)流動相體系，阿魏酸與其它組分分離完全，且出峰快，結果滿意
[0054](5)供試品溶液的制備:取本品30粒，研細，傾出內容物，精密稱定，研細，取約4g，精密稱定，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率120W，頻率59KHz) 50分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液15ml，置25ml量瓶中，力口水稀釋至刻度，搖勻，即得。
[0055]另在實驗過程中，比較了不同超聲提取時間對含量結果的影響，結果如表I。
[0056]表I超聲提取時間的選擇
[0057]
【權利要求】
1.一種制備產后逐瘀膠囊的檢測方法，其中所述產后逐瘀膠囊由益母草、當歸、川芎、炮姜制成，所述產后逐瘀膠囊采用如下制備方法獲得: 益母草1248g當歸156g川芎178g炮姜78g 以上四味，取益母草、當歸、川芎各20g粉碎成細粉，備用，剩余當歸、川芎和炮姜加10倍量水蒸餾提取3小時，收集揮發油，藥渣與剩余益母草分別加10倍量、8倍量水煎煮二次，每一次2小時，第二次I小時，濾過，濾液合并，濃縮至相對密度在50°C測定為1.35的稠膏，加入上述細粉，混勻，烘干，制顆粒，再烘干，加入當歸等揮發油，混勻，裝膠囊，制成本品1000粒，即得； 制備所述產后逐瘀膠囊的檢測方法為: (1)取本品10粒，傾出內容物，研細，加無水乙醇IOml超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液，另取當歸、川芎對照藥材各0.5g，分別加無水乙醇10ml，同法制成對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液IOy 1，對照品溶液5μ 1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9: I)為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點； (2)取本品5粒，傾出內容物，研細，加無水乙醇30ml回流提取I小時,濾過,濾液加活性炭0.5g，超聲處理10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取益母草對照藥材lg，加無水乙醇30ml回流提取I小時，濾過，濾液加活性炭0.5g，超聲處理10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為對照藥材溶液，再取鹽酸水蘇堿對照品加甲醇制成每Iml含Img的對照品溶液，照薄層色譜法試驗，分別吸取上述溶液各ΙΟμΙ，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-無水乙醇-鹽酸(10: 6: I)為展開劑，展開，取出，晾干，置105°C加熱5分鐘，噴以稀碘化鉍鉀試液，在日光下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點； (3)含量測定 色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-1 %冰醋酸溶液(19: 81)為流動相；檢測波長為323nm;柱溫40°C;流速0.8ml/min，理論板數按阿魏酸峰計算應不低于3000， 對照品溶液的制備取阿魏酸對照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每Iml含10 μ g的溶液，即得， 供試品溶液的制備取本品30粒，研細，傾出內容物，精密稱定，研細，取約4g，精密稱定，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理50分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續濾液15ml，置25ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得， 測定法分別精密吸取對照溶液與供試品溶液各20 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
2.如權利要求1所述的檢測方法，每粒所述產后逐瘀膠囊含當歸和川芎以阿魏酸(C10H10O4)計，不少于 30 μ g。
3.如權利要求1或2所述的檢測方法，含量測定過程中超聲處理的功率為120W，頻率為 59KHz。
【文檔編號】G01N30/90GK103983734SQ201410228669
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年5月26日 優先權日:2014年5月26日
【發明者】李明輝, 王剛 申請人:江西民濟藥業有限公司
專業數控銑床產品供應商
20年生產經驗，實力工廠，精工品質，質量有保障
